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DOI: 10.3791/57309-v
Salma H. Azam1, Mitchell Smith2, Vivek Somasundaram2, Chad V. Pecot2,3
1Curriculum in Genetics and Molecular Biology,University of North Carolina at Chapel Hill, 2Lineberger Comprehensive Cancer Center,University of North Carolina at Chapel Hill, 3Department of Medicine,University of North Carolina at Chapel Hill
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Presenta protocolo una novela en vitro la tira de ensayo más modelos adecuadamente el proceso de en vivo brotación angiogénesis mediante la incorporación de pericitos. Esta modificación permite el ensayo de grano más fielmente recapitular las interacciones celulares heterotípicos entre las células endoteliales y las células murales que son críticas para la angiogénesis.
El objetivo general de este ensayo es incorporar interacciones celulares heterotípicas in vitro que encapsulen la complejidad de la angiogénesis in vivo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología vascular sobre la importancia de las interacciones de las células endoteliales de los pericitos durante la angiogénesis. La principal ventaja de esta técnica es que integra las diferentes etapas de la angiogénesis germinal, incluyendo la proliferación, la migración y la anastomosis, permitiendo el estudio de las interacciones de los pericitos de las células endoteliales.
Comience reconstituyendo las perlas microportadoras a una concentración de seis veces 10 a la cuarta perlas por mililitro en PBS, seguido de la esterilización en autoclave de la suspensión de perlas microportadoras. A continuación, alícuota un mililitro de medio completo en el número apropiado de tubos de clasificación de células activadas por fluorescencia de fondo redondo, o FACS, y agregue 20 microlitros de suspensión de perlas de microportadores esterilizadas en autoclave y enfriada a temperatura ambiente a cada tubo. Agregue un mililitro de células a cada tubo.
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