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DOI: 10.3791/57526-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a low-cost and effective technique for generating electroporated brain organotypic slice cultures from mouse embryos, enabling visualization of genetically modified cortical GABAergic interneurons during their tangential migration. The method aims to investigate the effects of specific gene mutations on brain development, offering potential insights into neurodevelopmental disorders.
Aquí, nos proporcionan un método confiable y de bajo costo para generar culturas de electroporated cerebro organotypic rebanada de embriones de ratón adecuados para microscopía confocal y técnicas de imagen en vivo.
El objetivo general de este experimento es visualizar interneuronas GABAérgicas corticales modificadas genéticamente durante la migración tangencial en el entorno más naturalista posible. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en las neurociencias del desarrollo al detectar el impacto de la pérdida de función de genes específicos de proteínas durante el desarrollo del cerebro. La principal ventaja de esta técnica es que es de bajo coste y relativamente fácil de realizar en comparación con otros métodos similares como la electroporación intrauterina.
Por lo tanto, esta técnica puede, en última instancia, mejorar el diagnóstico de los pacientes con trastornos genéticos del neurodesarrollo, como el autismo y la epilepsia, al aclarar la patogenicidad de las mutaciones específicas identificadas en los pacientes, así como el papel de los nuevos genes de la enfermedad durante el desarrollo del cerebro. Comience por configurar el gabinete de bioseguridad con todos los instrumentos necesarios para la disección y el cultivo. Rocíe generosamente todos los instrumentos de la cabina de bioseguridad con etanol al 70% y esterilice los instrumentos y el interior del armario con luz ultravioleta durante 15 a 20 minutos.
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