Pruebas para responder metacognitivas usando un olor basado en diferido partido-a-Sample Test en ratas

Este protocolo describe un método para investigar la posibilidad de metamemory o conciencia de la memoria, en los roedores. El paradigma de retraso-emparejar-a-muestra olor es una novela, ecológicamente relevantes comportamiento prueba útil para determinar la medida en que los roedores adaptativa pueden responder basado sobre el control cognitivo de la fuerza de sus Estados de memoria.

El objetivo general de este experimento es determinar hasta qué punto los roedores responden metacognitivamente presentando a los sujetos pruebas de memoria que pueden ser rechazadas. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la psicología comparada, como determinar hasta qué punto las ratas controlan la memoria. La principal ventaja de esta técnica es que es relativamente fácil de aprender para las ratas, ya que aprovecha el comportamiento natural de búsqueda de alimento de la rata y su sentido primario del olfato.

Esta técnica fue cuidadosamente creada para que los resultados de las pruebas de comportamiento sean válidos y confiables. Por ejemplo, equilibramos el intervalo entre ensayos con el tamaño establecido del que se extrajeron los olores de la muestra para que haya una interferencia de memoria óptima. Tuvimos la idea de este método a partir de paradigmas similares que utilizan estímulos visuales en monos junto con experimentos no relacionados en los que se presentan a las ratas olores para recordar cavando en tazas llenas de arena.

El protocolo de texto describe el montaje del aparato de prueba, la habituación de las ratas al aparato de prueba y la excavación en tazas de arena para obtener recompensas de comida. Una vez que se establece una preferencia alimentaria significativa, la rata puede proceder al entrenamiento de emparejamiento con la muestra. Para esta prueba, ya se deben preparar cuatro tazas diferentes de arena perfumada y no tener más de una semana de antigüedad.

Guarde la arena perfumada en recipientes de vidrio herméticamente cerrados. Cada sesión de prueba de coincidencia con muestra consta de seis ensayos con intervalos de cuatro minutos entre ensayos. Para que un animal apruebe este entrenamiento, la rata debe identificar correctamente la recompensa oculta en al menos tres ensayos durante dos sesiones de prueba consecutivas.

Para configurar la prueba de coincidencia con muestra, vierta media taza de cada arena perfumada en cuatro tazas. Luego, siguiendo la posición asignada aleatoriamente por el software, coloque las tazas equidistantes de la puerta de entrada en el área de tareas del aparato. A continuación, entierra una pieza completa de recompensa en la taza perfumada correcta elegida al azar.

Eso sí, no uses la misma taza más de dos veces seguidas. Además, entierre media pieza de recompensa en una taza de muestra con el mismo aroma. Entierra las recompensas al menos hasta la mitad del fondo del vaso de arena.

Comience la prueba presentando la muestra de olor a la rata. Coloque la rata en la cámara de muestras, pase la cámara de retardo intermedia. A continuación, baje la copa que contiene la mitad de la recompensa en la cámara con una espátula doblada.

Tan pronto como la rata comience a comer la recompensa, retira la taza. Una vez que la rata haya terminado de comer la recompensa, levante el separador de espacio de cartón a la cámara de retardo y el divisor al área de tareas de MTS. Tan pronto como la rata haga una elección y recupere una recompensa si está presente, retire la rata de la cámara y colóquela en la jaula de transferencia.

La rata puede y probablemente olfateará cada taza, pero solo permita que la rata excave en una taza. Si elige incorrectamente, retírelo rápidamente para evitar opciones alternativas de taza. Una vez en la jaula de transferencia, inicie una ITI de cuatro minutos y, para cegar a la rata para que no vea la siguiente configuración de prueba, proteja la jaula.

Durante el período de descanso, aspire la arena que pueda haberse derramado, limpie la cámara con alcohol isopropílico al 70%, elimine las recompensas no consumidas y reponga las tazas de arena según sea necesario. A continuación, prepare el siguiente vaso de muestra pseudo seleccionado al azar con la mitad de la recompensa. Configure el área de tareas y realice la siguiente prueba.

Cuando termine la sesión, regrese la rata a su jaula de origen y comience a probar la siguiente rata. Después de pasar la tarea MTS, avance a la prueba de coincidencia retrasada con la muestra o DMTS para establecer un criterio de retraso. Esta tarea es como el MTS, pero esencialmente agrega un intervalo de retención entre darle a la rata la muestra y dejar que la rata ejecute la prueba.

Cuando las ratas tienen una tasa de éxito entre el 40 y el 70%, el intervalo de demora es suficiente para que las ratas avancen a la prueba forzada versus la prueba de elección. Antes de comenzar las pruebas forzadas frente a la elección, primero realice dos pruebas en las que la rata solo encuentre la taza de rechazo en la sala de tareas. La copa declinada está cargada de arena de un color y textura diferentes.

Está cargado con una recompensa del tamaño de una cuarta parte. Los rastros forzados frente a los de elección son como las pruebas DMTS, pero en ocho de las 12 pruebas, la copa de declinación se ofrece en el lado opuesto de la cámara de las cuatro copas MTS. Realice 10 sesiones forzadas versus sesiones de elección por rata.

Durante cada prueba, cuando la rata ingrese a la cámara de retardo, observe si la rata inicialmente gira a la izquierda hacia la copa de declinación o a la derecha para realizar la prueba MTS. Esta es la elección de la metamemoria de perspectiva. Después de dos sesiones, calcule la precisión de la rata en las pruebas forzadas.

Si la precisión de la rata aumenta por encima del 70% o cae por debajo del 40%, entonces cese la prueba forzada frente a la prueba de elección y vuelva a la prueba DMTS. Una vez que la precisión de la rata vuelva a estar entre el 40 y el 70% en dos sesiones consecutivas de DMTS, vuelva a las sesiones de rastro forzadas frente a las de elección. Además, determine si después de dos sesiones la opción de rechazo se acerca a cero o 100%En este caso, detenga la prueba y considere cambiar el tamaño de la recompensa en la copa de rechazo.

El objetivo es una tasa de disminución de la elección entre el 10 y el 40%A lo largo de la prueba forzada frente a la de elección, asegúrese de que las preferencias de la rata sigan siendo las mismas realizando comprobaciones de preferencias una vez a la semana, tal y como se describe en el protocolo de texto. Asegúrese siempre de que la cámara de prueba se limpie con isopropanol después de cada prueba. Dependiendo de su criterio de retraso, puede ser posible realizar pruebas con dos o tres ratas al mismo tiempo, lo que hará que la limpieza a fondo sea especialmente crítica.

Con el fin de estudiar la respuesta metacognitiva del sujeto, se compara la proporción de ensayos forzados correctos con la proporción de ensayos elegidos correctos o ensayos en los que hay una opción de declinación presente. Un resultado positivo se indica por una precisión significativamente mayor en los ensayos seleccionados en comparación con los ensayos forzados. Si el rendimiento no es significativamente más preciso en los ensayos elegidos que en los ensayos forzados, los resultados son nulos.

Esta hipotética falta de evidencia de metamemoria en ratas se indica por el hecho de que no se utilizó la opción de la prueba de declinación cuando habría sido adaptativo hacerlo en ensayos durante los cuales se olvidó la muestra. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo evaluar la respuesta metacognitiva de las ratas utilizando una prueba de coincidencia diferida con muestra con arena perfumada. Una vez dominada, una rata puede ser probada en una sesión de coincidencia con la muestra en aproximadamente 45 minutos, dependiendo del retraso de la rata si se realiza correctamente.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar que las ratas deben estar habituadas al aparato, tener una fuerte preferencia por las recompensas y un intervalo de retención seleccionado y monitoreado individualmente.