Name: Métodos para analizar los efectos del uranio Natural en In Vitro la osteoclastogénesis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 51 s
Description: Aprende a analizar los efectos del uranio natural en la osteoclastogénesis in vitro usando cultivos de células RAW 264.7. Este método permite evaluar la viabilidad, diferenciación y función de los osteoclastos expuestos.

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Los autores desean agradecer a Chantal Cros por asistencia técnica útil. Esta investigación fue financiada por donaciones de la "Commissariat à l ' Energie Atomique et aux energías alternativas" (URANOs - programa Transversal de Toxicologie du CEA y CEA CPRR-AREVA) y de la ANR (toxicidad de uranio: enfoque multinivel de biomineralización proceso en el hueso, ANR-16-CE34-0003). Este trabajo fue apoyado también por la Universidad de Niza Sophia-Antipolis y el CNRS.

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<li>Ballou, J. E., Gies, R. A., Case, A. C., Haggard, D. L., Buschbom, R. L., Ryan, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deposition+and+early+disposition+of+inhaled+233UO2%28NO3%292+and+232UO2%28NO3%292+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Health+Phys%22%5BJournal%5D)">Deposition and early disposition of inhaled 233UO2(NO3)2 and 232UO2(NO3)2 in the rat.</a> Health Phys. 51 (6), 755-771 (1986).</li>
<li>Kathren, R. L., McInroy, J. F., Moore, R. H., Dietert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uranium+in+the+tissues+of+an+occupationally+exposed+individual%5BTitle%5D)+AND+%22Health+Phys%22%5BJournal%5D)">Uranium in the tissues of an occupationally exposed individual.</a> Health Phys. 57 (1), 17-21 (1989).</li>
<li>Kurttio, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+effects+of+uranium+in+drinking+water%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Renal effects of uranium in drinking water.</a> Environ.Health Perspect. 110 (4), 337-342 (2002).</li>
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<li>Arzuaga, X., Gehlhaus, M., Strong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modes+of+action+associated+with+uranium+induced+adverse+effects+in+bone+function+and+development%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Modes of action associated with uranium induced adverse effects in bone function and development.</a> Toxicol. Lett. 236 (2), 123-130 (2015).</li>
<li>Ikeda, K., Takeshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+osteoclast+differentiation+and+function+in+skeletal+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biochem%22%5BJournal%5D)">The role of osteoclast differentiation and function in skeletal homeostasis.</a> J. Biochem. 159 (1), 1-8 (2016).</li>
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<li>Salo, J., Lehenkari, P., Mulari, M., Metsikko, K., Vaananen, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Removal+of+osteoclast+bone+resorption+products+by+transcytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Removal of osteoclast bone resorption products by transcytosis.</a> Science. 276 (5310), 270-273 (1997).</li>
<li>Pierrefite-Carle, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+natural+uranium+on+the+UMR-106+osteoblastic+cell+line%3A+impairment+of+the+autophagic+process+as+an+underlying+mechanism+of+uranium+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effect of natural uranium on the UMR-106 osteoblastic cell line: impairment of the autophagic process as an underlying mechanism of uranium toxicity.</a> Arch. Toxicol. 91 (4), 1903-1914 (2017).</li>
<li>Ubios, A. M., Guglielmotti, M. B., Steimetz, T., Cabrini, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uranium+inhibits+bone+formation+in+physiologic+alveolar+bone+modeling+and+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Res%22%5BJournal%5D)">Uranium inhibits bone formation in physiologic alveolar bone modeling and remodeling.</a> Environ. Res. 54 (1), 17-23 (1991).</li>
<li>Bozal, C. B., Martinez, A. B., Cabrini, R. L., Ubios, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ethane-1-+hydroxy-1%2C1-bisphosphonate+%28EHBP%29+on+endochondral+ossification+lesions+induced+by+a+lethal+oral+dose+of+uranyl+nitrate%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effect of ethane-1- hydroxy-1,1-bisphosphonate (EHBP) on endochondral ossification lesions induced by a lethal oral dose of uranyl nitrate.</a> Arch. Toxicol. 79 (8), 475-481 (2005).</li>
<li>Kurttio, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+as+a+possible+target+of+chemical+toxicity+of+natural+uranium+in+drinking+water%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Bone as a possible target of chemical toxicity of natural uranium in drinking water.</a> Environ. Health Perspect. 113 (1), 68-72 (2005).</li>
<li>Collin-Osdoby, P., Osdoby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RANKL-mediated+osteoclast+formation+from+murine+RAW+264.7+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">RANKL-mediated osteoclast formation from murine RAW 264.7 cells.</a> Methods Mol. Biol. 816, 187-202 (2012).</li>
<li>Beranger, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+binding+of+poly%28ADP-Ribose%29+polymerase-1+and+JunD%2FFra2+accounts+for+RANKL-induced+Tcirg1+gene+expression+during+osteoclastogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bone+Miner.+Res%22%5BJournal%5D)">Differential binding of poly(ADP-Ribose) polymerase-1 and JunD/Fra2 accounts for RANKL-induced Tcirg1 gene expression during osteoclastogenesis.</a> J. Bone Miner. Res. 22 (7), 975-983 (2007).</li>
<li>Mirto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+uranium%28VI%29+speciation+for+the+evaluation+of+in+vitro+uranium+cytotoxicity+on+LLC-PK1+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Exp.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Influence of uranium(VI) speciation for the evaluation of in vitro uranium cytotoxicity on LLC-PK1 cells.</a> Hum. Exp. Toxicol. 18 (3), 180-187 (1999).</li>
<li>Carrière, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+uranium+speciation+on+normal+rat+kidney+%28NRK-52E%29+proximal+cell+cytotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Res.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Influence of uranium speciation on normal rat kidney (NRK-52E) proximal cell cytotoxicity.</a> Chem. Res. Toxicol. 17 (3), 446-452 (2004).</li>
<li>Milgram, S., Carrière, M., Malaval, L., Gouget, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+accumulation+and+distribution+of+uranium+and+lead+in+osteoblastic+cells+as+a+function+of+their+speciation%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Cellular accumulation and distribution of uranium and lead in osteoblastic cells as a function of their speciation.</a> Toxicology. 252 (1-3), 26-32 (2008).</li>
<li>Milgram, S., Carrière, M., Thiebault, C., Malaval, L., Gouget, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxic+and+phenotypic+effects+of+uranium+and+lead+on+osteoblastic+cells+are+highly+dependent+on+metal+speciation%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Cytotoxic and phenotypic effects of uranium and lead on osteoblastic cells are highly dependent on metal speciation.</a> Toxicology. 250 (1), 62-69 (2008).</li>
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<li>Gritsaenko, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+uranium+impairs+the+differentiation+and+the+resorbing+function+of+osteoclasts%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Natural uranium impairs the differentiation and the resorbing function of osteoclasts.</a> Biochim Biophys Acta. 1861 (4), 715-726 (2017).</li>
<li>Motiur Rahman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proliferation-coupled+osteoclast+differentiation+by+RANKL%3A+Cell+density+as+a+determinant+of+osteoclast+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Proliferation-coupled osteoclast differentiation by RANKL: Cell density as a determinant of osteoclast formation.</a> Bone. 81, 392-399 (2015).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar

Lo que sabemos, esta es la primera vez que se describe un procedimiento detallado con el objetivo de estudiar el efecto del uranio natural en resorbing células del hueso. Este enfoque será útil para lograr una mejor comprensión del impacto de uranio en la fisiología del hueso y puede proporcionar una nueva herramienta para la proyección de quelantes del uranio. Además, creemos que el protocolo descrito aquí podría aplicarse para estudiar el impacto de metales pesados en osteoclatogenesis.
Se s...

El uranio es un elemento radioactivo que ocurre naturalmente en suelos, aire y agua; así, los animales y los seres humanos están expuestos a uranio natural en su dieta. Además de fuentes naturales, uranio origina de actividades antropogénicas, que aumenta su abundancia en el medio ambiente. Uranio plantea riesgos químicos y radiológicos. Sin embargo, debido a que el uranio natural (que es una mezcla de isótopos que contiene 99.27% 238U, 0.72% 235U y 0.006% 234U) tiene una baja actividad específica (25.103 Bq.g-1), su impacto en la salud se atribuye a su toxicidad química.
Sea cual sea su vía de entrada (inhalación, ingestión o exposición dérmica), la mayor parte del uranio de entrar en el cuerpo se elimina con las heces y solo una pequeña parte alcanza la circulación sistémica. Aproximadamente el 67% de uranio en la sangre a su vez es filtrado por los riñones y deja el cuerpo en la orina dentro de 24 h1. El resto se deposita sobre todo en los riñones y los huesos, los dos órganos principales de uranio toxicidad2,3,4. Porque el esqueleto se ha identificado como el sitio primario de uranio a largo plazo retención2,3,4,5,6, se han realizado varios estudios para explorar la efecto del uranio en hueso fisiología7.
El hueso es un tejido mineralizado que está remodelado continuamente durante toda su vida. Remodelamiento óseo es un proceso complejo que depende de los tipos de células especializadas y que consiste principalmente en dos fases: resorción de la matriz vieja existente por los osteoclastos seguida de construcción de hueso de novo por los osteoblastos. Los osteoclastos son células grandes, multinuclear resultante de la fusión de células precursoras de origen hematopoyético que migran a los sitios de reabsorción donde fijan al hueso8. El apego ocurre simultáneamente con una reorganización amplia de su citoesqueleto9. Esta reorganización es necesaria para el establecimiento de un compartimiento aislado entre la célula y la superficie del hueso en el cual los osteoclastos secretan protones, llevando a la disolución de hidroxiapatita y proteasas involucradas en la degradación de la matriz orgánica. Los productos resultantes de la degradación son endocytosed, transportado a través de la célula a la superficie de la membrana opuesta a la superficie del hueso y segregada, un proceso llamado transcitosis10,11.
Los resultados de estudios en vivo y en vitro indican que el uranio inhibe la formación de hueso y altera el número y la actividad de osteoblastos7,12. En contraste, los efectos del uranio sobre la resorción del hueso y osteoclastos han sido poco explorados. Varios en vivo estudios han reportado un aumento de la resorción del hueso después de la administración de nitrato de uranilo a ratones o ratas13,14. Además, una investigación epidemiológica sugiere que el aumento en la ingesta de uranio mediante agua potable tendía a asociarse con un aumento en el nivel del suero de un marcador de resorción ósea en hombres15. Tomados en conjunto, estos resultados llevaron a la conclusión de que el uranio, que se acumula en el hueso podría promover la resorción ósea. Sin embargo, los mecanismos celulares implicados en este efecto potencial de uranio siguen siendo una cuestión abierta. Por esta razón, decidimos examinar los efectos del uranio sobre el comportamiento de resorbing las células óseas.
Aquí, describimos el protocolo que hemos establecido para caracterizar y cuantificar los efectos del uranio natural sobre la viabilidad de los osteoclastos y en la diferenciación de osteoclastos y la actividad reabsorbedor. Los experimentos descritos en este documento se han realizado con la línea celular RAW 264.7 macrófago transformado murino, que pueden distinguir fácilmente en osteoclastos cuando se cultivan en presencia de la citoquina RANKL para 4 o 5 días, y que clásicamente se utiliza para estudiar diferenciación y función de los osteoclastos16. Los procedimientos desarrollados son confiables, dar resultados altamente reproducibles y son plenamente aplicable a osteoclastos primarios. Por todas estas razones, creemos que esta metodología es útil para obtener una mejor comprensión de los mecanismos moleculares implicados en la toxicidad del uranio en el hueso. Además, consideramos que este enfoque puede ser adaptado como una herramienta de detección para la identificación de uranio nuevos agentes quelantes.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Lonza</td><td>BE12-604F</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-MEM</td><td>Lonza</td><td>BE12-169F</td><td></td></tr><tr><td>EMEM sin rojo fenol</td><td>Lonza</td><td>12-668E</td><td></td></tr><tr><td>Agua para cultivo celular</td><td>Lonza</td><td>BE17-724F</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>Solución de penicilina-estreptomicina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4333</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Solución de L-Glutamina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G7513</td><td></td></tr><tr><td>Solución de Azul de Tripán 0.4%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8154</td><td></td></tr><tr><td>HyClone suero fetal bovino</td><td>GE Life Sciences</td><td>SH30071.03</td><td></td></tr><tr><td>7.5% bicarbonato de sodio solución acuosa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8761</td><td></td></tr><tr><td>Fosfatasa ácida, kit de lekocitos (TRAP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>387A</td><td></td></tr><tr><td>Azul de tiazolilo Bromuro de tetrazolio (MTT) en polvo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5655</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5879</td><td></td></tr><tr><td>Alizarina Rojo S sal sódica, 1% p/v aq. sol.</td><td>Alfa Aeros</td><td>42746</td><td></td></tr><tr><td>Placas de reabsorción ósea de osteoensayo, placas de 24 pocillos</td><td>Corning Life Sciences</td><td>3987</td><td></td></tr><tr><td>Multipocillo Placas de 24 pocillos</td><td>Falcon</td><td>353504</td><td></td></tr><tr><td>Matraz 75 cm2</td><td>Falcon</td><td>353133</td><td></td></tr><tr><td>Tubos cónicos de polipropileno 50 ml</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Raspadores de células 30 cm</td><td>TPP</td><td>90003</td><td></td></tr></tbody></table>

métodos para analizar los efectos del uranio natural en in vitro la osteoclastogénesis

Methods for Analyzing the Impacts of Natural Uranium on In Vitro Osteoclastogenesis

Uranio se ha demostrado que interfieren con la fisiología del hueso y está bien establecido que este metal se acumula en el hueso. Sin embargo, poco se sabe sobre el efecto del uranio natural en el comportamiento de las células óseas. En particular, el impacto del uranio en los osteoclastos, las células responsables de la resorción de la matriz ósea, no está documentado. Para investigar esta cuestión, hemos establecido un nuevo protocolo con acetato de uranilo como fuente de uranio natural y la línea de celular RAW 264.7 murina como un modelo de precursores de osteoclastos. En este documento, nos detalló todos los ensayos necesarios para prueba de citotoxicidad de uranio en precursores de los osteoclastos y evaluar su impacto en la osteoclastogénesis y la función resorbing de osteoclastos maduros. Las condiciones hemos desarrollado, en particular para la preparación de medios de cultivo que contienen uranilo y para la siembra de RAW 264.7 células permiten obtener resultados confiables y altamente reproductivos. Por otra parte, hemos optimizado el uso de herramientas de software para facilitar el análisis de diversos parámetros como el tamaño de los osteoclastos o el porcentaje de la matriz correspondiente.

Tinción de fosfatasa ácida tartrato-resistente fue utilizado para visualizar los osteoclastos como grandes células púrpura que tienen 3 o más núcleos. Imágenes representativas de los osteoclastos de RAW 264.7 células cultivadas en presencia de RANKL e iones de uranilo se muestran en la figura 1. Cambios en número y tamaño de los osteoclastos en respuesta a uranio son fácilmente visibles en imágenes compuestas de los pozos todas y en imágenes ampliadas.
<p...

Uranio se sabe que afectan el metabolismo óseo. Aquí, presentamos un protocolo dirigido a investigar el efecto de la exposición de uranio natural en la viabilidad, la diferenciación y la función de los osteoclastos, las células de reabsorción ósea.

Métodos para analizar los efectos del uranio Natural en In Vitro la osteoclastogénesis

Uranium has been shown to interfere with bone physiology and it is well established that this metal accumulates in bone. However, little is known about ...

El objetivo general de este procedimiento es investigar los efectos de la exposición natural al uranio en la viabilidad, diferenciación y función de los osteoclastos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la toxicidad ambiental sobre el impacto de la exposición al uranio en la fisiología ósea y el metabolismo. La principal ventaja de esta técnica es que proporciona una nueva e interesante herramienta para el cribado de originadores de uranio.Cuando el cultivo celular RAW 264.7 haya alcanzado una confluencia del 85 al 90%, utilice un raspador de células para levantar mecánicamente las células del fondo del matraz de cultivo celular y transferir las células a un tubo cónico estéril de 50 mililitros. Pipetee la solución celular varias veces para romper los grumos y contar la suspensión unicelular resultante. Diluir las células a una concentración de 10 a la cuarta células por mililitro en un Medio Esencial Mínimo Alfa modificado, suplementado con L-glutamina y 5% de suero bovino fetal y agregar un mililitro de células por pocillo a una placa de cultivo celular de 24 pocillos para una incubación de seis horas a 37 grados Celsius.Un parámetro importante par

methods-for-analyzing-impacts-natural-uranium-on-vitro

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Investigación

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Developmental Biology

Biología del Desarrollo

En este video, describimos un ensayo de reabsorción osteoclástica in vitro en placas de cultivo celular recubiertas de fosfato de calcio cultivadas con osteoclastos derivados de células mononucleares de sangre periférica humana. Los osteoclastos forman un anillo de actina característico en la matriz recubierta de fosfato de calcio de la placa de cultivo celular y degradan la matriz dentro de la región del anillo de actina para liberar iones de calcio y fosfato, lo que resulta en la formación de...

Ensayo de fosa de resorción: una técnica in vitro para cuantificar la actividad de resorción de calcio de osteoclastos maduros utilizando placas de cultivo recubiertas de fosfato de calcio

En este video, demostramos el efecto de diferentes concentraciones de anticuerpos anti-c-fms en la osteoclastogénesis, que es el proceso de formación de osteoclastos a partir de progenitores de osteoclastos.

Efecto del anticuerpo anti C-fms sobre la osteoclastogénesis en células de médula ósea de ratón in vitro

Los osteoclastos son las células de resorción ósea principal en el cuerpo. La capacidad para aislar los osteoclastos en grandes cantidades ha resultado en avances significativos en el entendimiento de la biología de los osteoclastos. En este protocolo, se describe un método para el aislamiento, cultivo y la cuantificación de la actividad de los osteoclastos in vitro.

Osteoclastos Derivación de médula ósea de ratón

El agua de purga de producción (PBW) se trató con nanopartículas de óxido cúprico (CuO-NPs) y se evaluó la toxicidad celular en células humanas cultivadas. El objetivo de este protocolo fue integrar la muestra ambiental nativa en un formato de cultivo celular evaluando los cambios en la toxicidad debido al tratamiento con CuO-NP.

La eliminación de oligoelementos por cúprico Óxido nanopartículas de uranio<em&gt; In Situ</em&gt; Recuperación de purga de agua y su efecto sobre la viabilidad celular

Los osteoclastos son policaryones de macrófagos específicos de los tejidos derivados del linaje de monocitos y macrófagos de las células madre hematopoyéticas. Este protocolo describe cómo aislar las células de la médula ósea de manera que se obtengan grandes cantidades de osteoclastos reduciendo el riesgo de accidentes encontrados en los métodos tradicionales.

Aislamiento, purificación y diferenciación de los precursores de osteoclastos de la médula ósea de rata

Este protocolo incluye la disección de huesos largos murinos y aislamiento de médula ósea, macrófagos de médula ósea y producir osteoclastos con estimulante factor (M-CSF) y el receptor activador del ligando del factor nuclear Kappa B (RANKL) de colonias de macrófagos o factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y su detención por el anticuerpo anti-c-fms, receptor de M-CSF.

Efecto de anticuerpos Anti-c-fms en la formación de osteoclastos y la proliferación de precursores de osteoclastos In Vitro

Este protocolo presenta un ensayo de captación de aminoácidos radiomarcado, que es útil para evaluar el consumo de aminoácidos en células primarias o en huesos aislados.

Evaluación del consumo de aminoácidos en células óseas cultivadas y tallos óseos aislados

El ensayo de flujo metabólico celular en tiempo real mide la tasa de consumo de oxígeno y la tasa de acidificación extracelular, que corresponde a la producción mitocondrial y glicolítica de trifosfato de adenosina, utilizando sensores de pH y oxígeno. El manuscrito explica un método para comprender el estado energético de los osteoblastos y la caracterización e interpretación del estado bioenergético celular.

Uso del analizador de flujo metabólico celular en tiempo real para monitorear la bioenergética de osteoblastos

Aquí presentamos protocolos que ofrecen una base flexible y estratégica para manipular viralmente células precursoras de oligodendrocitos para sobreexpresar proteínas de interés con el fin de interrogar específicamente su papel en oligodendrocitos a través del modelo in vitro de mielinización del sistema nervioso central.

Producción y Uso de lentivirus de células selectivamente la transducción primaria Oligodendrocyte precursor para In Vitro Ensayos de mielinización

Establecimos un método para encapsular células madre pluripotentes (células PS) en cápsulas de hidrogel de alginato utilizando una boquilla coaxial.  Esto evita que las células se agreguen excesivamente y limita el esfuerzo cortante experimentado por las células en cultivo en suspensión.  La técnica es aplicable a la producción masiva de células PS, así como a la investigación sobre el nicho de células madre.

La encapsulación de alginato de células madre pluripotentes utilizando una boquilla-Co axial

Aprende a analizar los efectos del uranio natural en la osteoclastogénesis in vitro usando cultivos de células RAW 264.7. Este método permite evaluar la viabilidad, diferenciación y función de los osteoclastos expuestos.

Métodos para analizar los efectos del uranio Natural en In Vitro la osteoclastogénesis

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