Utilizando ¹⁸F-FDG PET/CT la proyección de imagen e histología cuantitativa para medir cambios dinámicos en el metabolismo de la glucosa en modelos de ratón de cáncer de pulmón

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en los campos del metabolismo del cáncer y la terapéutica contra el cáncer. Como la identificación de nuevas terapias que puedan modular el crecimiento tumoral, así como el metabolismo tumoral. La principal ventaja de esta técnica es que podemos realizar imágenes no invasivas de los tumores de pulmón a medida que se desarrollan con el tiempo.

Esto es importante porque podemos entender mejor cómo responde el metabolismo tumoral a diversas intervenciones terapéuticas en tiempo real. La demostración de estos procedimientos estará a cargo de un científico especializado en imágenes, del Centro de Imágenes Preclínicas del Instituto Crump. Precaución: utilice equipo de protección y siga todos los procedimientos reglamentarios aplicables cuando manipule radiactividad.

Comience calentando la jaula de los ratones que se van a visualizar a 37 grados centígrados durante la hora anterior a la inyección de fluorodesoxiglucosa marcada con flúor 18. Esto reduce el consumo de grasa parda del trazador. Pesa el primer ratón y registra su peso.

Después de anestesiar al ratón con un método aprobado institucionalmente, pruebe la profundidad de la anestesia pellizcando el dedo del pie. Si no se observa ninguna respuesta, continúe el procedimiento aplicando ungüento oftálmico en los ojos para evitar cualquier sequedad durante la anestesia. Diluya cuidadosamente el flúor 18 marcado con fluorodesoxiglucosa, que tiene una vida media radiactiva de 109 minutos, en solución salina estéril a una concentración de inyección corregida por caries ajustada de 70 a 75 microcurie por 100 microlitros.

A continuación, extraiga 100 microlitros en una jeringa de insulina con una aguja de calibre 28 y mida la dosis de radiactividad con un calibrador de dosis. Registre la medición y el tiempo de medición para determinar la corrección de decaimiento. Coloque la jeringa en un soporte de jeringa de plomo.

Para inyectar, primero caliente la cola durante 1 a 2 minutos con una gasa empapada en agua tibia. Y luego limpie con isopropanol al 70% para dilatar la vena de la cola justo antes de la inyección. Administre todo el volumen de la jeringa con una inyección en bolo a través de la vena lateral de la cola.

Y registre la hora de la inyección. A continuación, mida la dosis restante en la jeringa con el calibrador de dosis y registre la medición y el tiempo. Por último, coloque el ratón inyectado en una cámara de anestesia con 1,5 a 2% de isoflurano a 37 grados centígrados para permitir que la sonda se distribuya a través de la circulación sistémica del ratón durante una hora antes de la tomografía por emisión de positrones.

Después de 1 hora, coloque el primer ratón en una cámara de imágenes a 37 grados centígrados bajo anestesia con isoflurano en el cono de la nariz. Y asegure sus extremidades en su lugar con cinta médica en posición supina. Coloque la cámara de imágenes en el escáner PET CT y adquiera las exploraciones PET y CT como se describe en el manual del escáner PET CT.

Una vez completada la PET, retire el ratón de la cámara de imágenes y permita que se recupere en su jaula. Importe las imágenes PET CT reconstruidas en el software AMOD haciendo clic en Archivo y, a continuación, en Importar archivo. Y seleccionando el archivo DICOM apropiado.

Haga clic con el botón derecho en el conjunto de datos PET. Y ubique el campo de porcentaje de dosis inyectada por gramo en la pestaña de información básica. Ingrese el porcentaje de dosis inyectada por gramo informado anteriormente.

Dibuje las regiones de interés en el tumor y los tejidos normales haciendo clic en Editar y luego en Agregar ROI. Seleccione la forma para el ROI y asígnele un nombre. Dibuje los ROI sobre los tumores y los tejidos, y ajuste sus dimensiones para cubrir el tejido de interés en los tres ejes.

La PET marcada con flúor 18 con fluorodesoxiglucosa se realizó en ratones portadores de tumores con comutaciones KRAS y LKB1 denominados ratones KL. Los tumores de estos ratones eran altamente glucolíticos. Como lo demuestra un elevado consumo de F-FDG.

En línea con estudios publicados anteriormente. Una resección de pulmones completos reveló la presencia de varios tumores, que se muestran aquí en vistas transversales, sagitales y coronales. Los cinco lóbulos del pulmón del ratón se tiñeron con H&E para visualizar la morfología del tejido.

Los lóbulos 1-5 se tiñeron para el transportador de glucosa 1. La expresión y localización de Glut1 en la membrana plasmática de las células tumorales se correlaciona directamente con el valor estándar de absorción de flúor 18 marcado con fluorodesoxiglucosa. Al realizar este procedimiento, es importante recordar que la biodistribución de FDG depende de las condiciones de manejo del animal.

Como la anestesia, el calentamiento y el ayuno. Para garantizar la reproducibilidad, estos pasos deben realizarse de forma coherente. Siguiendo este procedimiento general, se pueden utilizar otras trazas de PET para medir diversos procesos biológicos in vivo, como el metabolismo de los aminoácidos y las interacciones receptor-ligando.