Reintegro de la búsqueda de drogas en ratones utilizando el paradigma de preferencia condicionada del lugar

El objetivo general de este procedimiento es evaluar el restablecimiento del comportamiento de búsqueda de drogas en animales de laboratorio, considerando el impacto de las señales ambientales y el estrés asociados con la droga. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la adicción a las drogas, como el papel de diferentes manipulaciones ambientales que pueden modular la recaída en la búsqueda de drogas. La principal ventaja de esta técnica es que se considera que el restablecimiento de la PPC refleja la reactivación del valor motivacional incentivador de los estímulos del contexto emparejados con la droga consistente en la reaparición de la conducta de acercamiento al contexto.

Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la etología de la recaída de drogas, ya que es una forma útil y sensible de evaluar diferentes manipulaciones ambientales, que son los principales desencadenantes de la recaída humana. Los nuevos en este método tendrán dificultades porque el modelo de restablecimiento es muy sensible al cambio ambiental. Las condiciones de la habitación y el entorno deben permanecer constantes durante el procedimiento, especialmente con parejas del sexo opuesto, ruidos o condiciones de luz.

Las respuestas al fármaco y el restablecimiento inducido por el estrés se realizan mediante diferentes procedimientos que pueden afectar los resultados. Especialmente por esta razón, es importante mostrar la derrota social como un factor determinante de la reincorporación. Para empezar, manipule los ratones durante uno o dos minutos cada tres días antes de la prueba.

Prepare cajas idénticas, sala de pruebas y solución de cocaína, como se indica en el protocolo escrito. Todos los días, lleve a los ratones a la sala de pruebas en sus jaulas caseras. Deje que los ratones se sienten sin ser molestados durante 15 minutos, ya que el período de habituación a todos los ruidos y estímulos relacionados con la prueba.

Asegúrese de que las puertas de la guillotina estén retiradas de la jaula y comience a configurar la computadora. Introduzca el ID del ratón y pulse el comando de prueba e inicio. Luego, coloque el mouse en la cámara central de la caja y mantenga un ruido mínimo en la sala de pruebas.

Una vez finalizada la prueba, reúna a los ratones y guarde los datos en la computadora. Permita que cada ratón acceda a ambos compartimentos de las cajas durante 15 minutos al día, durante tres días consecutivos. Al tercer día, registre la cantidad de tiempo que cada ratón pasa en cada compartimento.

A continuación, asigne a la mitad de los ratones para que reciban el fármaco en un compartimento y a la otra mitad en el otro compartimento. Primero, pesa a los ratones para determinar la dosis adecuada de cocaína. Luego, prepare jeringas con la dosis adecuada de cocaína o solución salina.

Inyecte cada ratón a la vez por vía intraperitoneal y colóquelo suavemente en su compartimento asignado. Después de cuatro horas, inyecte la dosis de cocaína y confinar al ratón en su compartimento emparejado con drogas durante 30 minutos. Asegúrese de que las puertas de la guillotina que separan los dos compartimentos estén cerradas.

El día de la prueba de post-acondicionamiento, lleve a los animales a la sala de pruebas y permita que se habitúen durante 15 minutos. Retire las puertas de la guillotina, separando los dos compartimentos y configure el programa informático. Ingrese las identificaciones de los animales y presione el comando de inicio.

Registre la cantidad de tiempo que los ratones no tratados pasan en el compartimento de la caja durante el período de observación de 15 minutos. Cuando termine el período de observación, reúna a los ratones en sus jaulas domésticas y guarde los datos en la computadora. Cada semana, realice una sesión de extinción con todos los ratones que hayan demostrado una preferencia por el compartimento emparejado con el fármaco.

Primero, retire la puerta de la guillotina de la caja y coloque al animal en la caja durante 15 minutos. Cuando un grupo completo no muestra preferencia por el compartimento emparejado con el fármaco, se repite la prueba 24 horas después para confirmar la extinción. En el caso de la reincorporación inducida por fármacos, se debe llevar a los animales a una habitación diferente 24 horas después de que se haya confirmado la extinción.

Luego, inyéctelos con la mitad de la dosis anterior de cocaína y devuélvalos a su vivero durante 15 minutos. A continuación, lleve los ratones a la sala de pruebas y colóquelos en la caja durante 15 minutos. Registre la cantidad de tiempo que cada mouse pasa en cada compartimento y guarde los datos en la computadora.

Para evaluar los efectos de la reincorporación inducida por el estrés, lleve a los ratones a una habitación diferente 24 horas después de que se haya confirmado la extinción. A continuación, coloque un ratón experimental en una jaula de plástico con un ratón oponente agresivo durante 10 minutos. Después del encuentro antagónico, retire los ratones experimentales y llévelos a la sala de pruebas.

Finalmente retire la puerta de la guillotina y mantenga los ratones en la caja durante 15 minutos. En cuanto al estrés social, debemos confirmar que el animal ha sido realmente derrotado. Un encuentro social positivo, que no termina en derrota, muestra efectos protectores, bloqueando el restablecimiento de la preferencia de lugar por la cocaína.

Utilizando el protocolo CPP, los ratones machos de este estudio fueron sometidos a diversas manipulaciones ambientales para medir la recaída de la cocaína. El reinicio inducido por el cebado se sometió a dosis decrecientes posteriores hasta que se confirmó que la dosis de cebado era ineficaz. Como se muestra en esta figura, el cebado con 12,5, 6,25, 3,125 y 1,56 miligramos por kilogramo de cocaína tuvo un efecto significativo en la reincorporación.

Los ratones fueron sometidos a una interacción social, en la que los animales de experimentación fueron derrotados por un oponente agresivo para medir la reincorporación inducida por el estrés. Estar expuesto a un animal agresivo y ser derrotado 15 minutos antes de la prueba llevó a restablecer la preferencia previamente extinguida. Los ratones que sufrieron repetidas derrotas sociales antes del procedimiento de CPP, demostraron efectos gratificantes modificados de dosis subumbral de cocaína.

Después de la extinción de la preferencia, los ratones socialmente derrotados restablecieron su preferencia con la dosis de cebado de solo 0,5 miligramos por kilogramo de cocaína. Es importante recordar que el punto clave de la investigación sobre la adicción al crack es el desarrollo de tratamientos que disminuyan el deseo y, en consecuencia, reduzcan la vulnerabilidad a las recaídas. Se pueden realizar otros métodos, como la autoadministración intravenosa, para responder a preguntas adicionales como la compulsividad o la motivación para obtener el medicamento.

Después de este desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la adicción a las drogas exploraran la reincorporación a la búsqueda de drogas en ratones. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo inducir una recaída a través de diferentes manipulaciones del entorno, como el contexto o las señales de drogas, que restablecen la preferencia de lugar.