Un rápido y fácil tubería para generar genómica punto mutantes de C. elegans utilizando CRISPR/Cas9 ribonucleoproteínas

El objetivo general de este procedimiento es generar mutaciones genómicas puntuales en C. Elegans utilizando plantillas de reparación dirigida por homología de oligonucleótidos monocatenarios y ribonucleoproteínas CRISPR/Cas9. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la neurociencia, como la determinación de las consecuencias patológicas de la varianza genética asociada con las enfermedades neurodegenerativas. La principal ventaja de esta técnica es que las mutaciones genómicas puntuales pueden generarse rápidamente, lo que permite el estudio funcional de la varianza genética en el contexto del control regulador endógeno, evitando al mismo tiempo las advertencias de la sobreexpresión de proteínas.

Para llevar a cabo la selección de dianas de sgRNA, abra la página web que se muestra aquí. Ingrese aproximadamente 60 pares de bases de secuencia que flanquean la edición deseada de interés. Después de seleccionar el genoma de C.Elegans y el motivo adyacente del protoespaciador de acuerdo con el protocolo de texto, haga clic en enviar.