Co-inmunoprecipitación y el ensayo de Pull-Down

La coinmunoprecipitación (CoIP) y los ensayos pull-down son métodos estrechamente relacionados para identificar interacciones proteína-proteína estables. Estos métodos están relacionados con la inmunoprecipitación, un método para separar una proteína diana unida a un anticuerpo de proteínas no unidas. En CoIP, una proteína unida a un anticuerpo se une a otra proteína que no se une al anticuerpo, a lo que le sigue un proceso de separación que preserva el complejo proteína-proteína. La diferencia en los ensayos pull-down es que las proteínas de cebo marcadas por afinidad reemplazan a los anticuerpos, y la cromatografía de afinidad se utiliza para aislar complejos proteína-proteína.

Este video explica CoIP, los ensayos pull-down y su implementación en el laboratorio. Se cubre un protocolo paso a paso para cada técnica, incluidos los reactivos, aparatos e instrumentos utilizados para purificar y analizar las proteínas unidas. Además, la sección de aplicaciones de este video describe un procedimiento para estudiar cómo las proteínas del mixovirus inhiben la nucleoproteína de la influenza, una investigación sobre el papel de los iones de calcio en la calmodulina a través de un ensayo pull-down y un ensayo pull-down modificado para caracterizar las interacciones transitorias de proteínas.