Cultivo de tejido ovárico para visualizar fenómenos en ovario de ratón

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación de los ovarios sobre el desarrollo de los folículos, la atresia de los folículos y su funcionamiento. La principal ventaja de esta técnica es que podemos reproducir los fenómenos ováricos en condiciones de cultivo controladas para la observación en tiempo real. Para preparar los ovarios de un ratón del Instituto de Investigación del Cáncer de cuatro semanas de edad para el cultivo: Use tijeras y pinzas para recortar el tejido circundante de los ovarios bajo un microscopio estereoscópico y coloque los ovarios limpios en un plato de medio de cultivo fresco.

Cuando se hayan recortado todos los ovarios, transfiera los ovarios individuales a un pedazo de papel de filtro humedecido con PBS a 37 grados centígrados y use una cuchilla de micrótomo para cortar cada ovario en cuatro piezas. Transfiera las rodajas a un plato de 3,5 centímetros con un medio de cultivo a 37 grados centígrados y utilice una micropipeta para añadir una gota de aproximadamente 0,5 micrómetros de medio de cultivo en un inserto de cultivo celular por sección de tejido ovárico. En una segunda placa de cultivo celular con fondo de vidrio de 3,5 centímetros que contenga un milímetro de medio:Con pinzas, transfiera una muestra de tejido en cada gota y coloque la placa en una incubadora de cultivo celular.