Name: Preparación de DMMTAV y DMDTAV usando DMAV para usos ambientales: síntesis, purificación y confirmación (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: Aprende a sintetizar y purificar DMMTA y DMDTA como estándares estables para análisis cuantitativo de tioarsenicales. Este protocolo modificado mejora la fiabilidad mediante purga con nitrógeno y extracción con éter.

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Esta investigación fue apoyada por el programa de investigación ciencia básica (proyecto número: 2016R1A2B4013467) a través de la nacional investigación Fundación de Corea (NRF) financiado por el Ministerio de ciencia, TIC y futuro planificación 2016 y también apoyado por la ciencia básica de Corea Programa de investigación del Instituto (proyecto número: C36707).

1. síntesis de DMMTAV
<ol><li>
Preparación química y relación molar de mezcla de DMAV, Na2S y H2SO4 Nota: DMAV: Na2S:H2por4 = 1:1.6:1.6<ol>
<li>Disolver 5,24 g de DMAV en 40 mL desionizada y N2-purgado (purgado por lo menos 30 min) agua en un tubo de centrífuga de 50 mL.</li>
		<li>Preparar el reactivo de Na2S disolviendo 14,41 g de Na2S·9H2O en 50 mL desionizada y N2-purgado en un matraz de 250 mL.</li>
		<li>Preparación H2modo reactivo4 añadiendo 3,3 mL de ácido sulfúrico concentrado (96%) y 40 mL de desionizada y N2-purgado de agua en un tubo de centrífuga de 50 mL. Nota: Fracción molar Final de DMAV: Na2S:H2SO4 = 1:1.6:1.6 1,3,4,8,15.</li>
		<li>Añadir el preparado 40 mL de solución DMAV (paso 1.1.1) a lo 50 mL de Na2S contenida en el frasco de 250 mL (paso 1.1.2). Enjuague el tubo que contiene el DMAV con 10 mL de agua purgada y añadir al matraz de 250 mL.</li>
		<li>Cerrar el matraz con un tapón de caucho de tres orificios que con tubos de vidrio. Utilizar el vidrio de los tubos para entrada de gas de2 N, salida y H2SO4 entrada de solución, respectivamente. Inmediatamente después de cerrar el frasco, permiten el flujo del gas N2 en el matraz. Nota: La presión de Gas debe mantenerse fluyendo sobre la superficie de la solución de reacción sin salpicar.</li>
		<li>Conexión a prueba de ácido tubo el tubo de vidrio de H2SO4 entrada de solución con una jeringa de 50 mL agregar el preparado 40 mL de H2por lo tanto4 solución (paso 1.1.3). Añadir 40 mL de H2hasta4 solución, lentamente y de manera gradual. PRECAUCIÓN: Al añadir el ácido sulfúrico, se generarán humos blancos; Utilice una campana bien ventilada.</li>
		<li>Monitorear el cambio del color de la mezcla en el matraz de reacción al añadir ácido sulfúrico a intervalos regulares. Mantener un intervalo de 4-5 mL gotas de H2hasta4; la mezcla debe tener una solución turbia blanca. Nota: Puede aparecer precipitación amarillo instantáneo debido a la rápida adición de ácido sulfúrico concentrado.</li>
		<li>Garantizar que la solución de reacción ha estado de pie durante 1 hora desde el inicio del paso 1.1.4.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Extracción deV de DMMTA método de extracción líquido-líquido
	<ol>
<li>Después de 1 h, verter la solución de reacción en un matraz que contiene unos 200 mL de éter dietílico.</li>
		<li>Agitar el embudo de 5-10 minutos, liberando el gas varias veces cambiando la llave de paso. Nota: Sintetizada DMMTAV será transferida a la capa superior de éter dietílico (0.713 g·mL-1). PRECAUCIÓN: Gas de éter dietílico puede ser perjudicial; Utilice una campana bien ventilada.</li>
		<li>Recoge la solución de reacción en un vaso de precipitado y recoger por separado el éter dietílico que contiene DMMTAV en una botella. Vuelva a colocar la solución de reacción en el mismo matraz y añadir aproximadamente 200 mL de dulce éter dietílico para reshaking. Repita los pasos 1.2.2 - 1.2.3 tres veces.</li>
		<li>Vierta el éter dietílico recogido de paso 1.2.3 en el mismo embudo separatory otra vez y añadir unos 100 mL N2-purgado de agua desionizada. Agite durante 5-10 min y descartar el N2-purgado de agua desionizada y unos pocos mL de éter dietílico para propósitos de pureza. Recoge el éter dietílico restante en un plato de petri de vidrio (diámetro interno mínimo de 160 mm) y altura mínima de 50 mm.</li>
		<li>Transfiera el plato de petri de vidrio en una caja de guante de atmósfera de N2 para evitar la transformación de las especies. PRECAUCIÓN: Asegúrese de que el solvente no se tira en la bomba de vacío a través de la salida de la caja de paso.</li>
		<li>Seco hasta un precipitado blanco de dimethylmonothioarsinate (cristalizada DMMTAV) se forma en el plato de petri de vidrio. Nota: El protocolo se puede detener aquí.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Verificación del almacenamiento y síntesis DMMTAV
	<ol>
<li>Tomar el precipitado blanco de cristal DMMTAVy mida y registre su peso total. PRECAUCIÓN: Use una campana bien ventilada o guantera para evitar la inhalación de sulfuro de hidrógeno gas.</li>
		<li>Disolver crystalized DMMTAV en 50 mL de N2-purgado de agua desionizada y filtrar el precipitado amarillo a través de un filtro de jeringa de 0,2 μm.</li>
		<li>Asumir que la total a partir del uso DMAV se convierte en DMMTAV, es decir,≈9, 649 mg As· L-1. Diluir la solución madre de DMMTAV a ≈1 mg· L-1 y ≈40 μg· L-1 para el análisis de verificación con ionización por Electrospray masa Spectromtery (ESI-MS) y HPLC-ICP-MS, respectivamente.</li>
		<li>Análisis de m/z de DMMTAV con ESI-MS11,16 y fragmentos en m/z 155 en el modo positivo-ion o en m/z 153 en el modo de iones negativos (tabla 1). Nota: Ver los valores de referencia de m/z (tabla 1).</li>
		<li>Cromatograma de DMMTAV en la solución usando HPLC-ICP-MS11,16,17 con eluyente apropiado condiciones de analizar y confirmar un pico principal se encuentra en el tiempo de retención se describe en el literatura. Nota: Pureza de sintetizado DMMTAV debe calcularse usando los resultados del análisis del paso 1.3.5.</li>
		<li>Analizar la concentración de arsénico total utilizando ICP-MS después de la digestión ácida11 y calcular la concentración verdadera de DMMTAV en sintetizada DMMTAV solución madre con factores de dilución y de la pureza, como en la siguiente ecuación: Total analizado como concentración (μg· L-1) · Factor de dilución · Pureza (%) = concentración de verdad DMMTAV DMMTAV solución stock (μg· L-1)</li>
		<li>Almacene la solución stock DMMTAV a 4 ° C en la oscuridad para mayor especiación cuantitativa análisis18.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. síntesis de DMDTAV
<ol><li>
Preparación química y relación molar de mezcla de DMAV , Na2S y H2SO4 Nota: DMAV: Na2S:H2por4 = 1:7.5:7.5<ol>
<li>Disolver 1,38 g de DMAV en 40 mL de agua desionizada en un tubo de centrífuga de 50 mL.</li>
		<li>Para preparar reactivo de Na2S 18,01 g de Na2S·9H2O en una 50 mL de agua desionizada en un matraz de 250 mL de disolución.</li>
		<li>Preparación H2modo reactivo4 añadiendo 4 mL de ácido sulfúrico concentrado (96%) a 40 mL de agua desionizada contenida en un tubo de centrífuga de 50 mL. Nota: Fracción molar Final de DMAV: Na2S:H2SO4 = 1:7.5:7.51,3,4,8,15.</li>
		<li>Añadir el preparado 40 mL de solución DMAV (paso 2.1.1) a lo 50 mL de Na2S contenida en el frasco de 250 mL (paso 2.1.2). Enjuague el tubo que contiene el DMAV con 10 mL de agua desionizada y añadir al matraz de 250 mL.</li>
		<li>Añadir el preparado 40 mL de H2hasta4 solución (paso 2.1.3), lentamente y de manera gradual, en el matraz.</li>
		<li>Monitorear el cambio del color de la mezcla en el matraz de reacción al añadir ácido sulfúrico a intervalos regulares. Mantener un intervalo de 4-5 mL gotas de H2hasta4; la mezcla debe tener una solución turbia, blanco, amarillo. Nota: Puede aparecer precipitación amarillo instantáneo debido a una rápida adición de ácido sulfúrico concentrado. PRECAUCIÓN: Al añadir el ácido sulfúrico, se generarán humos blancos; Utilice una campana bien ventilada.</li>
		<li>Mantener la solución de reacción en el frasco toda la noche sin cubrir. Nota: El protocolo se puede detener aquí.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Extracción deV de DMDTA método de extracción en fase sólida (SPE)
	<ol>
<li>Después de la reacción durante la noche de pie, filtro de la solución de reacción utilizando una jeringa de C18 tipo SPE basados en sílice para atrapar sintetizado DMDTAV en la resina. PRECAUCIÓN: Utilice una campana bien ventilada.</li>
		<li>Disolver 0,77 g de acetato de amonio en 1 L de agua desionizada para preparar acetato de amonio 10 mM (pH 6.3). Eluir un suficiente volumen de acetato de amonio 10 mM a través de la jeringa de C18 (paso 2.2.1) para extraer el DMDTA adsorbidoV. Recoger el acetato de amonio filtrado en una placa de Petri (diámetro interno mínimo de 160 mm) y altura mínima de 50 mm de vidrio.</li>
		<li>Transfiera el plato de petri de vidrio en una caja de guante de atmósfera de N2 para evitar la transformación de las especies. PRECAUCIÓN: Asegúrese de solvente no se tira en la bomba de vacío a través de la salida de la caja de paso.</li>
		<li>Secar hasta que es un precipitado blanco de dimethyldithioarsinate formado (cristalizada DMDTAV) sobre el plato de petri de vidrio. Nota: El protocolo se puede detener aquí.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Verificación del almacenamiento y síntesis DMDTAV
	<ol>
<li>Tomar el precipitado blanco de cristal DMDTAVy medir su peso total, la medición de la grabación. PRECAUCIÓN: Use una campana bien ventilada o guantera para evitar la inhalación de sulfuro de hidrógeno gas.</li>
		<li>Disolver crystalized DMDTAV en 50 mL de N2-tubo de centrífuga agua desionizada purgado de 50 mL y filtrar cualquier precipitado a través de un filtro de jeringa de 0,2 μm.</li>
		<li>Asumir que el total a partir del uso DMAV se convierte en DMDTAV, es decir,≈2, 539 mg As· L-1. Diluir la solución madre de DMDTAV a ≈1 mg· L-1 y ≈40 μg· L-1 para el análisis de verificación usando ESI-MS y HPLC-ICP-MS, respectivamente.</li>
		<li>Análisis de m/z de DMDTAV con ESI-MS11,16 y fragmentos en m/z 171 en el modo positivo-ion o en m/z 169 en la modalidad de iones negativos (tabla 1). Nota: Ver los valores de referencia de m/z (tabla 1).</li>
		<li>Analizar el cromatograma de DMDTAV en la solución usando HPLC-ICP-MS11,16,17 con eluyente apropiado condiciones y confirmar que un pico se encuentra en el tiempo de retención que se describe en la literatura. Nota: Pureza de sintetizado DMDTAV debe calcularse usando los resultados del análisis del paso 2.3.5.</li>
		<li>Analizar la concentración de arsénico total utilizando ICP-MS después de la digestión ácida11 y calcular la concentración de DMDTAV verdadero en sintetizada solución DMDTAV utilizando factores de dilución y la pureza como la siguiente ecuación: Total analizado como concentración (μg· L-1) · Factor de dilución · Pureza (%) = concentración de verdad DMDTAV DMDTAV en la solución madre (μg· L-1)</li>
		<li>Almacene la solución stock DMDTAV a 4 ° C en la oscuridad para mayor especiación cuantitativa análisis18.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Suzuki, K. T., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15257616">Dimethylthioarsenicals as arsenic metabolites and their chemical preparation.</a> Chem. Res. Toxicol. 17, 914-921 (2004).</li>
<li>Kuroda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+metabolite+of+dimethylarsinic+acid+is+highly+toxic+and+genotoxic%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Microbial metabolite of dimethylarsinic acid is highly toxic and genotoxic.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 198, 345-353 (2004).</li>
<li>Naranmandura, H., Iwata, K., Suzuki, K. T., Ogra, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+and+metabolism+of+four+different+dimethylated+arsenicals+in+hamsters%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Distribution and metabolism of four different dimethylated arsenicals in hamsters.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 245, 67-75 (2010).</li>
<li>Naranmandura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+toxicity+of+arsenic+metabolites+in+human+bladder+cancer+EJ-1+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Res.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Comparative toxicity of arsenic metabolites in human bladder cancer EJ-1 cells.</a> Chem. Res. Toxicol. 24, 1586-1596 (2011).</li>
<li>Wallschlager, D., London, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+methylated+arsenic-sulfur+compounds+in+groundwater%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of methylated arsenic-sulfur compounds in groundwater.</a> Environ. Sci. Technol. 42, 228-234 (2008).</li>
<li>Zhang, J., Kim, H., Townsend, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methodology+for+assessing+thioarsenic+formation+potential+in+sulfidic+landfill+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Methodology for assessing thioarsenic formation potential in sulfidic landfill environments.</a> Chemosphere. 107, 311-318 (2014).</li>
<li>Shimoda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proposal+for+novel+metabolic+pathway+of+highly+toxic+dimethylated+arsenics+accompanied+by+enzymatic+sulfuration%2C+desulfuration+and+oxidation%5BTitle%5D)+AND+%22Trace+Elem.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Proposal for novel metabolic pathway of highly toxic dimethylated arsenics accompanied by enzymatic sulfuration, desulfuration and oxidation.</a> Trace Elem. Med. Biol. 30, 129-136 (2015).</li>
<li>Naranmandura, H., Suzuki, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+dimethylthioarsenicals+in+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Formation of dimethylthioarsenicals in red blood cells.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 227, 390-399 (2008).</li>
<li>Leffers, L., Ebert, F., Taleshi, S. M., Francesconi, A. K., Schwerdtle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+toxicological+characterization+of+two+arsenosugars+and+their+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Nutr.+Food+Res%22%5BJournal%5D)">In vitro toxicological characterization of two arsenosugars and their metabolites.</a> Mol. Nutr. Food Res. 57, 1270-1282 (2013).</li>
<li>Wang, Q. Q., Thomas, J. D., Naranmandura, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25531277">Important of being thiomethylated: Formation, Fate and Effects of methylated thioarsenicals.</a> Chem. Res. Toxicol. 25, 281-289 (2015).</li>
<li>Kim, Y. T., Lee, H., Yoon, H. O., Woo, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+dimethylated+thioarsenicals+and+the+formation+of+highly+toxic+dimethylmonothioarsinic+acid+in+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Kinetics of dimethylated thioarsenicals and the formation of highly toxic dimethylmonothioarsinic acid in environment.</a> Environ. Sci. Technol. 50, 11637-11645 (2016).</li>
<li>Cullen, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methylated+and+thiolated+arsenic+species+for+environmental+and+health+research+-+A+review+on+synthesis+and+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Environ.+Sci%22%5BJournal%5D)">Methylated and thiolated arsenic species for environmental and health research - A review on synthesis and characterization.</a> J. Environ. Sci. 49, 7-27 (2016).</li>
<li>Fricke, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16359172">Chromatographic separation and identification of products form the reaction of dimethylarsinic acid with hydrogen sulfide.</a> Chem. Res. Toxicol. 18, 1821-1829 (2005).</li>
<li>Fricke, M., Zeller, M., Cullen, W., Witkowski, M., Creed, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimethylthioarsinic+anhydride%3A+a+standard+for+arsenic+speciation%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chim.+Acta%22%5BJournal%5D)">Dimethylthioarsinic anhydride: a standard for arsenic speciation.</a> Anal. Chim. Acta. 583, 78-83 (2007).</li>
<li>Suzuki, K. T., Iwata, K., Naranmandura, H., Suzuki, N. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0041008X06004078">Metabolic differences between twon dimethylthioarsenicals in rats.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 218, 166-173 (2007).</li>
<li>Jeong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0026265X17300383">Development of a simultaneous analytical method to determine arsenic speciation using HPLC-ICP-MS: Arsenate, arsenite, monomethylarsonic acid, dimethylarsinic acid, dimethyldithioarsinic acid, and dimethylmonothioarsinic acid.</a> Microchem. J. 134, 295-300 (2017).</li>
<li>Li, Y., Low, C. -K., Scott, A. J., Amal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arsenic+speciation+in+municipal+landfill+leachate%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Arsenic speciation in municipal landfill leachate.</a> Chemosphere. 79, 794-801 (2010).</li>
<li>Conklin, D. S., Fricke, W. M., Creed, A. P., Creed, J. T. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2008/JA/b713145c">Investigation of the pH effects on the formation of methylated thio-arsenicals, and the effects of pH and temperature on their stability.</a> J. Anal. At. Spectrom. 23, 711-716 (2008).</li>
<li>Hansen, H. R., Raab, A., Jaspara, M., Milne, F. B., Feldmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sulfur-containing+arsenical+mistaken+for+dimethylarsinous+acid+%5BDMA%28III%29%5D+and+identified+as+a+natural+metabolite+in+urine%3A+major+implications+for+studies+on+arsenic+metabolism+and+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Res.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Sulfur-containing arsenical mistaken for dimethylarsinous acid [DMA(III)] and identified as a natural metabolite in urine: major implications for studies on arsenic metabolism and toxicity.</a> Chem. Res. Toxicol. 17, 1086-1091 (2004).</li>
<li>Mandal, B. K., Suzuki, K. T., Anzai, K., Yamaguchi, K., Sei, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+SEC-HPLC-ICP-MS+hyphenated+technique+for+identification+of+sulfur-containing+arsenic+metabolites+in+biological+samples%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chromatogr.+B%22%5BJournal%5D)">A SEC-HPLC-ICP-MS hyphenated technique for identification of sulfur-containing arsenic metabolites in biological samples.</a> J. Chromatogr. B. 874, 64-76 (2008).</li>
<li>Bartel, M., Ebert, F., Leffers, L., Karst, U., Schwerdtle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicological+characterization+of+the+inorganic+and+organic+arsenic+metabolite+thio-DMAV+in+cultured+human+lung+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Toxicological characterization of the inorganic and organic arsenic metabolite thio-DMAV in cultured human lung cells.</a> J. Toxicol. 2011, (2011).</li>
<li>An, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+dimethyldithioarsinic+acid+in+a+simulated+landfill+leachate+in+relation+to+hydrosulfide+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Geochem.+Health%22%5BJournal%5D)">Formation of dimethyldithioarsinic acid in a simulated landfill leachate in relation to hydrosulfide concentration.</a> Environ. Geochem. Health. 38, 255-263 (2016).</li>
<li>Chen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arsenic+speciation+in+the+blood+of+arsenite-treated+F344+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Res.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Arsenic speciation in the blood of arsenite-treated F344 rats.</a> Chem. Res. Toxicol. 26, 952-962 (2013).</li>
<li>Alava, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC-ICP-MS+method+development+to+monitor+arsenic+speciation+changes+by+human+gut+microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Chromatogr%22%5BJournal%5D)">HPLC-ICP-MS method development to monitor arsenic speciation changes by human gut microbiota.</a> Biomed. Chromatogr. 26, 524-533 (2012).</li>
<li>Kurosawa, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+metabolic+activation+associated+with+glutathione+in+dimethylmonoarsinic+acid+%28DMMTAV%29-induced+toxicity+obtained+from+in+vitro+reaction+of+DMMTAV+with+glutathione%5BTitle%5D)+AND+%22J.+trace+Elem.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">A novel metabolic activation associated with glutathione in dimethylmonoarsinic acid (DMMTAV)-induced toxicity obtained from in vitro reaction of DMMTAV with glutathione.</a> J. trace Elem. Med. Biol. 33, 87-94 (2016).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El protocolo desarrollado ha aclarado los pasos críticos que anteriores estudios1,3,4,8,15 omitido o abreviado, que pudo haber llevado a dificultades o el fracaso durante la DMMTAV y DMDTAV síntesis. DMMTAV es sensible a la oxidación1,5, reactivos químicos para su sínte...

Puesto que el ácido dimethylarsinic (DMAV) se ha demostrado que exhiben toxicidad aguda y genotoxicidad por sufrir metilación y thiolation a la ingestión de1,2, la vía metabólica de arsénico thiolation tiene sido intensamente estudiado tanto in vitro e in vivo3,4 , así como en los medios ambientales (por ejemplo, lixiviados de vertederos)5,6. Estudios anteriores han encontrado tanto reducción y thiolated análogos de DMAV en la vida de las células, por ejemplo, dimethylarsinous ácido (DMAIII), ácido dimethylmonothioarsinic (DMMTAV) y dimethyldithioarsinic (ácido DMDTAV)7,8,9, con dimethylated thioarsenicals como DMMTAV exhibiendo toxicidad mayor que otros conocidos arsenicales orgánicos o inorgánicos10. La abundancia de thioarsenicals altamente tóxico tiene graves consecuencias ambientales, ya que pueden plantear un riesgo para los seres humanos y el medio ambiente bajo condiciones altamente sulfídicos11. Sin embargo, los mecanismos de DMMTAV y DMDTAV (trans) formación y su destino en los medios de comunicación ambiental todavía requieren más estudio. Así, el análisis cuantitativo de thioarsenicals es necesaria para mejorar la comprensión de los efectos ambientales de DMMTAV y DMDTAV.
Aunque los productos químicos estándar son el requisito fundamental para el análisis cuantitativo, los estándares de DMMTAV y DMDTAV son difíciles de obtener mediante la replicación de los estudios anteriores, debido al alto riesgo de transformación de especies en otras especies y procedimientos de síntesis de datos12. Por otra parte, los métodos referenciados tienen limitaciones que pueden llevar a dificultades prácticas para sintetizar los productos químicos estándar y la realización de análisis cuantitativo. DMMTAV y DMDTAV comúnmente se preparan mezclando DMAV, Na2S, H2para4 en un cierto cociente molar1 o burbujeo H2S gas a través de una solución de DMAV 13,14. La sustitución de funciones método burbujas de oxígeno por azufre mediante un suministro directo de gas de H2S, que es altamente tóxico y difícil de controlar para un usuario inexperto. Por el contrario, la anterior mezcla método1, ampliamente utilizado para el análisis cualitativo de DMMTAV y DMDTAV en estudios ambientales5,6,12, cuenta con la thiolation de DMAV con H2S generado por mezcla Na2S y H2para4 y produce DMMTAV y DMDTAV, permitiendo más fácil control estequiométrico producir productos químicos objetivo, como en comparación con el directo uso de H2S gas.
La referencia mezcla método procedimientos1,3,4,8,15 mencionado en este estudio exhiben limitaciones en algunos de sus críticos pasos experimentales, que puedan llevar a error experimental. Por ejemplo, los detalles de la preparación de disolventes específicos (es decir, desionizada agua) y la extracción y cristalización de los arsenicales sintetizados son demasiado abreviados o no descritos con suficiente detalle. Tan dispersa y limitada información sobre las etapas del procedimiento podría dar lugar a la formación incompatible de thioarsenicals y análisis de cuantificación fiable. Por lo tanto, el protocolo modificado desarrollado en el presente documento describe la síntesis de DMMTAV y DMDTAV soluciones con análisis de separación cuantitativa de especies.

<table><tbody><tr><td>Ácido cacodílico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>20835-10G-F</td><td></td></tr><tr><td>Sulfuro de sodio no hidratado</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2006-500G</td><td></td></tr><tr><td>Ácido sulfúrico 96%</td><td>J.T.Baker</td><td>0000011478</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de amonio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7262-500G</td><td></td></tr><tr><td>Ácido fórmico 98%</td><td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td><td>066-00461</td><td></td></tr><tr><td>Éter dietílico (extra puro)</td><td>Junsei Chemical</td><td>33475-0380</td><td></td></tr><tr><td>Tapón adaptador para catridges Bond Elut de 60 mL</td><td>Agilent Technologies</td><td>12131004</td><td>Tipo de jeringa SPE</td></tr><tr><td>Bond Cartucho Elut C18</td><td>Agilent Technologies</td><td>14256031</td><td>Tipo de jeringa de SPE</td></tr><tr><td>HyPURITY C-18</td><td>Thermo Scientific</td><td>22105-254630</td><td>5 mmm, 125 x 4,6 mm</td></tr><tr><td>Guantera</td><td>Chungae-chun, Rep. de Corea</td><td></td><td>Personalizado&nbsp;</td></tr><tr><td>Agilent 1260 Infinity Bioinert LC</td><td>Agilent Technologies</td><td>DEAB600252, DEACH00245</td><td></td></tr><tr><td>Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS</td><td>Agilent Technologies</td><td>JP12031510</td><td></td></tr><tr><td>Finnigan LCQ Deca XP MAX Sistema de espectrómetro de masas</td><td>Thermo Electron Corporation</td><td>LDM10627</td><td></td></tr></tbody></table>

preparación de dmmtav y dmdtav usando dmav para usos ambientales: síntesis, purificación y confirmación

Preparation of DMMTAV and DMDTAV Using DMAV for Environmental Applications: Synthesis, Purification, and Confirmation

Dimethylated thioarsenicals como el ácido dimethylmonothioarsinic (DMMTAV) y el ácido dimethyldithioarsinic (DMDTAV), que se producen por la vía metabólica de la thiolation de (DMAV) ácido dimethylarsinic, han sido recientemente encontrado en el medio ambiente así como los órganos humanos. DMMTAV y DMDTAV pueden cuantificarse para determinar los efectos ecológicos de dimethylated thioarsenicals y su estabilidad en medios ambientales. El método de síntesis para estos compuestos es concepto, haciendo estudios anteriores difíciles de replicar. Además, hay una falta de información sobre técnicas de almacenamiento, incluyendo el almacenamiento de los compuestos sin transformación de las especies. Por otra parte, porque existe sólo información limitada acerca de los métodos de síntesis, puede haber dificultades experimentales en síntesis de productos químicos estándar y la realización de análisis cuantitativo. El protocolo presentado adjunto proporciona un método de síntesis prácticamente modificado para el thioarsenicals dimethylated, DMMTAV y DMDTAVy ayudará en la cuantificación del análisis de la separación de especies utilizando líquido de alto rendimiento cromatografía en conjunto con plasma acoplado inductivamente espectrometría de masas (HPLC-ICP-MS). Los pasos experimentales de este procedimiento fueron modificados por centrarse en la preparación de reactivos químicos, métodos de filtración y almacenamiento de información.

Ya DMMTAV ha sido preparado por error por la DMAIII síntesis método19, verificación de sintetizado DMMTAV y DMDTAV es un paso crítico para la síntesis y extracción y determinar la norma ideal materiales químicos. Productos químicos sintetizados pueden ser verificados por el pico de DMMTAV (154 MW g·mol-1) y relación de masa de la carga DMDTAV (170 MW g·mol-1) (m/z) usan...

Este artículo presenta protocolos experimentales modificados para el ácido dimethylmonothioarsinic (DMMTAV) y dimethyldithioarsinic (DMDTAV) síntesis, induciendo dimethylarsinic ácido (DMAV) thiolation con la mezcla de DMAV , Na2S y H2por4. El protocolo modificado proporciona una guía experimental, de tal modo superar las limitaciones de las medidas de síntesis que podrían haber causado errores experimentales en análisis cuantitativo.

Preparación de DMMTAV y DMDTAV usando DMAV para usos ambientales: síntesis, purificación y confirmación

Dimethylated thioarsenicals such as dimethylmonothioarsinic acid (DMMTAV) and dimethyldithioarsinic acid (DMDTAV), which are produced by the metabolic ...

El objetivo general de este procedimiento es sintetizar, purificar y aislar el ácido dimetilmonotiol arsénico estable y el ácido dimetil ditioarsénico para su uso como estándares en el análisis cuantitativo de especiación de tioarsenicales. Esta guía experimental puede ayudar a abordar problemas clave en el análisis cuantitativo de tioarsenical, como la falta de confiabilidad causada por errores en pasos críticos de la síntesis de patrones de tioarsenical. La principal ventaja de esta técnica modificada es que produce patrones químicos estables que se pueden utilizar para cuantificar el contenido de tioarsenical en las muestras.Para comenzar la síntesis de DMMTA en una campana extractora, prepare soluciones de ácido dimetilmonotioarsínico, sulfuro de sodio y ácido sulfúrico en agua desionizada purgada durante 30 minutos con gas nitrógeno. Agregue la solución de DMA a la solución de sulfuro de sodio. Enjuague el recipiente de la solución de DMA con 10 mililitros de agua purgada N2 y agregue el enjuague a la mezcla.Anote el momento en el que se combinaron las soluciones. Conecte un tapón de goma de tres orificios equipado con tubos de vidrio a una línea de gas nitrógeno. Tape el matr

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Preparación de DMMTA^V y DMDTA^V usando DMA^V para usos ambientales: síntesis, purificación y confirmación

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