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DOI: 10.3791/57082-v
Joseph Ochaba1,2, Eva L. Morozko2,3, Jacqueline G. O’Rourke4, Leslie M. Thompson1,2,3
1Department of Psychiatry and Human Behavior,University of California Irvine, 2UCI MIND,University of California Irvine, 3Department of Neurobiology and Behavior,University of California Irvine, 4Board of Governors Regenerative Medicine Institute,Cedars-Sinai Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Se describe un método para fraccionamiento de huntingtina mutada insoluble y soluble especies de ratón cerebro y la célula cultura. El método descrito es útil para la caracterización y cuantificación de flujo de la proteína huntingtina y SIDA en el análisis de homeostasis de proteínas en la patogénesis de la enfermedad y en presencia de perturbaciones
El objetivo general de este procedimiento es describir una herramienta útil para la visualización, caracterización y cuantificación del flujo de proteínas huntingtina para el análisis de la homeostasis de proteínas en los sistemas modelo de la enfermedad de Huntington. Este método puede ayudarnos a comprender cuestiones en los campos de la homeostasis de las proteínas y las enfermedades neurodegenerativas, como la comprensión del impacto de ciertas intervenciones terapéuticas en la patogénesis de la enfermedad. La principal ventaja de esta técnica es que permite a los investigadores aislar y resolver especies de proteínas insolubles para su análisis cuantitativo.
Aunque este método puede proporcionar información sobre los cambios bioquímicos durante la patogénesis de la enfermedad de Huntington, también se puede aplicar a otras enfermedades que doblan mal las proteínas, como la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer. Para comenzar este procedimiento, etiquete dos juegos de tubos para cada muestra como solubles e insolubles. Prepare un tampón de lisis inmediatamente antes de la lisis de la muestra en el tubo soluble añadiendo la cantidad adecuada de inhibidores.
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