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DOI: 10.3791/57525-v
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Este protocolo describe un método nuevo para la entrega del virus a la próstata murina. Usando tecnología CRISPR/Cas9, sobreexpresión del gen o entrega del recombinase de Cre, la técnica permite orthotopic alteración de la expresión génica e implementa un modelo novedoso ratón para cáncer de próstata.
El objetivo general de este procedimiento quirúrgico es alterar la expresión génica en la próstata murina mediante la administración viral de guías CRISPR Cas9 para la inducción del cáncer de próstata. Este método puede ayudar a abordar nuevas preguntas en la biología del cáncer de próstata en lo que respecta al análisis y la validación de nuevos genes en un entorno in vivo. Las principales ventajas de esta técnica es que permite la edición genética rápida de múltiples genes al dirigirse solo a un subconjunto de las células prostáticas, como se ve en el escenario humano.
Alguien que es nuevo en el procedimiento puede tener dificultades al principio debido al tamaño del órgano y la precisión que se necesita para una finalización quirúrgica exitosa. Para preparar un volumen total de 5 mililitros de anestésico, mezcle 0,15 mililitros de un mg por mililitro de clorhidrato de medetomidina, 0,4 mililitros de 5 mg por mililitro de midazolam y 0,25 mililitros de 10 mg por mililitro de butorfenol. A continuación, añade 4,2 mililitros de agua salina estéril.
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