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DOI: 10.3791/56169-v
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Se presenta un protocolo detallado de un modelo de ratón para enterohemorrágica e. coli (EHEC) colonización utilizando bacterias etiquetado bioluminiscencia. La detección de estas bacterias bioluminiscentes por un no-invasivo en vivo sistema de animales vivos de imagen puede avanzar nuestra comprensión actual de la colonización de EHEC.
El objetivo general de este experimento es detectar la colonización enterohemorrágica de E. coli en ratones utilizando un sistema de imagen in vivo no invasivo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la patogenicidad de E. coli enterohemorrágica, como la colonización. La principal ventaja de esta técnica es que la colonización por EHEC se puede detectar en animales vivos sin sacrificar animales.
Para comenzar, raye un stock negativo de 80 grados Celsius de la bacteria E. coli O157:H7 EDL933 que alberga un plásmido luciferasa en una placa de agar LB con 50 microgramos por mililitro de kanamicina. Cultive las bacterias durante 16 a 18 horas a 37 grados centígrados. Elija una sola colonia de la placa nocturna e inocule tres mililitros de medio LB con 50 microgramos por mililitro de kanamicina.
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