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DOI: 10.3791/57600-v
Zemfira N. Karamysheva2, Elena B. Tikhonova1, Petar N. Grozdanov1, James C. Huffman2,3, Kristen R. Baca1,3, Alexander Karamyshev1, R. Brian Denison1, Clinton C. MacDonald1, Kai Zhang2, Andrey L. Karamyshev1
1Department of Cell Biology and Biochemistry,Texas Tech University Health Sciences Center, 2Department of Biological Sciences,Texas Tech University, 3CISER (Center for the Integration of STEM Education & Research),Texas Tech University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
The polysome profiling technique is designed to analyze the engagement of individual mRNAs with polysomes during protein synthesis. This method is crucial for understanding the regulation of protein synthesis, translation activation, and repression in various biological contexts.
El objetivo general de la técnica de generación de perfiles polysome es análisis de actividad traslacional de mRNAs individuales o transcriptoma mRNAs durante la síntesis de proteínas. El método es importante para los estudios de regulación de la síntesis de proteínas, activación de la traducción y represión en salud y múltiples enfermedades humanas.
El objetivo general de esta técnica es estudiar la participación de los ARNm individuales con los polisomas durante la traducción. El perfil de polisomas es una tecnología poderosa para estudiar la participación del ARNm con ribosomas y polisomas. La técnica es importante para los estudios de la regulación de la síntesis de proteínas, la activación de la traducción y la represión.
Aquí nuestro equipo presenta las técnicas para el fraccionamiento polisomal y el análisis de fracciones en el ejemplo de tres organismos. Parásito Leishmania major, células humanas cultivadas y un tejido animal. Este enfoque consta de cuatro pasos principales, preparación del lisado, preparación del gradiente de sacarosa y ultracentrifugación, fraccionamiento de polisomas y recolección de muestras.
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