Name: Prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: Aprende la prueba de reconocimiento de objetos novedosos para evaluar aprendizaje y memoria en ratones. Este protocolo eficiente permite estudiar cognición y probar intervenciones farmacológicas en neurociencia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Trabajo citado y publicado previamente por el autor fue apoyado por una subvención del Instituto Nacional de Salud Mental (MH088480). El autor desea agradecer a su antiguo mentor, el Dr. James O'Donnell por su apoyo en este proyecto. Esta publicación es apoyada por una subvención del Instituto Nacional de salud (T32 DA007135).

aquí se realizan todos los procedimientos fueron sometidos a y aprobado por el cuidado Animal y Use Comité y se llevaron a cabo siguiendo las directrices NIH.
 1. selección de objetos y disposición Experimental <ol><li>seleccionar los objetos que son suficientemente diferentes como para ser fácilmente discriminados por los ratones, pero tienen un grado similar de complejidad (textura, forma, patrones de color y brillo, etc.) con el fin de minimizar cualquier potencial inducida por preferencia de objeto que puede sesgar los resultados (véase Ennaceur 2010 para una descripción comprensiva del objeto opción 7).
	<ol><li>Prueba de preferencia innata y discriminación (ver pasos 2 &#38; 3).</li>
		<li>Objetos de uso que son tamaño de ratón o sólo ligeramente más grande para alentar la exploración ( figura 1). Para reducir la preferencia inducida, asegurar que los ratones son capaces de subir ni objeto, u objetos aunque habilidad para escalar un objeto puede aumentar el interés en la exploración (tiempo gastado sentado solo en un objeto no cuenta hacia el tiempo de exploración)</li>
		<li>Tener al menos 2 copias de cada objeto. Sin embargo, para minimizar posibles señales de olor durante la prueba, tener al menos 3 de cada objeto, duplicados para el entrenamiento y de prueba.</li>
		<li>Uso objetos de material irrompible, como la pérdida de un objeto debidos a daño durante la experimentación podrían interferir en la continuidad de la prueba y potencialmente causar daños o lesiones a los animales.</li>
		<li>Limpie los objetos antes y entre uso (etanol al 70% vol/vol es apropiado).</li>
	</ol></li> <li>Para minimizar el estrés de iluminación brillante, utilice iluminación difusa, baja, con el centro del laberinto iluminado alrededor de 20 lux. Utilice una temperatura y humedad similar a las condiciones de vivienda habitual. Si los ratones son trasladados de una sala de la vivienda a otra habitación para el experimento, aclimatar ratones a su nueva habitación durante al menos 1 h antes de su uso cada día.</li>
	<li>Manija ratones bien antes del entrenamiento. Porque la prueba se basa en la tendencia natural de los roedores para explorar novedad, reducir cualquier estrés o ansiedad de manejo que puede interferir con su deseo de explorar el campo y posteriormente, los objetos. Lo ideal es manejar ratones 1 - 2 veces / día durante al menos 1 minuto, 1 a 2 semanas antes de la prueba 15 , 29.</li>
	<li>Para la arena principal, utilice una cámara cuadrada (aproximadamente 40 cm x 40 cm x 40 cm) de blanco o negro, plástico no poroso, en contraste con el color del ratón. Como alternativa, utilizar un ed. arena redonda específicamente, al usar ratones ansiosos que pueden sentarse en las esquinas de un cuadrado arena, un estadio redondo puede ser preferible a conducta exploratoria 18 , 30.
	<ol><li>En día de entrenamiento, colocar objetos idénticos 2 en la diagonal (es decir, uno en la esquina de NW y uno en la esquina SE). Si los objetos son demasiado ligeros y el ratón se pueden mover, fijarlos al suelo. Extraíble obras masilla de montaje bien.</li>
		<li>Para día de la prueba, utilice la copia de 3 rd de cada objeto para colocar un objeto familiar y un nuevo objeto en la misma diagonal como el día de entrenamiento ( figura 2).</li>
		<li>Contrarrestar el uso de cada conjunto de objetos de modo que cada objeto se utiliza igualmente como un objeto familiar y como un objeto nuevo. Además, contrarrestar la ubicación del objeto nuevo para cada una de las 4 esquinas de la arena. Asegúrese de tener en cuenta que diagonal se utiliza para que animal para que la diagonal en la jornada de formación es la misma que la utilizada en el día de la prueba, para cada ratón.</li>
		<li>Limpie bien el aparato y objetos para quitar señales de olor antes y entre uso (etanol al 70% vol/vol es apropiado).</li>
	</ol></li> <li>Coloque la cámara directamente arriba del aparato para la visión óptima de la exploración. Sólo hay que usar el software con detección de punto de la nariz para análisis preciso. Si utiliza el software, captura una imagen de fondo con los objetos en su lugar antes de comenzar. En el software, configurar el área de exploración para ser aproximadamente 2-3 cm alrededor del objeto.</li>
	<li>Para reducir la interferencia del experimentador, grabar la prueba y anotar más tarde. Ciego el scorer a las condiciones experimentales. Si anota manualmente durante el experimento, asegúrese de que el experimentador es más de 1 metro de la arena y no es visible al ratón. 
	Nota: Cualquier momento el ratón pasa sobre el objeto sin activo vibrissae barriendo o sniffing no cuenta como tiempo de exploración.</li>
	Exploración de la <li>definir como cuando el ratón &#39; ruido s está apuntando hacia el objeto y dentro de 2-3 cm del objeto, con activo vibrissae barriendo o inhalación. No se tienen en cuenta cualquier momento sentado en el objeto sin la indicación de exploración activa.</li>
</ol> 2. Necesarios experimentos piloto <ol><li>pruebas de preferencia inducida <ol><li>para la habituación, quitar el ratón de su jaula casera y coloque en el centro de la arena abierta. Permitir que el ratón para explorar libremente por 5 min</li>
		<li>En día de entrenamiento (T1), colocar 2 objetos diferentes en cuadrantes opuestos del aparato, (es decir, NW y esquinas SE). Quitar el ratón de su jaula casera y coloque en el centro de la arena abierta. Permite la exploración libre durante 10 minutos</li>
		<li>Calcular el índice de discriminación. Si no hay ninguna preferencia inducida, el índice de discriminación debe ser en o cerca de cero. Los objetos que muestran preferencia no deberían utilizarse para ORT.</li>
	</ol></li> <li>Pruebas de capacidad de discriminación <ol><li>para la habituación, quitar el ratón de su jaula casa y colocarlo en medio de la arena abierta. Permitir que el ratón para explorar libremente por 5 min</li>
		<li>En la sesión de entrenamiento (T1), colocar objetos idénticos 2 en cuadrantes opuestos. Coloque el ratón en el centro de la arena y permitir que el ratón para explorar durante 10 minutos</li>
		<li>En pruebas de período de sesiones (T2), coloque uno del objeto utilizado durante T1 y un nuevo objeto en cuadrantes opuestos (es decir, esquinas SE y NW). Sesenta minutos después de la T1, coloque el ratón en el centro de la arena y permite la exploración libre durante 10 minutos</li>
		<li>Calcular el índice de discriminación. En un intervalo de retención de 60 min, el índice de discriminación debe estar por encima de 0.25.</li>
	</ol></li></ol> 3. Procedimiento experimental <ol><li><ol><li>la habituación quitar el ratón de su jaula casera y coloque en el centro de la arena abierta, vacía. Permita la libre exploración de la arena durante 5 minutos. Una vez vacía la jaula casera, guardarlo para su uso como una jaula de tenencia al día siguiente.</li>
		<li>Al final de 5 minutos, quite el ratón y coloque en una jaula de tenencia. No devuelva el ratón a su jaula original, o esto puede afectar el comportamiento de los ratones restantes a probarse.</li>
		<li>Limpie bien el aparato entre ratones con etanol al 70% vol/vol. 
		Nota: Durante la habituación, ansiedad-como comportamiento puede evaluarse calculando el tiempo de permanencia en el centro (ver Prut &#38; Belzung 2003 31). Esto es una medida útil cuando se considera la longitud de tiempo de T1. Ratones de ansiedad más altos pueden requerir una sesión de 10 minutos para alcanzar el criterio de exploración mínimo.</li>
	</ol></li> <li>Formación (T1) <ol><li>colocar dos objetos idénticos en cuadrantes opuestos de la arena (es decir, NE esquina y SW).</li>
		<li>24 h después de la habituación, quitar el ratón de su jaula casera y coloque en el centro de la arena, equidistante de los objetos idénticos 2.</li>
		<li>Permite la exploración libre de un mínimo de 5 minutos. Si se utiliza una cepa de ratones que se sabe que tienen baja actividad locomotor o exploración, (es decir, la mayoría de ratones no alcanzan un mínimo de 20 exploración de s de ambos objetos por 5 min, como se observa en las experiencias piloto o la literatura), extender la prueba a 10 min para todos mic e en la cohorte de.</li>
		<li>Al final de la prueba, quite el ratón y colocar en la jaula de tenencia. Una vez vacía la jaula casera, guardarlo para su uso como la jaula de retención en la prueba día.</li>
		<li>Limpie bien el aparato y objetos entre ratones con etanol al 70% vol/vol.</li>
	</ol></li> <li>Pruebas (T2) <ol><li>Coloque un objeto que se utiliza durante T1 (es decir, el objeto familiar) y un nuevo objeto en cuadrantes opuestos de la arena. Utilizar los mismos lugares utilizados durante T1 para cada ratón.</li>
		<li>En el T1 T2 intervalo de elección, quitar el ratón de su jaula casa y colóquelo en el ámbito del centro, equidistante de los objetos familiares y la novela. 
		Nota: En un intervalo de retención de 24 horas, la mayoría ratones no será capaces de discriminar entre el objeto conocido y novedoso (generalmente -0.2 &#60; d2 &#60; 0.2, en comparación con un positivo control de 32). Si probando efectos Nootrópicos, utilice este momento para sonda para mejorar la memoria. Para probar para los déficits de memoria, utilice un intervalo de retención más corto de cualquier lugar entre 20 minutos a 4 horas, dependiendo de la cepa de ratón.</li>
		<li>Permite la exploración libre durante 10 minutos. Al final de la prueba, quite el ratón y colocar en la jaula de tenencia.</li>
	</ol></li> <li>Tanto para T1 como T2, anotar los primeros 5 minutos. Si el ratón no cumple con el tiempo de exploración mínimo de 20 s para ambos objetos, continuar anotando más allá de 5 minutos hasta la exploración total sea superior a 20 s.</li>
</ol> 4. Análisis de datos <ol><li>Criterios de exclusión <ol><li>durante entrenamiento (T1) y pruebas (T2), calcular el tiempo total de exploración para ambos objetos para cada sesión (e1 y e2). Más ratones deben alcanzar una mínima exploración total para ambos objetos de 20 s por 5 minutos</li>
		<li>Extender T1 y T2 tiempo de 10 min para las cepas de ratones que tienen bajo exploración y no cumplen con este criterio mínimo por 5 minutos, según lo observado durante la prueba piloto.</li>
		<li>Puntuación comportamiento durante 5 minutos o más allá de 5 minutos hasta alcanzar el criterio mínimo de 20 s.</li>
		<li>Si los ratones no alcanzan un mínimo de s 20 de exploración para ambos objetos para T1 o T2 en 10 min, excluir de análisis, no se puede confirmar que pasaban bastante tiempo explorando para aprender/discriminar.</li>
	</ol></li> <li>Vs absolutas relativa análisis Nota: fórmulas diferentes para el análisis y su relación con otros pueden verse en la tabla 1.
	E1 <ol><li>calcular el tiempo total de exploración durante el entrenamiento para 2 objetos idénticos, donde a1 y a2 son los objetos idénticos. 
		e1 = a1 + a2</li>
		E2 <li>calcular el tiempo total de exploración durante la prueba para el objeto conocido (a) y la novela de objeto (b). 
		e2 = a + b</li>
		Objeto de <li>calcular d1 como simplemente el tiempo explorando la novela menos tiempo dedicado a explorar el objeto familiar. La medida de discriminación absoluta (d1) no toma en cuenta las diferencias en el tiempo de exploración entre ratones o tratamiento de grupos, aunque en ciertas circunstancias, puede ser una medida más sensible de 2. 
		d1 = b-a</li>
		<li>Calcula d2 como el tiempo de explorar el nuevo objeto menos el tiempo dedicado a explorar el objeto familiar dividido por el tiempo total de exploración. La medida más comúnmente usada es un valor de discriminación relativa referido a menudo como el índice de discriminación (d2), que no es influenciado por las diferencias en el tiempo de exploración. Esto significa que todos los valores caen entre -1 y + 1. 
		d2 = d1/e2</li>
		<li>o bien, calcular el reconocimiento o preferencia índice (d3) 3. Este es el tiempo de explorar el nuevo objeto dividido por el tiempo total. Esto significa que todos los valores caen entre 0 y 1. A menudo es multiplicado por 100 y utiliza como valor porcentual. 
		d3 = e2/b * 100</li>
	</ol></li> <li>Análisis estadístico <ol><li>utilizando los valores de discriminación promedio para cada grupo, determinar el rendimiento de la memoria usando ANOVA unidireccional. Para su posterior análisis, hacer comparaciones post hoc de dos vías con los grupos control positivo/negativo y estado del vehículo tratado vs.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Ennaceur, A., Meliani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats+III.+Spatial+vs.+non-spatial+working+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats III. Spatial vs. non-spatial working memory.</a> Behav. Brain Res. 51 (1), 83-92 (1988).</li>
<li>Akkerman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+methodological+considerations+on+exploration+and+discrimination+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: methodological considerations on exploration and discrimination measures.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 335-347 (2012).</li>
<li>Antunes, M., Biala, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+novel+object+recognition+memory%3A+neurobiology%2C+test+procedure%2C+and+its+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22Cogn.+Process%22%5BJournal%5D)">The novel object recognition memory: neurobiology, test procedure, and its modifications.</a> Cogn. Process. 13 (2), 93-110 (2012).</li>
<li>Leger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Object recognition test in mice.</a> Nat. Protoc. 8 (12), 2531-2537 (2013).</li>
<li>van Goethem, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+Rodent+species%2C+strains%2C+housing+conditions%2C+and+estrous+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: Rodent species, strains, housing conditions, and estrous cycle.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 323-334 (2012).</li>
<li>Lueptow, L. M., Zhang, C. -G., O'Donnell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+GMP-mediated+memory+enhancement+in+the+object+recognition+test+by+inhibitors+of+phosphodiesterase-2+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cyclic GMP-mediated memory enhancement in the object recognition test by inhibitors of phosphodiesterase-2 in mice.</a> Psychopharmacology (Berl). , (2015).</li>
<li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-trial+object+recognition+in+rats+and+mice%3A+Methodological+and+theoretical+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">One-trial object recognition in rats and mice: Methodological and theoretical issues.</a> Behav. Brain Res. 215 (2), 244-254 (2010).</li>
<li>Berlyne, D. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/232522058_Novelty_and_Curiosity_as_Determinants_of_Exploratory_Behavior">Novelty and curiosity as determinants of exploratory behavior.</a> Br. J. Psychol. 41 (1-2), 68-80 (1950).</li>
<li>Ennaceur, A., Delacour, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats+I.+Behavioral-data%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats I. Behavioral-data.</a> Behav. Brain Res. 31 (1), 47-59 (1988).</li>
<li>Aguilar-Valles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+stress+response+in+rats+trained+in+the+water-maze%3A+differential+expression+of+corticotropin-releasing+hormone%2C+CRH-R1%2C+glucocorticoid+receptors+and+brain-derived+neurotrophic+factor+in+limbic+regions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Analysis of the stress response in rats trained in the water-maze: differential expression of corticotropin-releasing hormone, CRH-R1, glucocorticoid receptors and brain-derived neurotrophic factor in limbic regions.</a> Neuroendocrinology. 82 (5-6), 306-319 (2005).</li>
<li>Anisman, H., Hayley, S., Kelly, O., Borowski, T., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychogenic%2C+neurogenic%2C+and+systemic+stressor+effects+on+plasma+corticosterone+and+behavior%3A+Mouse+strain-dependent+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Psychogenic, neurogenic, and systemic stressor effects on plasma corticosterone and behavior: Mouse strain-dependent outcomes.</a> Behav. Neurosci. 115 (2), 443-454 (2001).</li>
<li>Kim, J. J., Diamond, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stressed+hippocampus%2C+synaptic+plasticity+and+lost+memories%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The stressed hippocampus, synaptic plasticity and lost memories.</a> Nat. Rev. Neurosci. 3 (6), 453-462 (2002).</li>
<li>Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity%2C+reliability+and+utility+of+the+chronic+mild+stress+model+of+depression%3A+a+10+year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model of depression: a 10 year review and evaluation.</a> Psychopharmacology (Berl). 134, 319-329 (1997).</li>
<li>Leussis, M. P., Bolivar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Habituation+in+rodents%3A+A+review+of+behavior%2C+neurobiology%2C+and+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Habituation in rodents: A review of behavior, neurobiology, and genetics.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 30 (7), 1045-1064 (2006).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taming+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nat. Methods. 7 (10), 825-826 (2010).</li>
<li>Dere, E., Huston, J. P., De Souza Silva, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacology%2C+neuroanatomy+and+neurogenetics+of+one-trial+object+recognition+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The pharmacology, neuroanatomy and neurogenetics of one-trial object recognition in rodents.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 31, 673-704 (2007).</li>
<li>Winters, B. D., Saksida, L. M., Bussey, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+memory%3A+Neurobiological+mechanisms+of+encoding%2C+consolidation+and+retrieval%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Object recognition memory: Neurobiological mechanisms of encoding, consolidation and retrieval.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 32, 1055-1070 (2008).</li>
<li>Rutten, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-dependent+involvement+of+cAMP+and+cGMP+in+consolidation+of+object+memory%3A+studies+using+selective+phosphodiesterase+type+2%2C+4+and+5+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Time-dependent involvement of cAMP and cGMP in consolidation of object memory: studies using selective phosphodiesterase type 2, 4 and 5 inhibitors.</a> Eur. J. Pharmacol. 558 (1-3), 107-112 (2007).</li>
<li>Prickaerts, J., De Vente, J., Honig, W., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((cGMP%2C+but+not+cAMP%2C+in+rat+hippocampus+is+involved+in+early+stages+of+object+memory+consolidation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">cGMP, but not cAMP, in rat hippocampus is involved in early stages of object memory consolidation.</a> Eur. J. Pharmacol. 436 (1-2), 83-87 (2002).</li>
<li>Bertaina-Anglade, V., Enjuanes, E., Morillon, D., Drieu la Rochelle, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+object+recognition+task+in+rats+and+mice%3A+A+simple+and+rapid+model+in+safety+pharmacology+to+detect+amnesic+properties+of+a+new+chemical+entity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">The object recognition task in rats and mice: A simple and rapid model in safety pharmacology to detect amnesic properties of a new chemical entity.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 54 (2), 99-105 (2006).</li>
<li>Li, S., Wang, C., Wang, W., Dong, H., Hou, P., Tang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+mild+stress+impairs+cognition+in+mice%3A+From+brain+homeostasis+to+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Chronic mild stress impairs cognition in mice: From brain homeostasis to behavior.</a> Life Sci. 82 (17), 934-942 (2008).</li>
<li>Frick, K. M., Gresack, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+Differences+in+the+Behavioral+Response+to+Spatial+and+Object+Novelty+in+Adult+C57BL%2F6+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sex Differences in the Behavioral Response to Spatial and Object Novelty in Adult C57BL/6 Mice.</a> Behav. Neurosci. 117 (6), 1283-1291 (2003).</li>
<li>Grayson, B., Leger, M., Piercy, C., Adamson, L., Harte, M., Neill, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+disease-related+cognitive+impairments+using+the+novel+object+recognition+%28NOR%29+task+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Assessment of disease-related cognitive impairments using the novel object recognition (NOR) task in rodents.</a> Behav. Brain Res. 285, 176-193 (2015).</li>
<li>Tuscher, J. J., Fortress, A. M., Kim, J., Frick, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+object+recognition+and+object+placement+by+ovarian+sex+steroid+hormones%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of object recognition and object placement by ovarian sex steroid hormones.</a> Behav. Brain Res. 285, 140-157 (2015).</li>
<li>Balderas, I., Moreno-Castilla, P., Bermudez-Rattoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D1+receptor+activity+modulates+object+recognition+memory+consolidation+in+the+perirhinal+cortex+but+not+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Dopamine D1 receptor activity modulates object recognition memory consolidation in the perirhinal cortex but not in the hippocampus.</a> Hippocampus. 23 (10), 873-878 (2013).</li>
<li>Akkerman, S., Blokland, A., Prickaerts, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mind+the+gap%3A+delayed+manifestation+of+long-term+object+memory+improvement+by+phosphodiesterase+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Mind the gap: delayed manifestation of long-term object memory improvement by phosphodiesterase inhibitors.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 109, 139-143 (2014).</li>
<li>Domek-Łopacińska, K., Strosznajder, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+selective+inhibition+of+cyclic+GMP+hydrolyzing+phosphodiesterases+2+and+5+on+learning+and+memory+processes+and+nitric+oxide+synthase+activity+in+brain+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of selective inhibition of cyclic GMP hydrolyzing phosphodiesterases 2 and 5 on learning and memory processes and nitric oxide synthase activity in brain during aging.</a> Brain Res. 1216, 68-77 (2008).</li>
<li>Reneerkens, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+phoshodiesterase+type+2+or+type+10+reverses+object+memory+deficits+induced+by+scopolamine+or+MK-801%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Inhibition of phoshodiesterase type 2 or type 10 reverses object memory deficits induced by scopolamine or MK-801.</a> Behav. Brain Res. 236 (1), 16-22 (2013).</li>
<li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Housing%2C+husbandry+and+handling+of+rodents+for+behavioral+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments.</a> Nat. Protoc. 1 (2), 936-946 (2006).</li>
<li>Şık, A., van Nieuwehuyzen, P., Prickaerts, J., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+different+mouse+strains+in+an+object+recognition+task%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Performance of different mouse strains in an object recognition task.</a> Behav. Brain Res. 147 (1-2), 49-54 (2003).</li>
<li>Prut, L., Belzung, C., Rabelias, U. F., Psychobiologie, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+as+a+paradigm+to+measure+the+effects+of+drugs+on+anxiety-like+behaviors+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors a review.</a> Eur. J. Pharmacol. 463, 3-33 (2003).</li>
<li>Akkerman, S., Prickaerts, J., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+statistical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: statistical considerations.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 317-322 (2012).</li>
<li>Balderas, I., Rodriguez-Ortiz, C. J., Bermudez-Rattoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrieval+and+reconsolidation+of+object+recognition+memory+are+independent+processes+in+the+perirhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Retrieval and reconsolidation of object recognition memory are independent processes in the perirhinal cortex.</a> Neuroscience. 253, 398-405 (2013).</li>
<li>de curtis, M., Pare, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rhinal+cortices%3A+a+wall+of+inhibition+between+the+neocortex+and+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The rhinal cortices: a wall of inhibition between the neocortex and the hippocampus.</a> Prog. Neurobiol. 74 (2), 101-110 (2004).</li>
<li>Brown, M. W., Barker, G. R. I., Aggleton, J. P., Warburton, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+pharmacological+interventions+indicate+concerning+the+role+of+the+perirhinal+cortex+in+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychologia%22%5BJournal%5D)">What pharmacological interventions indicate concerning the role of the perirhinal cortex in recognition memory.</a> Neuropsychologia. 50 (13), 3122-3140 (2012).</li>
<li>Moore, S. J., Deshpande, K., Stinnett, G. S., Seasholtz, A. F., Murphy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conversion+of+short-term+to+long-term+memory+in+the+novel+object+recognition+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Conversion of short-term to long-term memory in the novel object recognition paradigm.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 105, 174-185 (2013).</li>
<li>Suzuki, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomy%2C+physiology+and+functions+of+the+perirhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The anatomy, physiology and functions of the perirhinal cortex.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 6, 179-186 (1996).</li>
<li>Wan, H., Aggleton, J. P., Brown, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+contributions+of+the+hippocampus+and+perirhinal+cortex+to+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Different contributions of the hippocampus and perirhinal cortex to recognition memory.</a> J. Neurosci. 19 (3), 1142-1148 (1999).</li>
<li>Warburton, E. C., Brown, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Findings+from+animals+concerning+when+interactions+between+perirhinal+cortex%2C+hippocampus+and+medial+prefrontal+cortex+are+necessary+for+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychologia%22%5BJournal%5D)">Findings from animals concerning when interactions between perirhinal cortex, hippocampus and medial prefrontal cortex are necessary for recognition memory.</a> Neuropsychologia. 48 (8), 2262-2272 (2010).</li>
</ol>

El autor no tiene nada que revelar.

La ORT es un método eficaz y flexible para el estudio de aprendizaje y la memoria en ratones. Cuando se configura un experimento, es importante considerar una serie de variables que pueden afectar el resultado. Como en los resultados representativos, la cepa de ratón afectará tanto intervalo de retención y tiempo de exploración. Una disminución en el tiempo de exploración puede sesgar o máscara resulta en una discriminación absoluta análisis2,3,<sup cl...

La prueba de reconocimiento de objeto (ORT), también conocido como la prueba del reconocimiento de la novela objeto (ni), es un medio relativamente rápido y eficiente para probar diferentes fases de aprendizaje y memoria en ratones. Originalmente fue descrito por Ennaceur y Delacour en 1988 y utilizado principalmente en ratas1; sin embargo, desde entonces, ha sido exitosamente adaptado para uso en ratones2,3,4,5,6,7. La prueba se basa en tan sólo tres sesiones: sesión de una habituación, un entrenamiento y una prueba de sesión. Formación implica simplemente exploración visual de dos objetos idénticos, mientras que la sesión de la prueba consiste en sustituir uno de los objetos previamente explorados con un objeto nuevo. Porque los roedores tienen una preferencia innata por la novedad, un roedor que recuerda el objeto familiar pasa más tiempo explorando la novela objeto de8,7,9.
La principal ventaja de la ORT sobre otras pruebas de memoria de roedores es que se basa en la propensión natural de los roedores para explorar novedad8. Por lo tanto, no hay numerosas sesiones de entrenamiento o cualquier refuerzo positivo o negativo para motivar el comportamiento. Esto significa que la ORT es mucho menos estresante, con respecto a otras pruebas10,11,12,13,14,15y requiere a la significativamente menos tiempo para ejecutar que comúnmente emplean memoria pruebas, como el laberinto acuático de Morris o el laberinto de Barnes, que puede tardar hasta una semana o más. En consecuencia, las condiciones de la ORT más de cerca se asemejan a los utilizados en el estudio de la cognición humana, incrementar la validez ecológica de la prueba sobre muchas otras pruebas de memoria de roedores. Del mismo modo, porque ORT es una tarea de memoria visual simple, ha sido exitosamente adaptado para uso en numerosas especies, incluyendo seres humanos y primates no humanos, para evaluar diferentes aspectos de entre las especies de la memoria declarativa 2,16 ,17. Por último, la ORT puede modificarse fácilmente para examinar diferentes fases del aprendizaje y la memoria (es decir, adquisición, consolidación o recuperación), para evaluar diferentes tipos de memoria (e.g., memoria espacial), o para evaluar la retención de diferentes intervalos (es decir, a corto plazo memoria a largo plazo vs ).
La versatilidad de la ORT proporciona una plataforma para aplicaciones de investigación innumerables. Estudios pueden hacer uso de agentes farmacológicos para alterar o mejorar la memoria. Variando el tiempo de administración antes o después del entrenamiento o antes de la prueba puede insinúan neural subyacente mecanismos que conducen a interrumpen o mayor memoria6,18,19, 20. de manera similar, la tecnología de optogenetic puede ser utilizado en estos mismo varios puntos de tiempo para mirar la activación/inhibición neural que contribuye a las distintas fases del aprendizaje y la memoria. La tro también es apropiado para evaluar diferencias en animales transgénicos, en los estudios de la lesión, o en modelos neurodegenerativos o en envejecimiento estudios21,22,23,24, 25 , 26 , 27 , 28. el tiempo entre la formación y de prueba, conocido como el intervalo de retención, puede modificarse para evaluar cualquiera de estos cambios en la memoria de corto y largo plazo26. En última instancia, la ORT puede utilizarse como una herramienta para el estudio de cambios farmacológicos, genéticos y neurológicos en el aprendizaje y la memoria, o pueden utilizar estas herramientas para el estudio de la base del aprendizaje y la memoria en la ORT.

<table><tbody><tr><td>Caja de campo abierto</td><td>Panlab/Harvard Apparatus LE800SC</td><td></td><td>Disponible en gris, blanco o negro</td></tr><tr><td>ANY-maze</td><td>Stoelting Co.</td><td>60000</td><td>Sistema de seguimiento del comportamiento</td></tr><tr><td>EthoVisionXT 12</td><td>Noldus</td><td></td><td>Sistema de seguimiento del comportamiento; requiere seguimiento de 3 puntos</td></tr><tr><td>Cámara de video</td><td>Cualquier</td><td></td><td>cámara de video debe montarse directamente sobre la cabeza del aparato</td></tr><tr><td>70% Etanol&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2818-4</td><td>Antes de comenzar las pruebas y entre pruebas, cada objeto debe limpiarse cuidadosamente. También se deben limpiar el suelo y las paredes del aparato.</td></tr></tbody></table>

prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

La prueba de reconocimiento de objeto (ORT) es un ensayo de comportamiento utilizado para la investigación de diversos aspectos del aprendizaje y la memoria en ratones. La ORT es bastante simple y puede completarse en 3 días: día de habituación, jornada de formación y pruebas. Durante el entrenamiento, el ratón está permitido explorar 2 objetos idénticos. En el día del examen, uno de los objetos de formación se sustituye por un nuevo objeto. Porque los ratones tienen una preferencia innata por la novedad, si el ratón reconoce el objeto familiar, pasará la mayor parte de su tiempo en el nuevo objeto. Debido a esta preferencia innata, no hay necesidad de refuerzo positivo o negativo o largos calendarios de formación. Además, también puede modificarse la ORT para numerosas aplicaciones. El intervalo de retención puede ser acortado para examinar la memoria a corto plazo, o alargado para sonda de memoria a largo plazo. Intervención farmacológica puede utilizarse en varias veces antes del entrenamiento, después del entrenamiento o antes de la llamada a investigar diferentes fases del aprendizaje (es decir, adquisición, consolidación temprana o tardía o memoria). En general, la ORT es una prueba relativamente poco estrés, eficiente para la memoria en ratones y es apropiada para la detección de cambios neuropsicológicos tras manipulaciones farmacológicas, biológicas o genéticas.

Una configuración experimental general de la ORT se muestra en la figura 2. En la habituación ratones día (T0) se colocan en el terreno vacío por 5 min 24 horas más tarde, ratones se colocan en el compartimiento con 2 objetos idénticos y permitió explorar libremente hasta 10 minutos (T1). En la prueba el día (T2), los ratones nuevamente se colocan en la arena, pero con un objeto familiar y un nuevo objeto y permite explorar hasta 10 minutos. El intervalo de r...

La prueba de reconocimiento de objeto (ORT) es un ensayo sencillo y eficaz para evaluar el aprendizaje y la memoria en ratones. La metodología se describe a continuación.

Prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

El objetivo general de este ensayo conductual es evaluar diversos aspectos del aprendizaje y la memoria en ratones. Este método puede ayudar a responder numerosas preguntas en el campo de la cognición de roedores, desde los aspectos básicos para desarrollar una comprensión más profunda de ciertos procesos de aprendizaje y memoria en ratones, hasta cuestiones más complejas, como el deterioro cognitivo, incluyendo modelos de enfermedades como la enfermedad de Alzheimer, hasta la exploración de posibles mejoras cognitivas. La principal ventaja del ORT es su simplicidad, eficiencia y flexibilidad para estudiar el aprendizaje y la memoria en ratones.Este procedimiento será demostrado por Andrei Jeltyi, un técnico de laboratorio de nuestro laboratorio. Comience seleccionando objetos del tamaño de una topa que puedan ser fácilmente discriminados por el animal, pero que tengan un grado similar de complejidad en sus características, como textura, forma o brillo, para minimizar cualquier preferencia inducida por el objeto que pudiera sesgar los resultados. Además, para reducir aún más las preferencias inducidas, asegúrese de que los ratones puedan trepar sobre ambos objetos o sobre ninguno de ellos.La capacidad de trepar sobre un objeto puede aumentar el interés por la exploración. Luego, para minimizar el estrés causado por la iluminación intensa, utilice una iluminación tenue difusa con el centro del laberinto iluminado alrededor de 20 lux. Acostumbre a los ratones a cualquier nueva sala de pruebas durante al menos una hora antes de su uso cada día y mantenga la temperatura y la humedad similares a las condiciones habituales de alojamiento.Tenga en cuenta que los ratones deben manipularse de una a dos veces al día durante al menos un minuto, durante un período de una a dos semanas antes de la prueba. Por último, para la arena principal, utilice una cámara cuadrada hecha de plástico no poroso blanco o negro, en contraste con el color del ratón. Comience retirando al ratón de su jaula de alojamiento y colóquelo en el centro de la arena abierta y vacía.Permita una exploración libre de la arena durante cinco minutos. Una vez que la jaula de origen esté vacía, guárdela para usarla como jaula de contención al día siguiente. Al final de los cinco minutos, retire el ratón y colóquelo en una jaula de contención.No devuelva el ratón a su jaula original, ya que esto podría afectar el comportamiento de los ratones restantes que deben ser evaluados. A continuación, limpie minuciosamente el aparato entre cada ratón utilizando etanol al 70 % volumen por volumen. Después, comience la fase de entrenamiento o T1 colocando dos objetos idénticos en cuadrantes opuestos de la arena.Por ejemplo, uno en la esquina noroeste y otro en la esquina sureste. Sujete cualquier objeto que sea demasiado ligero al piso con masilla de montaje removible. Equilibre el uso de cada conjunto de objetos, así como la ubicación del objeto novedoso en cada una de las cuatro esquinas de la arena.Asegúrese de saber cuál diagonal se utiliza para cada animal, de modo que la diagonal empleada el día de entrenamiento sea la misma que la utilizada el día de prueba para cada ratón. Veinticuatro horas después de la habituación, retire al ratón de su jaula de alojamiento y colóquelo en el centro de la arena, a igual distancia de los dos objetos idénticos, para comenzar el entrenamiento. Permita una exploración libre durante un mínimo de cinco minutos; si se trabaja con una cepa de ratones conocida por presentar baja actividad locomotora o exploratoria, prolongue la prueba a 10 minutos para todos los ratones en los grupos.Al finalizar el ensayo de entrenamiento, retire al ratón y colóquelo en la jaula de espera. Una vez que la jaula de origen esté vacía, guárdela para usarla como jaula de espera el día de la prueba. Asegúrese de limpiar el aparato y los objetos entre cada ratón.A continuación, inicie la fase de prueba o T2 colocando el objeto familiar utilizado durante el entrenamiento y un objeto novedoso en cuadrantes opuestos de la arena. Utilice las mismas ubicaciones que usó durante el entrenamiento para cada ratón. En el intervalo de selección entre T1 y T2, retire al ratón de su jaula de alojamiento y colóquelo en el centro de la arena, a igual distancia del objeto familiar y del objeto novedoso.Permita una exploración libre durante 10 minutos. Finalmente, al final del ensayo de prueba, retire el ratón y colóquelo en la jaula de contención. Para el análisis, se define exploración como la nariz orientada hacia el objeto a una distancia de dos a tres centímetros con movimientos activos de barrido del bigote.Sin embargo, el tiempo en que el ratón está sentado sobre el objeto no se cuenta como tiempo de exploración. Para T1 y T2, registre los primeros cinco minutos y calcule el tiempo total de exploración de ambos objetos en cada sesión. Si el ratón no alcanza el tiempo mínimo de exploración de 20 segundos para ambos objetos, continúe registrando más allá de los cinco minutos hasta que el tiempo total de exploración supere los 20 segundos.Extienda el tiempo de T1 y T2 a 10 minutos para cepas de ratones que presentan baja exploración y no cumplen con este criterio mínimo a los cinco minutos, según se observó durante las pruebas piloto. Finalmente, si los ratones no alcanzan un mínimo de 20 segundos de exploración para ambos objetos en T1 o T2 a los 10 minutos, exclúyalos del análisis, ya que no puede confirmarse que el animal haya dedicado suficiente tiempo a explorar para aprender y discriminar. La tarea de reconocimiento de objetos es un método eficiente y flexible para estudiar el aprendizaje y la memoria en ratones, en la cual se ha demostrado que los inhibidores de la fosfodiesterasa 2 mejoran el desempeño durante esta tarea.En comparación con el vehículo, la administración de los inhibidores de la PDE2 bay 60-7550 o ND7001 mejoró significativamente la memoria de manera dependiente de la dosis, cuando se administraron 30 minutos antes del entrenamiento. Cuando se administraron en diferentes momentos con respecto al entrenamiento y la prueba, el inhibidor de la PDE2 bay 60-7550 mejoró significativamente la memoria cuando se administró 30 minutos antes del entrenamiento, así como inmediatamente después del entrenamiento y 30 minutos antes del recuerdo. Una vez dominada, esta técnica puede completarse en dos o tres días si se realiza adecuadamente.Al intentar este procedimiento, es importante recordar realizar estudios piloto y elegir cuidadosamente el intervalo entre T1 y T2, ya que seleccionar un intervalo incorrecto puede dar lugar a un error de afecto. Tras seguir este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como el laberinto de Barnes para responder preguntas adicionales, como las diferencias en el aprendizaje, que no pueden abordarse completamente mediante las pruebas de reconocimiento de objetos. Tras su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo del aprendizaje y la memoria exploraran los mecanismos biológicos básicos de la memoria, así como posibles mecanismos de diversos déficits cognitivos en roedores.Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo configurar y diseñar un experimento adecuado utilizando la prueba de reconocimiento de objetos, incluyendo la realización de estudios piloto, la selección de objetos y la elección del intervalo apropiado entre T1 y T2. Gracias por verlo y mucha suerte con sus experimentos.

novel-object-recognition-test-for-investigation-learning-memory

Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

En este artículo se presenta el protocolo de pruebas de laberinto en T utilizando un aparato modificado automatizado para la evaluación de las funciones de aprendizaje y memoria en ratones.

T-laberinto alternancia forzada y la izquierda-derecha para la evaluación de las tareas de discriminación y de trabajo de la memoria de referencia en ratones

Los comportamientos restringidos y repetitivos de orden superior (RRB) perturban la vida de las personas afectadas.  Estos comportamientos son difíciles de modelar en roedores, lo que dificulta la investigación biomédica básica sobre posibles tratamientos o intervenciones para los RRB.  Aquí describimos la exploración de nuevos objetos como un ensayo potencial para RRB de orden superior en ratones.

Exploración de objetos novela como un ensayo de potencial de mayor orden repetitivo Comportamientos en ratones

Se describe aquí un enfoque de detección de comportamiento escalonado que puede usarse para detectar compuestos que exhiben eficacia in vivo en comportamientos motores cognitivos y funcionales en modelos de ratón transgénicos de  beta - amiloidosis y tauopatía. Estos métodos se optimizan para examinar los compuestos para la actividad en tareas de memoria de trabajo y de corto plazo.

Evaluación de la Alternancia Espontánea, el Reconocimiento de Objetos Novelos y la Clasificación de Miembros en Modelos de Ratón Transgénico de la Neuropatología Amiloide-β y Tau

Aquí capacitamos a ratones en una tarea de aprendizaje asociativo para probar la discriminación de olor. Este protocolo permite también estudios sobre cambios estructurales inducidos por el aprendizaje en el cerebro.

Una prueba objetiva y Reproducible de aprendizaje olfativo y discriminación en ratones

Aquí proporcionamos un protocolo que incluye instrucciones completa para el establecimiento económico de murino objeto ubicación y objeto novedoso reconocimiento pruebas de comportamiento, incluyendo el diseño, costo y construcción de equipo necesario así como ejecución de pruebas de comportamiento, recolección de datos y análisis.

Reconocimiento de objetos nuevos y ubicación del objeto conductual en ratones en un presupuesto

Una batería de pruebas de comportamiento integral de las habilidades motoras, estado de ánimo, incluyendo la interacción social, depresión y ansiedad — y cognición está diseñada para la evaluación repetida de cambios de comportamiento relacionados con la neurodegeneración en ratones.

Una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones

Este artículo presenta procedimientos experimentales para evaluar las deficiencias de memoria en ratones epilépticos inducidos por pilocarpina. Este protocolo se puede utilizar para estudiar los mecanismos fisiofitosiológicos del deterioro cognitivo asociado a la epilepsia, que es una de las comorbilidades más comunes en la epilepsia.

Evaluación de la función de la memoria en ratones epilépticos inducidos por pilocarpina

El protocolo presentado aquí proporciona información sobre la electroencefalografía simultánea (EEG) y la evaluación del comportamiento en tiempo real. Hemos discutido todos los pasos involucrados en este protocolo como una solución atractiva para los investigadores en muchos campos de la neurociencia, particularmente en las áreas de aprendizaje y memoria.

Monitoreo simultáneo de electrofisiología inalámbrica y prueba de comportamiento de memoria como herramienta para estudiar la neurogénesis del hipocampo

Este protocolo proporciona pasos detallados para una tarea de ubicación de objetos con cuatro repeticiones utilizando la misma cohorte de ratas. La codificación débil y fuerte puede producir recuerdos a corto y largo plazo. La flexibilidad del protocolo con repetición puede ser beneficiosa para los estudios que involucran operaciones quirúrgicas al ahorrar tiempo y trabajo de parto.

Un diseño experimental dentro del sujeto utilizando una tarea de ubicación de objetos en ratas

Este protocolo proporciona una descripción completa de un método para el registro simultáneo de señales de calcio de neuronas y astrocitos en múltiples regiones cerebrales relacionadas con la memoria y demuestra su aplicación en un paradigma de aprendizaje y comportamiento de la memoria.

Un método de fotometría de fibra bicolor para registrar la actividad de las neuronas astrocitos en múltiples regiones cerebrales durante comportamientos de aprendizaje y memoria

Aprende la prueba de reconocimiento de objetos novedosos para evaluar aprendizaje y memoria en ratones. Este protocolo eficiente permite estudiar cognición y probar intervenciones farmacológicas en neurociencia.

Prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones

Explorar más videos