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Optimized Scratch Assay for In Vitro Testing of Cell Migration with an Automated Optical Camera

Optimizado el ensayo de rayado para In Vitro pruebas de migración de la célula con una cámara óptica automatizada

Full Text
25,117 Views
05:27 min
August 8, 2018

DOI: 10.3791/57691-v

Michelle Vang Mouritzen1, Håvard Jenssen1

1Department of Science and Environment,Roskilde University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí describimos un procedimiento para probar la migración la célula en vitro con un microscopio de cámara óptica automatizada. El ensayo de rayado ha sido ampliamente utilizado donde el cierre de la raya es seguido por un período determinado. El microscopio óptico permite la detección confiable y barata de migración de la célula.

La principal ventaja de esta técnica es que se pueden observar las células en tiempo real en el microscopio óptico automático. Las implicaciones de este tratamiento se extienden a una terapia de heridas crónicas o cáncer donde la migración juega un papel crucial en estas enfermedades. Comience lavando un cultivo confluente de células HaCaT dos veces con cinco mililitros de PBS estéril libre de magnesio y calcio por lavado.

A continuación, incube las células con un mililitro de tripsina en una incubadora a 37 grados centígrados durante cinco a ocho minutos. Después de confirmar el desprendimiento bajo un microscopio óptico, detenga la reacción enzimática con nueve mililitros de medio de cultivo suplementado con FBS. Y diluir las células a una concentración de 7,5 veces 10 a la cuarta célula por cada 250 microlitros de medio más concentración de FBS.

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