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DOI: 10.3791/56693-v
Ju-Chun Chang1, Se Jin Lee2, Jae Su Kim2, Chung-Hsiung Wang3, Yu-Shin Nai1
1Department of Biotechnology and Animal Science,National Ilan University, 2Department of Agricultural Biology, College of Agriculture Life Sciences,Chonbuk National University, 3Department of Entomology,National Taiwan University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo describe un calor proteína inducida por choque expresión sistema (pDHsp/V5-su/sf9 de la célula), que puede utilizarse para evaluar la actividad anti-apoptótica de posibles proteínas extrañas y su truncado amino o expresando proteínas extrañas ácidos en las células de los insectos.
El objetivo general de este sistema de expresión de proteínas inducido por choque térmico es evaluar la actividad antiapoptótica de dos proteínas potencialmente antagónicas funcionalmente en células de insectos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre las funciones y actividades de las proteínas candidatas en biotecnología y proteómica, como sus actividades antiapoptóticas y las interacciones proteicas. La principal ventaja de esta técnica es que el momento de la expresión génica está controlado por la inducción de choque térmico.
Por lo tanto, este método puede proporcionar información sobre el estado funcional de las proteínas. También se puede aplicar a otros sistemas, como la expresión de proteínas en mamíferos. Las células de insecto Spodoptera frugiperda, o Sf9, utilizadas en este protocolo se cultivan en medio de cultivo celular en matraces de cultivo celular de 25 centímetros cuadrados a 28 grados centígrados.
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