Intraductal La entrega al conejo Glándula Mamaria

El objetivo general de este procedimiento es administrar soluciones acuosas al conducto mamario del conejo y visualizar el parto intraductal mediante imágenes de ultrasonido. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología mamaria, como por ejemplo, cómo interactúan los tratamientos de manera diferente con el entorno ductal mamario en comparación con otros sitios de administración. La principal ventaja de esta técnica es que el reactivo de contraste de imagen o cualquier posible terapéutica a evaluar puede administrarse localmente en el tejido donde surgen las lesiones mamarias.

La demostración de la técnica estará a cargo de Amelia Clark, una técnica de mi laboratorio. Para comenzar este procedimiento, afeita cuidadosamente el abdomen caudal de un conejo anestesiado en el área alrededor del tercer y cuarto par de pezones inguinales. Con la mayor parte del vello eliminado, aplique la crema depilatoria en las áreas afeitadas y 10 minutos después de la aplicación, retire la crema con una toalla de papel húmeda humedecida con agua tibia.

Luego, limpie el área con gasas empapadas en alcohol para limpiar el sitio de la inyección. Coloque el conejo en su dorso en un comedero en forma de V forrado con una manta de agua tibia recirculante en una almohadilla absorbente. Para preparar el agente de contraste, reconstituya de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

A continuación, agite suavemente el vial para mezclar. El agente de contraste utilizado aquí es estable a temperatura ambiente durante cuatro a seis horas después de la reconstitución. En este procedimiento localice el tercer y cuarto par de pezones inguinales que se van a inyectar.

A continuación, cargue 0,2 mililitros de solución salina estéril 0,9 en una jeringa de tuberculina Luer Lock de un mililitro con una aguja de calibre 22. Deseche la aguja de calibre 22 una vez que la solución salina esté en la jeringa y reemplácela con una aguja estéril de calibre 25. A continuación, limpie suavemente el área con alcohol isopropílico al 85% en una almohadilla de guaze.

Con el bisel de la aguja hacia arriba y la jeringa paralela al cuerpo del animal, inserte la aguja en el costado del pezón e inyecte lentamente de 0,1 a 0,2 mililitros de solución salina para permitir una mejor visualización de las aberturas ductales. A continuación, cargue 0,2 mililitros de solución inyectable en una jeringa de tuberculina Luer Lock de un mililitro. Sujete la tetina suavemente con el pulgar y el índice y levántela ligeramente para la inyección intraductal.

Mientras mantiene la posición elevada de la tetina, cánula cuidadosamente el conducto de interés con una aguja de punta roma de calibre 25. Después de la canulación, gire suavemente la jeringa Luer Lock en el centro de la aguja de infusión de punta roma hasta que quede bloqueada en su lugar. Levante la tetina e inyecte la solución lentamente para minimizar el daño potencial causado por los fluidos que se mueven rápidamente dentro del conducto.

Ahora aplique una cantidad generosa de gel de ultrasonido centrifugado en la piel del área de interés. Asegúrese de que no haya burbujas en el gel, ya que comprometerán la calidad de la imagen. A continuación, ajuste la profundidad de imagen a seis milímetros.

Coloque el transductor de 21 megahercios en contacto con el gel y escanee el área de interés en modo B. Observe el medio de contraste en la región explorada, incluida la abertura ductal y en todo el conducto para confirmar la administración intraductal exitosa. A continuación, capture y guarde la imagen.

Retire el gel de ultrasonido de la piel del animal con gasas. Después de eso, inspeccione el lugar de la inyección y asegúrese de que no haya signos de traumatismo en la región del pezón o en el tejido circundante. La hinchazón en el área que rodea el pezón probablemente indica una inyección de almohadilla de grasa mamaria en lugar de una inyección intraductal exitosa.

El reactivo de contraste se localiza inmediatamente después del parto y se visualiza 30 minutos después del parto y 45 minutos después del parto. La persistencia del reactivo en el interior del conducto mamario permite la visualización durante todo el tiempo que dure este proceso. Esta imagen muestra el aspecto externo después de la inyección intraductal de 0,2 mililitros de solución azul de Evans.

Al abrir la piel, Evans blue permite la visualización de todo el árbol ductal mamario y confirma la estructura ductal intacta. Y esta imagen muestra todo el espécimen de montura de una región de la glándula mamaria inguinal después de la fijación y tinción con alumbre carmín. Una vez dominada, esta técnica se puede realizar en aproximadamente 15 minutos, excluyendo el tiempo necesario para permitir que la anestesia haga efecto.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar levantar el pezón para enderezar los conductos durante el parto intraductal. Siga en todo momento los lineamientos de bienestar animal de su institución. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros métodos, como la obtención de imágenes avanzadas o el análisis de tejidos de punto final, como un lizo o la inmunohistoquímica, para responder a preguntas adicionales sobre la farmacodinámica o los cambios morfológicos a nivel tisular inducidos por la administración del agente terapéutico.

Después de su desarrollo, esta técnica allana el camino para que los investigadores en biología mamaria exploren la administración de agentes de imagen, así como terapéuticos, en el conducto mamario en el futuro. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo realizar la administración intraductal a la glándula mamaria del conejo.