Estenosis de la Vena Cava Inferior: un modelo murino de trombosis venosa profunda

El objetivo general de este procedimiento quirúrgico es crear una estenosis de la vena cava inferior para imitar la distorsión del flujo sanguíneo para el inicio de la trombosis venosa profunda. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la trombosis venosa sobre los mecanismos de inicio de la trombosis venosa profunda. La principal ventaja de esta técnica es que simula la alteración del flujo sanguíneo, un mecanismo clave del inicio de la trombosis en las venas.

La demostración visual de este método es fundamental, ya que separar la vena cava inferior de la aorta y hacer el agujero entre estos tejidos es difícil de explicar verbalmente. Comience por afeitar el abdomen de un ratón anestesiado de 19 a 25 gramos de ocho a 12 semanas de edad y coloque el ratón en posición supina sobre una almohadilla térmica. Use un bastoncillo de algodón estéril para desinfectar la piel expuesta tres veces con una solución antibacteriana.

Confirme el nivel adecuado de sedación por falta de respuesta al pinzamiento del dedo del pie y cubra el ratón con un paño estéril con un orificio sobre el sitio quirúrgico. Bajo un microscopio de disección, haga una incisión a lo largo de la línea media abdominal, comenzando 1,5 centímetros por debajo del esternón y use bastoncillos de algodón para exteriorizar los intestinos hacia el lado izquierdo del animal. Cubrir el tejido intestinal con una gasa estéril empapada en solución salina a 37 grados centígrados.

Colocar retractores de tejido para expandir la incisión y localizar la vena cava inferior, o IVC, y sus ramas laterales caudales a la vena renal izquierda. Con pinzas, tire hacia arriba del tejido graso que rodea las ramas laterales, luego use una segunda pinza para hacer un túnel debajo de la rama. Y ligar todas las ramas laterales lo más cerca posible de la VCI con suturas de prolene inerte 7-0.

Sujetando los tejidos circundantes con fórceps, tire de la VCI hacia arriba y hacia la izquierda para producir tensión en la pequeña área entre la VCI y la aorta, precisamente entre la VCI y la vena renal izquierda. Inserte un segundo par de pinzas entre la aorta y la VCI y abra y cierre las pinzas no más de tres a cinco veces para hacer un orificio. Es muy importante hacer el orificio precisamente en el punto donde la VCI converge con la vena renal izquierda.

Con la mano izquierda, coloque una pieza de dos centímetros de sutura de prolena inerte 7-0 en el lado izquierdo de la cavidad peritoneal, cerca de la VCI, y tire de la VCI hacia arriba y hacia la izquierda nuevamente. Inserte la segunda pinza en el orificio entre la aorta y la VCI para que las puntas aparezcan en el otro lado de la VCI y tire de la sutura hacia atrás a través del orificio. Haga un nudo provisional suelto y coloque un espaciador de aguja de calibre 30, doblado en un gancho, en el nudo.

Después de apretar el nudo, retire el espaciador y use un bastoncillo de algodón para devolver los intestinos a la cavidad peritoneal. Utilizando bucles continuos, cierre el peritoneo con una sutura VICRYL 6-0 y cierre la piel con grapas metálicas. Por vía subcutánea, inyecte al ratón 0,5 mililitros de glucosalina a 37 grados centígrados.

Luego, coloque al ratón en una jaula individual en una cámara de 25 grados centígrados que contenga comida y agua en gel con monitoreo hasta la recuperación completa. La inducción de estenosis en la VCI inicia una distorsión y estancamiento del flujo sanguíneo, lo que resulta en el desarrollo de un trombo que es estructuralmente similar a los trombos venosos profundos observados en los humanos y que se visualiza fácilmente macroscópicamente. Además, se observa un elevado dímero D, producto de la degradación de la fibrina, en el plasma en este modelo de estenosis IVC, lo que indica la presencia de un proceso trombótico activo similar al observado en los seres humanos.

Aunque la mayoría de los animales de experimentación produjeron trombos en este modelo, una desventaja importante es la variabilidad en el tamaño de los trombos observada entre los animales. Una vez dominada, esta técnica se puede completar en 15 minutos si se realiza correctamente. Tras su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la trombosis venosa exploraran los mecanismos de la TVP en un modelo de ratón.