24 de abril de 2017
las pruebas de comportamiento es el estándar de oro para la determinación de los resultados después de una lesión cerebral, y puede identificar la presencia de discapacidades del desarrollo en los bebés y los niños. reflejos del neurodesarrollo son un indicador precoz de estas anomalías. Una gran cantidad de pruebas de reflejos de desarrollo logra fácilmente en el roedor neonatal se desarrollaron y se describe aquí.
El objetivo general de esta metodología de reflejos de rata neonata es aprender a realizar estas tareas de forma rápida, precisa y comparable. Este método puede responder preguntas clave en el campo de las discapacidades del desarrollo nervioso, como la parálisis cerebral. La principal ventaja de esta técnica es que ofrece una forma de probar los reflejos de desarrollo temprano en las crías de rata recién nacidas.
Al igual que los humanos, los roedores recién nacidos tienen reflejos de desarrollo temprano que ofrecen una ventana al desarrollo posterior. Las personas nuevas en este método tendrán dificultades, ya que los reflejos ocurren rápidamente y pueden ser difíciles de anotar. Es importante ser lo más constante posible.
Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la terapia y el diagnóstico de la parálisis cerebral y las discapacidades del desarrollo. La determinación de las conductas reflejas es el estándar de oro para la determinación y la eficacia de las intervenciones terapéuticas. La demostración visual de este método es fundamental ya que los pasos son difíciles de aprender a través de palabras escritas.
Para empezar, aclimate a las ratas al medio ambiente y a la manipulación humana como se describe en el protocolo de texto adjunto. Una vez aclimatadas, aparea a las ratas para producir una camada de cachorros para las pruebas. A partir del tercer día después del parto, transfiera a los cachorros a una habitación tranquila a una hora constante todos los días.
Deje que se aclimaten durante un mínimo de una hora antes de realizar una serie de pruebas de reflejos del desarrollo neurológico. En la habitación, coloque una lámpara térmica o una almohadilla térmica para mantener la temperatura corporal del cachorro a 36,5 grados centígrados. Además, registre el peso del cachorro cada día.
A continuación, configura una cámara de vídeo con una velocidad de obturación de al menos 1/1000 de segundo para analizar las pruebas de reflejos fotograma a fotograma. Coloque la cámara de manera que esté directamente encima o al lado de la cría de rata y los materiales de prueba durante cada prueba. Para cada una de las siguientes pruebas, realice la prueba todos los días hasta que el cachorro pueda realizar la tarea en dos días consecutivos.
La fecha de la primera ocurrencia es la fecha que debe registrarse para la cuantificación de los datos. A partir del tercer día postnatal, realice la prueba de reflejos de agarre de las extremidades anteriores. Para esta prueba, coloque una varilla roma contra la palma de cada una de las patas delanteras del cachorro, una a la vez, y aplique manualmente una ligera presión.
La presión debe desplazar ligeramente la pata delantera para asegurar que se haga contacto y los cachorros puedan sentir la caña. El agarre aparecerá como la flexión de todos los dedos alrededor de la varilla. La adquisición exitosa de este reflejo ocurre cuando ambas patas delanteras agarran la caña durante dos días seguidos.
A continuación, coloque una varilla roma contra la suela de cada pata trasera y aplique una ligera presión manualmente para realizar la prueba de reflejos de agarre de las extremidades traseras. La ligera presión debe desplazar ligeramente la pata trasera para asegurar que se haga contacto y los cachorros puedan sentir la caña. El agarre exitoso de la varilla aparece como la flexión de los dedos alrededor de la varilla.
La adquisición de este reflejo se produce cuando ambas patas traseras agarran la caña durante dos días seguidos. También a partir del tercer día postnatal, realice la prueba del reflejo de enderezamiento. Para esta prueba, sostenga firmemente al cachorro en posición supina, de modo que las cuatro patas estén en posición vertical.
Suelte al cachorro e inmediatamente inicie el temporizador. El enderezamiento se logra cuando el cachorro puede voltearse o darse la vuelta sobre las cuatro patas y cada pata es perpendicular al cuerpo. Dale a cada cachorro un máximo de 15 segundos para lograr este objetivo.
A partir del cuarto día postnatal, realice la prueba de reflejo de colocación de la extremidad posterior. Para esta prueba, sostenga al cachorro verticalmente en el aire por el torso. Acaricia suavemente el dorso de la pata trasera con una superficie roma, como el borde de una mesa.
Un reflejo de colocación correcto es cuando la cría de rata retira la extremidad trasera estimulada, seguido de la colocación de la extremidad trasera hacia abajo en esa superficie. También a partir del cuarto día postnatal, realice la prueba de evitación del acantilado. Para esta prueba, coloque la cría de rata en el borde de una superficie plana, de modo que las patas delanteras y el hocico de la cría queden sobre el borde.
El resultado correcto es una respuesta protectora en la que la cría de rata se aleja del borde del acantilado. Comience la evaluación de la marcha en el sexto día postnatal. Para esta prueba, coloque a los cachorros en el centro de un círculo de 15 centímetros de diámetro y permita que el cachorro se mueva del círculo durante 30 segundos.
Se realiza una marcha exitosa cuando el cachorro de rata es capaz de mover ambas patas delanteras fuera del círculo en menos de 30 segundos. Comenzar el análisis del sobresalto auditivo en el día 10 postnatal. Aquí, se requiere algo, como una campana, que sea capaz de producir un ruido fuerte.
Coloca la campana directamente sobre el cachorro. Toque el timbre y luego evalúe si hay o no una respuesta de sobresalto. Se observa una respuesta de sobresalto positiva cuando el cachorro muestra un movimiento espasmódico alejándose del sonido.
A partir del día 12 postnatal, coloque a los cachorros en una superficie abierta y no resbaladiza y observe la postura que tiene el cachorro al moverse. Una postura inmadura se refleja por el arrastre del abdomen al moverse, y el apuntamiento perpendicular de ambas patas delanteras y traseras en relación con el cuerpo. Una postura madura se adquiere cuando el cachorro puede levantar el abdomen de la superficie y ambas patas delanteras y traseras apuntan rectas o paralelas al cuerpo al moverse.
También a partir del día 12 postnatal, comience a observar los párpados del cachorro. Registra el día en que se abren ambos párpados. En el día 14 postnatal, comience la prueba de enderezamiento acelerado.
Para esta prueba, coloque al cachorro en posición supina a 30,48 centímetros por encima de una plataforma de aterrizaje de espuma. Suelta al cachorro y observa su capacidad para enderezarse. El enderezamiento adecuado se refiere a cuando el cachorro puede voltearse a la posición prona y aterrizar sobre sus patas.
Las crías recién nacidas expuestas a la inflamación en el útero nacieron significativamente más pequeñas que los controles. La suplementación dietética con brotes de brócoli pudo aumentar el peso al nacer de estas crías. Junto con el peso al nacer, las pruebas de reflejos del neurodesarrollo son una medida predictiva del desarrollo y la maduración cortical anormales, que pueden ser importantes en circunstancias en las que la neuropatología manifiesta no es evidente.
Después del nacimiento, el examen de la colocación de las extremidades posteriores del reflejo neonatal en estos grupos mostró un retraso significativo en la adquisición de este reflejo para las crías expuestas a la inflamación en el útero en comparación con los controles. La suplementación dietética con brotes de brócoli evitó el retraso. Los resultados de la prueba de evitación del acantilado del reflejo neonatal revelaron que las crías expuestas a la inflamación en el útero tardan significativamente en adquirir una respuesta protectora.
Una vez más, el consumo de brotes de brócoli evitó un retraso significativo. Este mismo resultado se observó tras el examen de la marcha refleja neonatal. Durante este procedimiento, se pueden realizar otros métodos, como registros de peso diario, para responder preguntas adicionales como la tasa de crecimiento diario, el crecimiento de recuperación, la gravedad de la lesión y el efecto de la restricción del crecimiento.
Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la neurociencia exploraran las pruebas de reflejos de desarrollo en roedores neonatos. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar pruebas de reflejos de desarrollo temprano en cachorros de rata recién nacidos. Además, debe comprender la importancia de los reflejos conductuales tempranos, ya que proporcionan un biomarcador temprano de la lesión y el efecto de la intervención terapéutica.
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Este artículo presenta una metodología para evaluar los reflejos del desarrollo temprano en ratas neonatales, lo que puede proporcionar información sobre posibles discapacidades del desarrollo. La técnica tiene como objetivo facilitar pruebas precisas y consistentes de estos reflejos, que son cruciales para comprender problemas en el desarrollo nervioso.
La evaluación de reflejos neurodesarrolladores en ratones neonatos proporciona un biomarcador temprano para detectar lesiones cerebrales y evaluar intervenciones terapéuticas en modelos preclínicos. Este enfoque apoya la reducción de riesgos mecanicistas al vincular fenotipos conductuales con resultados neurodesarrolladores, permitiendo una mayor confianza predictiva en la validación de dianas para trastornos del sistema nervioso central. La metodología mejora la continuidad traslacional desde la fase de descubrimiento hasta las etapas preclínicas al ofrecer métricas de reflejos cuantificables y reproducibles.
El método se integra en la continuidad del descubrimiento, desde la biología inicial hasta la identificación de compuestos activos, proporcionando fenotipificación conductual que complementa las evaluaciones moleculares e histológicas en el desarrollo de fármacos para el sistema nervioso central.