Automatizado, ensayo conductual a largo plazo para las funciones cognitivas en múltiples modelos genéticos de la enfermedad de Alzheimer, utilizando IntelliCage

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la neurociencia, como modelos animales de déficits cognitivos o enfermedades psiquiátricas. La principal ventaja de esta técnica es que se pueden obtener datos altamente reproducibles de una variedad de tareas cognitivas con menos mano de obra. Por lo general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades porque el sistema necesita muchos pasos para el trabajo preciso.

El software de diseño es donde se produce el archivo experimental que contiene las definiciones experimentales clave. Los archivos experimentales se utilizan para ejecutar pruebas específicas, como la preferencia de precio, donde solo no se puede acceder a una de las cuatro esquinas dentro de un período de tiempo específico. Comienza por crear la lista de animales.

Defina las condiciones y establezca los parámetros para el número de ratones sujetos, el número de líneas genéticas, el sexo de los animales y el número de jaulas que se utilizarán. A continuación, seleccione el tipo de transpondedor adecuado, DataMars o Trovan en la barra de herramientas central. A continuación, en el panel Grupos, agregue o elimine los grupos experimentales presionando el botón verde más o la cruz roja en la ventana Grupos respectivamente.

Utilice la función Cluster para operar subgrupos por igual definiendo esquinas y lados correctos, incorrectos y neutros. A continuación, las variables del sitio, como Nombre, Etiqueta, Sexo, Grupo y Clúster. Guarde y pegue la lista de animales seleccionando Exportar animales.

E Importar animales en la barra de menú Archivo para replicar las listas de animales para otro experimento. A continuación, configure todos los sistemas utilizando sus números de identificación correspondientes en la pestaña Configuración. Corresponda el número de direcciones de la sección del diseñador al número real de direcciones.

A continuación, compile los protocolos experimentales en la pestaña Intellicage, mediante las siguientes pestañas Módulo y Opción. Diseñe las Estructuras Experimentales en el espacio del módulo haciendo clic en la pestaña Módulo. Para agregar nuevos módulos, presione el botón Agregar, arrastre las unidades que se muestran en la parte de unidades al espacio del módulo.

Para crear un modelo de adaptación de Nosepoke, arrastre la unidad de puerta de la sección Tarea, las unidades de puerta y temporizador de la sección Utils, y las unidades de visita y Nosepoke de la sección Eventos al espacio del módulo. Vincule Cualquiera en línea de la unidad Nosepoke a In en la unidad Gate. Enlace de salida a cierre en la unidad de puerta.

Enlace hacia afuera en la puerta para abrir en la unidad de puerta. Enlace de salida en la puerta para activar en la unidad de temporizador. Enlace de salida en la unidad de temporizador para cerrar en la unidad de puerta.

Establezca Período en 5.000 milisegundos, en la sección Temporizador. Defina el estado inicial de las puertas y jaulas en la pestaña Opciones. Especifique todas las puertas que se cerrarán en la sesión sin bebida como el estado inicial típico para las tareas PP o PPR.

A continuación, establezca los horarios en la pestaña Opciones con correspondencia con el enlace de la sección Módulos. Después de definir los parámetros, guarde el archivo experimental haciendo clic en el botón Guardar como. Por último, cargue el archivo experimental, presione el botón Inicio del controlador y monitoree y visualice el estado actual del sistema y los ratones.

Para implantar los transpondedores de identificación por radiofrecuencia, comience pellizcando y levantando la piel alrededor de la parte posterior de la escápula para crear un bolsillo. A continuación, rocíe el lugar de la inyección con etanol al 70% para minimizar la introducción de vello en el espacio subcutáneo. Luego, inserte la aguja de inyección en la piel paralela a la columna vertebral.

Expulse el microchip por vía subcutánea y apriete el microchip a través de la piel para mantenerlo en el espacio interescapular. Retire la aguja lentamente y continúe pellizcando el área durante unos segundos para proporcionar homeostasis. Finalmente, regrese el ratón a la jaula de inicio una vez que se haya vuelto completamente ambulatorio.

Los sujetos utilizados aquí fueron múltiples modelos de EA, incluidos NLF, Mild Model y NLGF Severer Model, y dos grupos de control. Los resultados indicaron que el rendimiento de la inversión de la preferencia de los modelos de EA en el lugar se vio ligeramente afectado en los adultos jóvenes. Sin embargo, el rendimiento en los sujetos de mayor edad se vio afectado de forma significativa y progresiva.

En cuanto a la función ejecutiva, el modelo Severer AD careció de precisión en las últimas etapas de la prueba de tiempo de reacción en serie. Se observó compulsividad facilitada en adultos jóvenes y sujetos ancianos de los ratones NLGF. Curiosamente, aunque hubo un aumento en la compulsividad de los ratones NLF que eran adultos jóvenes, en la vejez, se volvió comparable a la de los ratones de tipo salvaje.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar que debe continuar revisando el sistema a diario, prestando especial atención a la condición de los animales que soportan dentro de las jaulas. Durante este procedimiento de la droga similar al metal se puede realizar un tratamiento con el fin de responder preguntas adicionales como preguntar las estrategias terapéuticas. Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en los campos de la neurociencia exploraran el fenotipado conductual, o variacional en modelos biosintéticos.