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Proyección de alto rendimiento para la herencia basados en proteína en S. cerevisiae
Proyección de alto rendimiento para la herencia basados en proteína en S. cerevisiae
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JoVE Journal Biology
High-throughput Screening for Protein-based Inheritance in S. cerevisiae

Proyección de alto rendimiento para la herencia basados en proteína en S. cerevisiae

Full Text
6,746 Views
08:12 min
August 8, 2017

DOI: 10.3791/56069-v

James S. Byers1, Daniel F. Jarosz1,2

1Department of Developmental Biology,Stanford University School of Medicine, 2Department of Chemical and Systems Biology,Stanford University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo describe una metodología de alto rendimiento para funcionalmente basados en proteína herencia en S. cerevisiae.

El objetivo general de este fenotipado de levaduras de alto rendimiento es detectar proteínas que provoquen una memoria fenotípica duradera de la expresión transmitida, como un indicador de la herencia basada en proteínas. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de los priones de levadura, como por ejemplo, cuántas proteínas puede heredar de este tipo. La principal ventaja de esta técnica es que se pueden cribar muchas proteínas y vías de forma imparcial.

Comience este procedimiento cultivando las células de levadura apropiadas en una placa de 96 pocillos a 30 grados centígrados, como se describe en el protocolo de texto. Inspeccione visualmente los cultivos para confirmar que los cultivos están saturados, las células deben ser visibles a simple vista, en el fondo de cada pocillo. Utilice un robot de manejo de líquidos para preparar placas de 384 pocillos, que contienen 45 microlitros del medio apropiado por pocillo.

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