27 de septiembre de 2017
Describimos aquí métodos para el tratamiento de neonatal de capsaicina inducir dermatitis atópica en las ratas y la exposición de formaldehído vaporizado para investigar los efectos de la inhalación de formaldehído en dermatitis atópica.
El objetivo general de este procedimiento es inducir síntomas similares a los de la dermatitis atópica mediante el tratamiento neonatal con capsaicina. Y para medir el efecto del formaldehído en los síntomas similares a los de la dermatis atópica. Este método puede ayudar a responder una pregunta clave relacionada con la fisiopatología de la dermatitis atópica en el ámbito dermatológico.
La principal ventaja de esta técnica es la inducción de síntomas similares a los de la dermatitis atópica y el establecimiento de un importante sistema de exposición con los incrementos. Para preparar una solución de capsaicina de cinco miligramos por mililitro, agregue un mililitro de Tween 80, un mililitro de etanol al 100% y 50 miligramos de capsaicina a un tubo cónico de 15 mililitros. A continuación, añada ocho mililitros de solución salina normal al tubo cónico.
Tape y agite el tubo vigorosamente hasta que no se vean capas separadas. Es fundamental administrar la capsaicina entre 12 y 48 horas después del nacimiento. Inyecte la solución de capsaicina en el tejido subcutáneo en la línea media y la parte posterior del cuello de una rata Sprague Dawley neonatal.
Para prevenir el paro respiratorio debido a la inyección de capsaicina, coloque a los neonatos en una cámara de oxígeno hasta que la respiración se normalice. Si es necesario, empuje el pecho de los recién nacidos para estimular la respiración. Comience preparando cámaras de plástico equipadas con un espejo para permitir una cobertura total para la visualización y agujeros para permitir que las ratas respiren.
Coloque las ratas en la cámara de plástico y cubra el techo de la cámara con un objeto pesado para evitar que la tapa se abra. A continuación, configura una cámara de vídeo digital para grabar simultáneamente las vistas del espejo y de frente de las ratas. A continuación, registra los comportamientos espontáneos de las ratas durante una hora.
Reproduzca los clips de vídeo y cuente el número de comportamientos de rascado, como los que muestra la rata de la derecha. Y la rata en el centro. Para puntuar las lesiones, identifique la extensión y la gravedad de la dermatitis en los oídos y otras partes de una rata anestesiada.
Defina el tamaño de la unidad para la extensión de las lesiones cutáneas como 0,25 centímetros cuadrados. Y la gravedad de las lesiones cutáneas utilizando esta tabla. Prepara una caja de vidrio acrílico que tenga dos conectores en lados opuestos.
Para la circulación de gas formaldehído, la salida de ventilación debe colocarse más alta que la salida de entrada de gas. Conecte los tubos a ambos conectores. Pase el tubo de salida de ventilación a la campana de circulación o al exterior del edificio para la emisión del gas.
Y conecte el otro tubo de entrada a un regulador de oxígeno médico. Coloca una jaula de ratas convencional dentro de la caja de vidrio acrílico. Coloque ratas de una semana en la jaula y luego selle la caja de vidrio acrílico lo más herméticamente posible para evitar fugas de gas.
Aplique una película adhesiva para envolver la cámara y cierre la cámara con una tapa de goma para un sellado hermético. Agregue una solución de formaldehído al 0,5% a la botella del humidificador conectada al regulador de oxígeno médico. No olvide que trabajar con formaldehído puede ser extremadamente peligroso.
Y siempre se deben tomar precauciones como mascarillas y guantes al realizar este procedimiento. A continuación, encienda el regulador y ajuste el caudal a cinco litros por minuto. Exponga a las ratas al gas formaldehído durante un período de dos horas.
Aquí se muestran fotografías representativas de la inflamación de la piel en la rata tratada con capsaicina. Aquí se muestra el desarrollo cronológico de la dermatitis de las ratas tratadas con capsaicina. Esta imagen muestra el desarrollo cronológico de los comportamientos de rascado en las ratas tratadas con capsaicina.
Esta es una imagen representativa de las lesiones cutáneas recurrentes de ratas tratadas con capsaicina de 16 semanas de edad. Los niveles séricos de IgE están significativamente elevados en los animales tratados con capsaicina. También se observa una elevación significativa de la expresión de ARNm de IL-4 en animales tratados con capsaicina.
Aquí se muestra una elevación significativa de la expresión de ARNm de IL-13 en animales tratados con capsaicina. Estas fotografías representativas muestran dermatitis atópica después de la quinta semana de tratamiento con 1,2 partes por millón. Y 0,8 partes por millón de formaldehído en comparación con el tratamiento controlado con aire.
La exposición a 1,2 partes por millón de formaldehído, pero no a 0,8 partes por millón de formaldehído, exacerbó significativamente el prurito en el modelo de dermatitis atópica tratada con capsaicina. Se observaron resultados similares cuando se midió la dermatitis. Se observó un aumento de los niveles séricos de IgE en el modelo de rata AD tratada con capsaicina tratada con 1,2 partes por millón de exposición al formaldehído.
Siguiendo este procedimiento, se pueden utilizar otros materiales como la solución de gylcol para responder preguntas adicionales relacionadas con los efectos de una materia particular en la dermatitis atópica. Después de estos desarrollos, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la dermatología exploraran el papel de los factores ambientales en la patogénesis de la dermatitis atópica.
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Este artículo describe métodos para inducir síntomas similares a la dermatitis atópica en ratas mediante el tratamiento neonatal con capsaicina e investigar los efectos de la inhalación de formaldehído. El estudio tiene como objetivo mejorar la comprensión de la fisiopatología de la dermatitis atópica.
Los factores desencadenantes ambientales en la dermatitis atópica siguen siendo un aspecto crítico desconocido en la dermatología traslacional, lo que afecta la confianza predictiva en el desarrollo de terapias. Este modelo en ratas permite la evaluación sistemática de la exposición a factores ambientales, como el formaldehído, sobre la progresión de la enfermedad y la respuesta de los biomarcadores. El enfoque facilita la reducción de riesgos mecanicistas e informa las decisiones en fases iniciales sobre carteras de desarrollo en líneas de dermatología.
Este modelo conecta el descubrimiento inicial y la validación preclínica al permitir la comprobación controlada de hipótesis sobre factores ambientales en la progresión de la dermatitis atópica.