Name: Prueba de ansiedad Animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas Test de laberinto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: Aprende a medir la ansiedad en ratas utilizando el laberinto en cruz elevado con diferentes configuraciones de brazos abiertos y cerrados. Este método mejora la detección de efectos ansiolíticos en estudios de neurociencia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Los autores desean agradecer al Sr. Akihiro Hirano por su ayuda en la producción de aparatos modificados para requisitos particulares. Los autores desean agradecer al Sr. Kosuke Takahashi y Sr. Shingo Nakajima su asistencia técnica. Este trabajo fue apoyado por investigación de riesgo de sustancias químicas, salud y becas de investigación de Ciencias de laboratorio, Ministerio de salud, trabajo y bienestar, Japón (H25-KAGAKU-IPPANN-003) y beca de proyecto de investigación A cargo de Instituto de ciencia y tecnología de Meiji Universidad de Japón.

Todos los procedimientos experimentales descritos aquí han sido aprobados por el cuidado de Animal institucional y Comité de uso de la Universidad de Meiji (IACUC 14-0002(1)). Animales utilizados en los resultados representativos se prepararon como sigue: ratas macho Sprague-Dawley fueron compradas a una empresa de animales de laboratorio y alojadas en grupos de 4 animales por jaula de la rata estándar (W200 × D410 × H250 mm) para al menos una semana antes del inicio de la experimento conductual. La sala de alojamiento de los animales se mantuvo en condiciones ambientales estándar para la luz (12:12 horario de luz/oscuridad con luces en 10:00 h), temperatura (25.0 ± 0.5 º C), humedad (55 ± 10%) y ventilación (10 veces por hora), y los animales tuvieron acceso ad libitum al alimento ( Oriental la levadura Co. Ltd., Tokio, Japón) y agua. Los animales se mantuvieron en una jaula de la rata estándar (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko Co., Ltd., Aichi, Japón) con el papel de ropa de cama (alfa-dri, LSG Corporatin, Tokio, Japón).
1. elevado más la prueba del laberinto
<ol><li>Configurar el plus elevado laberinto aparato en un envase personalizado (W1, 500 × D1, 500 × H2, 000 mm) (figura 1A) con un marco de metal en forma de plus 500 mm sobre el piso para apoyar el funcionamiento armas de forma (figura 1B), iluminación en el techo del contenedor para iluminar la superficie del laberinto a la intensidad de luz requerida (figura 1) y una cámara de vídeo digital en el techo de centro para monitorado de vídeo en vivo de las pruebas conductuales (figura 1).</li>
	<li>Fijar los brazos (L500 x W100 mm) sobre el marco en forma de plus y luego fijar la plataforma cuadrada central (W100 x D100 mm) en el centro de los cuatro brazos (figura 1 -F). Nota: En nuestro laboratorio, contamos con dos tipos de brazos abiertos (L500 x W100 mm) y dos tipos de brazos cerrados (L500 x W100 x H450 mm) (figura 1). Los brazos cerrados tienen paredes ya sea transparentes u opacas (figura 1), y los brazos abiertos están diseñados con o sin un borde corto (H5 mm, Figura 1E). La plataforma cuadrada central (W100 × D100 mm) se coloca en el centro de los cuatro brazos (figura 1 -F). Así, se pueden preparar las siguientes cuatro combinaciones de brazos según propósito experimental: abrir los brazos con repisas + brazos cerrados con paredes transparentes (repisas/transparente), brazos abiertos con repisas + brazos cerrados con paredes opacas (bordes/opaco), los brazos abiertos sin salientes + brazos cerrados con paredes transparentes (No-repisas/transparente) y brazos abiertos sin repisas + brazos cerrados con opaco paredes (No-bordes/opaco). La superficie de la pista de brazo es de color negra, para permitir mejor animal trazado por el software de análisis de comportamiento automatizado, tal como se describe en la sección 2, análisis de comportamiento.</li>
	<li>Ajustar la intensidad de la iluminación en la superficie de la pieza de extremo distal de cada brazo y plataforma central a aproximadamente 100 Lux.</li>
	<li>Antes de cada prueba, limpiar todo el aparato con solución de etanol 70% y limpiar con agua destilada.</li>
	<li>Haga clic en el botón"registro" en la grabadora de disco duro para iniciar la cámara de vídeo digital que graba el comportamiento de la rata para el vídeo análisis descrito en la sección 2, análisis del comportamiento de la proyección de imagen.</li>
	<li>Poner un animal en la plataforma central frente a un brazo abierto y permite la exploración libre en el aparato durante 5 minutos.</li>
	<li>Haga clic en el botón"stop" en la grabadora de disco duro para terminar la grabación.</li>
	<li>Contar el número de heces y micciones después de regresar el animal probado a la sala de alojamiento de los animales.</li>
	<li>Repita desde el paso 1.4 hasta el final del experimento. Nota: Un funcionamiento de prueba seco siempre se realiza antes de iniciar cada experimento para comprobar que todos los ajustes experimentales correctamente configurados antes de los animales experimentales se exponen a las condiciones experimentales. De lo contrario, algunos animales, especialmente el primer animal puede experimentar diferentes condiciones ambientales (por ejemplo, ruidos, inducidos posiblemente por el experimentador en señales de manipulación o animal posiblemente dejados por el animal previamente probado). Nota: Los experimentadores son cerca del contenedor cuando un animal está siendo probado. Así, a pesar de que los experimentadores no son visibles la rata todavía puede ser capaz de sentir a través de olor y sonido.</li>
</ol>2. comportamiento análisis
Nota: Análisis del comportamiento se realizan por la observación manual y automatizado de software de análisis.
<ol><li>
Observación manual
	<ol>
<li>Después de que el animal se coloca en el borde, observe lo siguiente: número de entradas (una entrada en un brazo se define como cualquier instancia cuando todos 4 patas son en el brazo), tiempo invertido en cada brazo, y número de asistentes se extendía las posturas frente a un brazo abierto , mientras que la copia de seguridad de la plataforma central hacia un brazo cerrado.</li>
		<li>Medir la duración y la frecuencia de los comportamientos definidos anteriormente por cronómetro y cuenta 5 minutos, a partir de Cuándo están cerradas las puertas del contenedor.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análisis automatizado de
	<ol>
<li>Mediante el programa de software disponibles, anote lo siguiente: distancia recorridas, tiempo gastado en diferentes posiciones de brazos abiertos (segmentos proximal, medios y distales de la plataforma central), y un análisis minuto a minuto del tiempo gastado en abierto y cerrado brazos.</li>
		<li>Haga clic en el botón"Inicio" del software automatizado de análisis al mismo tiempo comienza la observación manual (la grabación se detendrá automáticamente si se establece la duración de la grabación). Nota: El software de análisis de comportamiento utilizado en este estudio rastrea el animal a través de su contraste con el campo de fondo; el animal, que se asigna un tamaño fijo, se identifica como el objeto más brillante y la locomoción de su punto central se puede utilizar así para el rastreo de animales.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+Brain%27s+Reward+Circuitry+in+Depression%3A+Transcriptional+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li>
<li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+%27fear%27-motivated+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li>
<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+open%3Aclosed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li>
<li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+illumination%2C+closed+wall+transparency+and%2For+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li>
<li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li>
<li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Med+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li>
<li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li>
<li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li>
<li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li>
<li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li>
<li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li>
<li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li>
<li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li>
<li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li>
<li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31(2015).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Como el número de pacientes que sufren de trastornos psiquiátricos, como trastorno de ansiedad, aumenta, es importante desarrollar estudios de vanguardia para mejorar el entendimiento del mecanismo básico de la ansiedad. Para lograr esto, también es importante optimizar los procedimientos experimentales. Por lo tanto, a mejorar la aplicación de la elevación además de prueba de laberinto, hemos demostrado el efecto del brazo características en los resultados experimentales con ratas.
El elevado...

Está aumentando el número de pacientes que sufren de trastornos del ánimo, incluyendo trastorno de ansiedad y depresión. Aunque el desarrollo de estos trastornos intervienen factores genéticos y ambientales, los mecanismos patogénicos detallados aún no están completamente comprendidos1. Por lo tanto, la investigación debe centrarse en descubrir los mecanismos subyacentes de los trastornos del estado de ánimo, así como el desarrollo de medicamentos eficaces que tienen menos efectos secundarios.
Comportamiento de animales de laboratorio son útiles para investigar la función superior del cerebro, incluyendo la emoción. Comportamiento de los animales es muy variable, los resultados experimentales a menudo difieren entre laboratorios, aunque una cepa consanguínea idéntica fue utilizado2. Así, los investigadores también deben comprender las características básicas de los dispositivos experimentales que adoptan con el fin de proporcionar resultados fiables y precisos en el laboratorio.
El elevado plus prueba de laberinto fue establecido originalmente para examinar la reactividad emocional en roedores3,4. Todo el aparato es generalmente situado 500 mm sobre el piso y consiste en abrir dos y dos brazos cerrados que hacen de una forma más. Medidas de la exploración de brazo (incluyendo la duración y frecuencia de entradas en cada brazo), distancia comportamientos viajadas y especificados como postura de asistir se extendía de animales sometidos se registran durante los periodos de observación. Estas medidas, ansiedad animal se estima como un resultado experimental.
La elevada prueba de laberinto se utiliza en todo el mundo, pero no todos los laboratorios utilizan el mismo aparato diseño5,6, y estas diferencias pueden afectar los resultados experimentales. Por ejemplo, las diferencias son la presencia o ausencia de salientes a lo largo de los brazos abiertos y el uso de paredes transparentes u opacas para brazos cerrado5,6. Los bordes a lo largo de los brazos abiertos y el uso de paredes transparentes para brazos cerrados fueron desarrolladas para evitar caerse el aparato7animales y para facilitar observaciones conductuales dentro de los brazos cerrados, respectivamente8,9. Aunque ha habido algunos estudios que examinan las diferencias de estructura brazo cómo individuales pueden afectar la capacidad para detectar ansiedad animal1,2,5,10,11 , no se han investigado los efectos combinados de abiertas (con/sin repisa corta) y cerrado (transparente/opaco paredes) del brazo características sobre el comportamiento animal.
En un reciente informe, discutimos el efecto de estas combinaciones de diseños de brazo en ansiedad-como comportamiento en ratas12. En breve, abra brazo bordes perceptiblemente creciente ansiedad-como comportamiento en ratas, mientras brazos transparentes también han disminuido este comportamiento. Además, verificamos una mayor sensibilidad de detección del efecto de un fármaco ansiolítico en una combinación de brazo abierto no renegociados + brazo cerrada amurallada opaco en comparación con una combinación de brazo abierto renegociado + brazo cerrado pared transparente. En este informe, será introducir nuestro protocolo para el elevado más laberinto de prueba, junto con la discusión de los resultados claves del informe anterior. Creemos que este informe proporcionará información útil para aquellos que han empleado o que planean usar el elevado además de laberinto en sus estudios.

<table><tbody><tr><td>Contenedor personalizado (W1500 y times; D1500 y tiempos; H2000 mm)</td><td>NA</td><td>NA Hecho</td><td>a mano por el Sr. Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Iluminación</td><td>NA</td><td>NA Hecho</td><td>a mano por el Sr. Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Aparato de laberinto elevado plus</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Hecho a mano por el Sr. Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Cámara de vídeo digital</td><td>Watec</td><td>WAT-250D2</td><td>Cualquier cámara de vídeo adecuada se puede conectar a una grabadora de disco duro para grabar perfiles de seguimiento.</td></tr><tr><td>Grabador de disco duro</td><td>TOSHIBA</td><td>RD-R200</td><td>Se puede conectar a la cámara de vídeo digital cualquier grabador de disco duro adecuado.</td></tr><tr><td>Ratas Sprague-Dawley</td><td>Charles River Laboratories Japón, Inc.</td><td>NA</td><td>Se pueden utilizar ratas adecuadas para su estudio Jaula de</td></tr><tr><td>ratas estándar</td><td>Toyoriko</td><td>TP-105</td><td>Cualquier jaula de ratas adecuada para su estudio</td></tr><tr><td>Instrumento para medir la intensidad de la luz</td><td>AS ONE</td><td>1-5818-02</td><td>Cualquier instrumento adecuado para medir la intensidad de la luz</td></tr><tr><td>EthoVision XT versión 8.0</td><td>Noldus</td><td>NA</td><td>Cualquier software adecuado para medir el comportamiento de los animales</td></tr><tr><td>Diazepam</td><td>Industria farmacéutica de Taiyo</td><td>1124402A2061</td><td>Cualquier medicamento adecuado se puede usar para su estudio</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Wako Pure Chemical Industries</td><td>9005-65-6</td><td>Cualquier medicamento adecuado se puede usar para su estudio</td></tr></tbody></table>

prueba de ansiedad animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas test de laberinto

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

El elevado además de laberinto es un examen de comportamiento para evaluar ansiedad animal en roedores. Aunque esta prueba se aplica extensamente en el campo de la Ciencias del comportamiento, los resultados contradictorios se proporcionan a menudo de diferentes laboratorios. Para identificar las razones de los diferentes resultados, anteriormente nos centramos en brazo características, que diferencian entre los laboratorios, más en particular la presencia/ausencia de repisas a los lados de los brazos abiertos y la transparencia/opacidad de las paredes del brazo cerrado. En un informe anterior, utiliza un contenedor personalizado diseñado para comparar el comportamiento de ratas en diferentes combinaciones de diseños de brazo abierto y cerrado bajo condiciones experimentales idénticos y demostró que las diferencias en características de brazo interfieran en experimental resultados. En breve, abra brazo bordes perceptiblemente creciente ansiedad-como comportamiento en ratas, mientras brazos transparentes también han disminuido este comportamiento. Además, verificó una mayor sensibilidad de detección del efecto de un fármaco ansiolítico en una combinación de brazo abierto no renegociados + brazo cerrada amurallada opaco en comparación con una combinación de brazo abierto renegociado + brazo cerrado pared transparente. En este informe, presentamos nuestro protocolo para el elevado más prueba del laberinto, junto con discusión de los resultados claves del informe anterior y nuestra experiencia experimental. Creemos que este informe proporcionará información útil para los investigadores que han utilizado o que planean usar el elevado además de laberinto en sus estudios.

En el estudio anterior, se compararon los efectos combinados de salientes de brazo abierto y la transparencia de las paredes brazo cerrado en los comportamientos exploratorios en el laberinto12. Las ratas significativamente pasaron menos tiempo en brazos abiertos sin salientes que a brazos abiertos con repisas (F [1, 60] = 13.49, P = 0.0005) (figura 2A). Resultados similares fueron también encontrados por el número de entradas...

Ansiedad-como comportamiento de ratas probadas por el elevado además de laberinto muy varía según el entorno de prueba. Aquí mostramos cómo ajustes del aparato, especialmente estructura del brazo, afectan el comportamiento en el laberinto, y explicamos un protocolo confiable para detectar efectos de las drogas ansiolíticas. Este informe contribuirá a la investigación de la ansiedad.

Prueba de ansiedad Animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas Test de laberinto

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

El objetivo general de este experimento es medir la ansiedad en ratas, utilizando el laberinto elevado plus apropiado. El principal hallazgo de este estudio es que la sensibilidad de detección del efecto del fármaco ansiolítico puede cambiar dependiendo de las características del aparato de laberinto cruzado elevado. Este estudio puede ayudar a los investigadores a configurar el aparato de laberinto en el laboratorio, apropiado para su objetivo experimental, y garantizar un excelente registro de datos.La demostración del procedimiento estará a cargo de un investigador invitado de mi laboratorio. Para comenzar, coloque el aparato de laberinto elevado más en un contenedor de armario personalizado. La estructura metálica del laberinto debe elevarse aproximadamente medio metro del suelo.Mantenga un brillo constante en todo el laberinto a la intensidad requerida. En el punto central superior, monte una cámara de video digital para grabar y monitorear las pruebas. Ahora fije los brazos del laberinto en el marco.Hay dos tipos de brazos abiertos, con o sin repisas de 5 mm a lo largo de los lados. También hay dos tipos de brazos cerrados. Las paredes pueden ser translúcidas u opacas.Fije la plataforma central cuadrada entre los brazos. La plataforma central y las superficies de la pista del brazo del laberinto son de color negro para un mejor seguimiento de los animales mediante el análisis de comportamiento automatizado. Ahora, con los brazos en su lugar, ajuste la intensidad de la iluminación, de modo que haya aproximadamente 100 lux en la superficie de la parte final distal de cada brazo y en la plataforma central.Antes de cada prueba, limpie todo el aparato con una solución de etanol al 70%, seguido de un límplice con agua destilada. Haga clic en el botón de grabación en la grabadora de disco duro para comenzar a recopilar imágenes de la cámara de video digital. Si el equipo está funcionando, realice la prueba.Comience la prueba colocando a la rata en la plataforma central, de modo que quede frente a un brazo abierto, y cierre las puertas del armario. A continuación, permita la exploración libre en el aparato durante cinco minutos. El resultado experimental puede variar, dependiendo de si la rata se evalúa de cara a un brazo abierto o cruzado.Es mejor colocar siempre a las ratas, descansando sobre el brazo abierto para evitar que se congelen, en la primera entrada al brazo cerrado. Después de cinco minutos, detenga la grabación para finalizar la prueba. Luego regresa la rata a su jaula y cuenta el número de heces y micciones en el laberinto antes de limpiarlo.Realice siempre el análisis del comportamiento utilizando tanto la observación manual como el software de análisis automatizado. A partir del video, registre manualmente el número de entradas que la rata hace en los brazos del laberinto. Una entrada se define como cualquier instancia en la que las cuatro patas están en el brazo.También registre el tiempo que pasa en cada brazo y el número de posturas de asistencia estiradas realizadas mientras la rata está en la plataforma central mirando hacia un brazo abierto y retrocediendo hacia un brazo cerrado. Realice estas mediciones con un cronómetro y un contador durante la prueba de cinco minutos. Para realizar un análisis automatizado, abra la grabación de video en un programa de software comercial.El software rastrea al animal en el laberinto, utilizando el contraste entre el animal y el suelo oscuro. En primer lugar, asigne el animal a una mancha de contraste de un tamaño específico y, a continuación, asigne el centro de la mancha como punto de seguimiento. A continuación, para la prueba completa de cinco minutos, haga que el software registre la distancia recorrida, el tiempo pasado en diferentes posiciones con los brazos abiertos y el tiempo total dedicado a los brazos abiertos y cerrados.A veces, el análisis automatizado no puede distinguir entre entradas y no entradas en armas. Por lo tanto, recomendamos que siempre se lleve a cabo la observación manual además del análisis automatizado. Los resultados del comportamiento exploratorio de las ratas en el laberinto elevado plus con diferentes diseños de brazos abiertos y cerrados, muestran que las ratas pasan más tiempo con los brazos abiertos con repisas, que con los brazos abiertos sin repisas.También hicieron más entradas en esos brazos, por lo que es probable que las repisas aumenten el comportamiento exploratorio con los brazos abiertos. Las ratas mostraron una postura significativamente menos estirada con brazos cerrados con paredes transparentes, que con brazos cerrados con paredes opacas. Lo que sugiere que las paredes transparentes cerradas de los brazos disminuyeron el comportamiento similar a la ansiedad.Las ratas también pasaron más tiempo en los segmentos distales de los brazos abiertos cuando los brazos cerrados tenían paredes transparentes, que cuando los brazos cerrados tenían paredes opacas. Además, la exploración distal de brazo abierto fue significativamente menor en laberintos sin repisas y combinaciones de brazos opacos, que en repisas y combinaciones de brazos transparentes. Por lo tanto, la sensibilidad de detección puede verse alterada, dependiendo de la combinación de diseños de brazo utilizados.Para verificar las diferencias en la sensibilidad de detección entre los diferentes tipos de diseño de brazo, se realizó un experimento adicional utilizando el fármaco ansiolítico Diazepam. En resumen, el efecto del tratamiento con diazepam en dosis altas se detectó en el aparato de pared opaco sin repisas, pero no en el aparato de pared transparente con repisas. Al intentar este procedimiento, es importante recordar tratar a todos los animales en las mismas condiciones experimentales y asegurarse de que todos los animales se coloquen frente al mismo brazo abierto o cerrado al comienzo de cada prueba.Después de ver este video, debería comprender cómo configurar el aparato de laberinto cruzado elevado. Es importante recordar que los resultados experimentales pueden variar según el diseño del brazo. Por lo tanto, recomendamos utilizar armas adecuadas para sus objetivos experimentales.

testing-animal-anxiety-rats-effects-open-arm-ledges-closed-arm-wall

Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

La prueba de elevación de laberinto es una de las pruebas más utilizadas para medir la ansiedad-como el comportamiento de los ratones. A continuación, presentamos una película que muestra los procedimientos detallados para la realización de la prueba.

Laberinto elevado Plus para ratones

Las medidas más-laberinto ansiedad-como el comportamiento de los roedores. Hay dos opuesto cerrado y dos brazos abiertos opuestos; roedores ansiosos evitar los brazos abiertos. La zona central no es ni completamente abierta ni cerrada, así que el tiempo pasado aquí es ambigua y difícil de interpretar. Aquí se describe una modificación del protocolo de laberinto en cruz la eliminación de esta área.

Los callejones de prueba sucesiva de ansiedad en ratones y ratas

Deterioro cognitivo como resultado de la gestión de radioterapia de los tumores cerebrales representa una condición clínicamente intratable que afecta negativamente a la calidad de vida. La capacidad de evaluar críticamente las posibles intervenciones para aminorar inducidos por la radiación disminuye cognitivo depende en última instancia la capacidad para llevar a cabo rigurosas evaluaciones cuantitativas de la cognición.

Disminuye la cuantificación cognitivos causados ​​por la radioterapia craneal

El secano Barnes laberinto es ampliamente utilizado para medir la capacidad de navegación espacial en respuesta a estímulos aversivos ligeramente. Durante días consecutivos, el rendimiento (por ejemplo, la latencia para localizar huida jaula) de los sujetos de control mejora, indicativo de aprendizaje normal y la memoria. Las diferencias entre las ratas y ratones necesitan aparatos y la metodología de los cambios que se detallan aquí.

Barnes Maze estrategias de ensayo con pequeñas y grandes modelos de roedores

Se proporciona un protocolo para utilizar un Laberinto de Campo Abierto para acceder a la actividad locomotora general, la ansiedad y la emocionalidad en un modelo de ratón de laboratorio.

El uso del campo Maze abierto para medir el comportamiento locomotor y la ansiedad-como en ratones

Aquí, presentamos un protocolo para investigar cambios en el nivel de ansiedad de modelos de animales roedores. La elevada más laberinto prueba (EPM), utilizado junto con un vídeo de seguimiento de software, proporciona un método fiable para documentar el efecto de distintos potenciales tratamientos de ansiolíticos en escenarios de laboratorio preclínicos.

Elevado más laberinto prueba combinada con Video Tracking Software para investigar el efecto ansiolítico de suplementos exógenos de cetogénicas

Con la manipulación optogenética de poblaciones neuronales específicas o regiones cerebrales, el comportamiento se puede modificar con alta resolución temporal y espacial en animales en movimiento libre. Mediante el uso de diferentes herramientas optogenéticas en combinación con fibras ópticas implantadas crónicamente, se puede realizar una variedad de modulaciones neuronales y pruebas de comportamiento.

Manipulación optogenética de la actividad neuronal para modular el comportamiento en ratones que se mueven libremente

Aquí se presenta un modelo de ratón de ansiedad inducida por aislamiento social (SI) que utiliza ratones salvajes tipo C56BL / 6J para inducir estrés y comportamiento similar a la ansiedad con un manejo mínimo y sin procedimientos invasivos. Este modelo refleja los patrones de vida modernos de aislamiento social y es ideal para estudiar la ansiedad y los trastornos relacionados.

Modelo de aislamiento social: un modelo no invasivo de estrés y ansiedad para roedores

Este manuscrito presenta un conjunto de pruebas conductuales altamente reproducibles para validar un modelo de ratón con síndrome de Angelman.

Caracterización conductual de un modelo de ratón con síndrome de Angelman

Este protocolo describe un modelo de estrés leve crónico impredecible (CUMS) para la depresión basado en la teoría médica mongola, junto con métodos para validar las pruebas de comportamiento.

Estrés crónico impredecible leve en ratas basado en la medicina mongola

Aprende a medir la ansiedad en ratas utilizando el laberinto en cruz elevado con diferentes configuraciones de brazos abiertos y cerrados. Este método mejora la detección de efectos ansiolíticos en estudios de neurociencia.

Prueba de ansiedad Animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas Test de laberinto (Video) | JoVE Journal

Prueba de ansiedad Animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas Test de laberinto

Explorar más videos