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DOI: 10.3791/57584-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines whole-cell electrochemical experiments to investigate proton transport's role in extracellular electron transport (EET) in Shewanella oneidensis MR-1. The study employs the deuterium kinetic isotope effect to assess the impact of proton transport on EET kinetics.
Aquí presentamos un protocolo de los experimentos electroquímicos celulares para estudiar la contribución del transporte de protones a la velocidad de transporte de electrones extracelular a través de los citocromos de la membrana externa de Shewanella oneidensis MR-1.
El objetivo general de este protocolo es observar la contribución del transporte de protones a la tasa de transporte de electrones extracelulares bacterianos mediante la detección del efecto del isótopo cinético de deuterio. Nuestro método revela el impacto del transporte de protones en la cinética del transporte de electrones extracelulares o EET de las bacterias a un electrodo a través de citocromos de tipo c de membrana externa. Nuestro ensayo refleja el manejo de protones nativos en EET porque utilizamos bacterias vivas en lugar de enzimas purificadas.
Sin embargo, nuestro reto consistía en eliminar los ruidos de otros procesos celulares. El efecto del isótopo cinético de deuterio, denominado KIE, es una de las mejores técnicas para examinar la contribución del transporte de protones en el proceso de transporte de electrones asociado. Para cultivar células Shewanella MR-1, transfiera una colonia de células cultivadas en una placa de agar a 15 mililitros de medio LB.
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