Un enfoque estandarizado para la purificación multiespecífica de células germinales masculinas de mamíferos por disociación mecánica de tejidos y citometría de flujo

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12 de julio de 2017

10.3791/55913-v

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Ana C. Lima^*¹^,²^,³^,⁴ , Min Jung^*¹ , Jannette Rusch¹ , Abul Usmani¹ , Alexandra M. Lopes³^,⁴ , Donald F. Conrad¹

¹Department of Genetics, Washington University School of Medicine, ²Graduate Program in Areas of Basic and Applied Biology (GABBA), Abel Salazar Institute of Biomedical Sciences, University of Porto, ³Instituto de Investigação e Inovação em Saúde, University of Porto, ⁴IPATIMUP - Instituto de Patologia e Imunologia Molecular da Universidade do Porto, ⁵Department of Pathology & Immunology, Washington University School of Medicine

^* These authors contributed equally

Este trabajo describe la estandarización de un método para obtener poblaciones de células germinales purificadas de tejido testicular de diferentes especies de mamíferos. Es un protocolo directo que combina la disociación mecánica de los testículos, la tinción con Hoechst-33342 y el yoduro de propidio, y la clasificación FACS, con amplias aplicaciones en estudios comparativos de la biología reproductiva masculina.