Alta resolución comparación de frecuencias de la conjugación bacteriana

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la microbiología sobre la frecuencia con la que el ADN plásmido puede propagarse entre diferentes bacterias. La principal ventaja de esta técnica es que al reducir el fondo, podemos detectar pequeñas diferencias en la frecuencia de conjugación con una alta resolución. Demostrando el procedimiento estará Kosuke Yanagiya, un estudiante graduado de mi laboratorio.

Para calcular la frecuencia de conjugación por el número más probable, mate de filtro un mililitro de un cultivo de donante nocturno con un mililitro de un cultivo receptor nocturno durante 45 minutos a 30 grados centígrados, como acaba de demostrar. Mientras el cocultivo está incubando, diluir en serie los cultivos originales de donante y receptor para el enchapado en triplicado en el caldo de Luria donante, o LB, además de kanamicina, o LB receptor más placas de gentamicina para un cultivo de dos días a 30 grados Celsius. Al final de la incubación, resuspender el cultivo en el filtro en LB estéril que contiene kanamicina y gentamicina para dilución en serie en una placa de cultivo celular de 96 pocillos en cuadrruplicado.