High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

Junyan Ma; Inna S. Yanez-Orozco; Soheila Rezaei Adariani; Drew Dolino; Vasanthi Jayaraman; Hugo Sanabria

doi:10.3791/55623

FRET de alta precisión a nivel de molécula única para la determinación de estructuras de biomoléc...

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Biochemistry

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High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

FRET de alta precisión a nivel de molécula única para la determinación de estructuras de biomoléculas

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11:24 min

May 13, 2017

DOI: 10.3791/55623-v

Junyan Ma¹, Inna S. Yanez-Orozco², Soheila Rezaei Adariani², Drew Dolino³, Vasanthi Jayaraman³, Hugo Sanabria²

¹Department of Chemistry,Clemson University, ²Department of Physics and Astronomy,Clemson University, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

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Aquí se presenta un protocolo para experimentos FRET de alta precisión en el nivel de una sola molécula. Además, esta metodología puede usarse para identificar tres estados conformacionales en el dominio de unión al ligando del receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA). Determinar las distancias exactas es el primer paso hacia la construcción de modelos estructurales basados en experimentos FRET.

El objetivo general de este protocolo es realizar mediciones de distancia entre colorantes de alta precisión utilizando la detección de fluorescencia multiparamétrica de F

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