Name: Aparato para la recolección de tejido Microcolumns (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-25T13:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Aprende a recolectar piel de espesor completo con mínima morbilidad en el sitio donante usando agujas especializadas. Este método facilita la obtención de tejido autólogo para investigación en regeneración dérmica.

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Este trabajo fue apoyado en parte por el ejército, la Marina, NIH, fuerza aérea, VA y asuntos de salud para apoyar el esfuerzo de afirmar II, bajo el no. de concesión W81XWH-13-2-0054. Los Estados Unidos Ejército investigación adquisición de actividad médica, 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 es la oficina de adquisición adjudicación y administradora. Opiniones, interpretaciones, conclusiones y recomendaciones son las del autor y no necesariamente son endosadas por el Departamento de defensa.

Todo el trabajo con animales vivos y muestras de tejidos animales han sido aprobadas por el Massachusetts General Hospital institucional Animal Care y el Comité uso (IACUC).
1. producción de la cosecha de agujas
<ol><li>Configuración de la etapa de producción<ol>
<li>Asegure un conector luer hembra de cerradura en un poste y montar el post a un escenario de rotación para que la cerradura de luer está en el centro de la etapa (figura 1A).</li>
		<li>Esta primera etapa de la rotación de la posición vertical, montar y perpendicular a un escenario de segunda rotación horizontal (figura 1B).</li>
		<li>Montar la etapa horizontal de la rotación en una etapa de la traducción de dos ejes (figura 1B).</li>
		<li>Fije la combinación sobre una superficie estable, como una placa óptica.</li>
		<li>Por separado montar una herramienta giratoria sobre la misma placa, con la herramienta colocada en paralelo con la placa y en aproximadamente la misma altura que el conector de cierre luer en la etapa de combinación de rotación y traducción (figura 1C).</li>
		<li>Instalar dos discos de corte concéntrico en la herramienta rotatoria (un grano más pequeño, más bajo corte disco de diamante sobre un disco de piedra abrasivo de grano más grande, más alto) (figura 1D). Nota: Sobre una 9 mm es suficiente diferencia entre los diámetros de las dos ruedas.</li>
		<li>Posición de una luz cenital de la fuente con un brazo ajustable sobre la herramienta rotatoria, con la luz a las ruedas de corte.</li>
		<li>Para mejorar la visualización, coloque un microscopio de disección sobre la instalación de producción de modo que el ocular se enfoca en los discos de corte (figura 1C). Nota: Como alternativa, los usuarios pueden usar gafas de aumento.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Remodelación de la punta de la aguja<ol>
<li>Use gafas protectoras y una mascarilla quirúrgica para evitar que partículas metálicas en los ojos o vías respiratorias.</li>
		<li>Elegir el calibre de agujas hipodérmicas de la adecuada tamaño, basado en requisitos experimentales.</li>
		<li>Marque la longitud deseada en cada cosecha la aguja. Nota: Para la recolección de piel porcina, agujas de 8 mm son normalmente suficientes; Aunque la longitud puede variar en función de necesidades experimentales (e.g., espesor del tejido de la piel blanco, tamaño de calibre de la aguja). Generalmente, una aguja de calibre 19 funciona bien para la piel porcina.</li>
		<li>Baje la aguja perpendicular a la herramienta giratoria con el poder, utilizando el borde del disco de corte exterior que corte la longitud excesiva de la aguja, en el punto marcado en paso 1.2.3.</li>
		<li>Conecte la aguja acortada, Roma para el conector de cierre luer hembra en la etapa de producción.</li>
		<li>Ajustar la fase horizontal de la rotación para que la aguja esté en un ángulo de 12° paralelo a los discos de corte en la herramienta rotatoria (cambiando el ángulo de impacto la fuerza requerida para la inserción de la aguja).</li>
		<li>Encienda la luz cenital y ajustar su posición observando la aguja bajo aumento, hasta que la luz se refleja fuera de la línea media (longitudinal) de la aguja.</li>
		<li>Encienda la herramienta giratoria, después utiliza la etapa de la traducción para avanzar la aguja hacia el interior (diamante) corte disco (figura 2A).</li>
		<li>Mantener avanzando la aguja lentamente contra el disco de corte hasta que el disco alcanza aproximadamente la línea media de la aguja (según lo visualizado por la reflexión de la luz de arriba a lo largo de la línea media).</li>
		<li>Mueva lentamente la superficie de corte de la aguja desde el interior de la muela sobre la rueda exterior de piedra para terminar la superficie de corte de la aguja con un pulimento más fino (figura 2B).</li>
		<li>Retire la aguja del disco de corte.</li>
		<li>Con la etapa de rotación vertical, gire la aguja 180°.</li>
		<li>Repita los pasos 1.2.9-1.2.10 para cambiar la forma al otro lado de la aguja. Nota: La aguja debe tener ahora dos puntas de corte de aproximadamente igual longitud (figura 2 y 2D).</li>
		<li>Retire la aguja de la fase de producción.</li>
		<li>Limpiar el interior del alesaje con un alambre de metal es ligeramente más pequeño que el diámetro interno de la aguja.</li>
		<li>Usando un palo de madera afilado (e.g., partiendo del final del palo de madera pequeño en un aplicador de punta de algodón), elimine las rebabas que pueden estar todavía adheridas a los bordes de la aguja recién formado. Nota: Las agujas puede ser electropulido y esterilizado por autoclave si fuera necesario.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. tejidos de la piel
<ol><li>Utilice las agujas cosecha para recoger la piel microcolumns de tejido ex vivo o animales vivos.</li>
	<li>Para ex vivo piel tejido fino (especialmente de las muestras donde la grasa subcutánea está faltando o fue recortada a), sostenga el tejido de la blanco sobre la abertura de un tubo de centrífuga de 50 mL, o apilar dos piezas de tejido uno encima del otro, para evitar dañar el n eedle consejos por golpes contra superficies duras. Nota: Para la cosecha en vivo de animales vivos, se recomienda que la epinefrina y lidocaína local administrado por inyección intradérmica para la analgesia y reducir el sangrado.</li>
	<li>Montar el aparato de recolección según la cantidad de microcolumns necesarios, como se describe a continuación.</li>
	<li>Opción de volumen bajo-medio:<ol>
<li>Para cosechar pequeñas a medianas cantidades de microcolumns, simplemente llenar una jeringa estándar (10-20 mL jeringas generalmente funcionan bien) con solución salina normal y conéctela a la aguja de recolección.</li>
		<li>Completamente Inserte la aguja de recolección en la piel del donante, luego lo retraiga.</li>
		<li>Empuje el émbolo de la jeringa descarga la solución salina a través de la aguja de recolección y expulsar la microcolumna que está alojado en el agujero de la aguja.</li>
		<li>Para acelerar el proceso de cosechando, repita el paso 2.4.2 3 a 5 veces antes de expulsar el microcolumns paso 2.4.3. Nota: Normalmente es conveniente expulsar el microcolumns en un colador de célula estándar para facilitar la posterior colección de microcolumns.</li>
		<li>Si las agujas se atascan, aumentar la presión sobre el émbolo para expulsar el tejido pegado y eliminar la obstrucción. Si simplemente aumentando la presión es insuficiente, alesaje de insertar un alambre de metal a través de la abertura de la punta de aguja para limpiar la obstrucción de la aguja.</li>
		<li>No microcolumns sumergidos en solución salina o medio hasta su uso para evitar la desecación. Nota: Con un operador experimentado, puede utilizarse el método descrito anteriormente para la cosecha microcolumns a un ritmo de aproximadamente 1 microcolumna por segundo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Opción de alto volumen:<ol>
<li>Crear un simple dispositivo de succión-asistida que puede ser construido para facilitar la recolección de grandes cantidades de microcolumns. Nota: El dispositivo consiste en una recolección aguja, jeringa de 20 mL con boquilla de cierre luer, adaptador aspiración típicamente utilizado para la liposucción (figura 3A) y frasco de aspiración estéril.</li>
		<li>Retire el émbolo de la jeringa de 20 mL.</li>
		<li>Conectar la jeringa a un adaptador de succión.</li>
		<li>Completar el montaje colocando una cosecha aguja a la jeringa (figura 3B).</li>
		<li>Utilice un trozo de tubo de aspiración estéril para conectar el adaptador de succión a un recipiente estéril de aspiración. Asegúrese de que el aparato de recolección es conectado a la entrada de cilindro que permite el líquido en el recipiente sin trabas (que puede requerir conexión a un puerto del cartucho que está marcado para la salida en lugar de afluencia).</li>
		<li>Conecte el aparato a una fuente de presión negativa. Nota: La presión necesaria depende de diámetro de la aguja y longitud, como se describió previamente8. Para el aparato descrito en este manuscrito, el sistema de aspiración en cuartos de funcionamiento típico es generalmente suficiente.</li>
		<li>Conecte una cosecha aguja a la jeringa.</li>
		<li>Cosecha el microcolumns insertando la recolección de la aguja en la piel. Nota: El microcolumns estará dibujado en la jeringa de succión, luego lavar en el tambor de succión.</li>
		<li>Sumerja intermitentemente la aguja de recolección en un contenedor de solución salina estéril durante el procedimiento de recolección para limpiar el sistema. Nota: Este rubor salino facilita el transporte de la microcolumna y asegura que hidratarse. Alternativamente, puede conectarse un adaptador luer MFF a la cerradura de luer de la jeringa y a través de un tubo de conexión, también con una bolsa de solución salina por goteo colgantes.</li>
		<li>Tenga a mano un alambre de metal, o más pequeño medidor de aguja, que es ligeramente más pequeña que el diámetro interno de la aguja de recolección. Si la aguja se obstruye, puede borrarse introduciendo el alambre de metal en el orificio de la aguja.</li>
		<li>Cuando la cantidad deseada de microcolumns han acumulado en el cilindro, desconecte el dispositivo de succión, luego verter el contenido de la lata de succión hacia fuera a través de un filtro para recoger el microcolumns.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Después de la cosecha, aplique un ungüento antibiótico tópico sobre los sitios donantes. Nota: Aderezos adicionales generalmente no son necesarios para sitios dispensadores de aceite.</li>
</ol>

<ol><li>Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+skin+grafting+and+treatment+of+cutaneous+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds.</a> Science. 346 (6212), 941-945 (2014).</li>
<li>Singh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenging+the+Conventional+Therapy%3A+Emerging+Skin+Graft+Techniques+for+Wound+Healing%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Healing.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 136 (4), 524-530 (2015).</li>
<li>Tam, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fractional+Skin+Harvesting%3A+Autologous+Skin+Grafting+without+Donor-site+Morbidity%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery.+Global+Open%22%5BJournal%5D)">Fractional Skin Harvesting: Autologous Skin Grafting without Donor-site Morbidity.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. Global Open. 1 (6), 47(2013).</li>
<li>Tam, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstitution+of+full-thickness+skin+by+microcolumn+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Reconstitution of full-thickness skin by microcolumn grafting.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 11 (10), 2796-2805 (2017).</li>
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<li>Manstein, D., Herron, G. S., Sink, R. K., Tanner, H., Anderson, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fractional+photothermolysis%3A+a+new+concept+for+cutaneous+remodeling+using+microscopic+patterns+of+thermal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Fractional photothermolysis: a new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 34 (5), 426-438 (2004).</li>
<li>Iriarte, C., Awosika, O., Rengifo-Pardo, M., Ehrlich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+applications+of+microneedling+in+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical%2C+Cosmetic+and+Investigational+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Review of applications of microneedling in dermatology.</a> Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology. 10, 289-298 (2017).</li>
<li>Anderson, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+treatment+of+traumatic+scars+with+an+emphasis+on+ablative+fractional+laser+resurfacing%3A+consensus+report%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Laser treatment of traumatic scars with an emphasis on ablative fractional laser resurfacing: consensus report.</a> Journal of the American Medical Association Dermatology. 150 (2), 187-193 (2014).</li>
<li>Hogan, S., Velez, M. W., Ibrahim, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microneedling%3A+a+new+approach+for+treating+textural+abnormalities+and+scars%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Cutaneous+Medicine+and+Surgery%22%5BJournal%5D)">Microneedling: a new approach for treating textural abnormalities and scars.</a> Seminars in Cutaneous Medicine and Surgery. 36 (4), 155-163 (2017).</li>
<li>Manuskiatti, W., Fitzpatrick, R. E., Goldman, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+effectiveness+and+side+effects+of+carbon+dioxide+laser+resurfacing+for+photoaged+facial+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Academy+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Long-term effectiveness and side effects of carbon dioxide laser resurfacing for photoaged facial skin.</a> Journal of the American Academy of Dermatology. 40 (3), 401-411 (1999).</li>
</ol>

Los autores son co inventores patentes relacionadas con la técnica descrita en este artículo, de los cuales han recibido licencias y los ingresos de regalías a través de su institución, el Hospital General de Massachusetts. J. Tam también consulta de Medline Industries, Inc., que tiene la licencia comercial de esta tecnología.

Los métodos aquí descritos están diseñados para permitir la colección de tejido microcolumns en cantidades suficientes para en vivo grandes estudios con animales, utilizando herramientas de suministros de laboratorio disponibles en el mercado. Este aparato ha sido utilizado previamente en la recolección del tejido de piel humana suprimido4,9 como cerdos en piel3. Los parámetros específicos descritos son aquellos que fueron encontr...

Injerto de piel autólogo es la base de la reparación de la herida, pero está limitado por la escasez de sitio donante y la morbilidad, llevando a los esfuerzos en las últimas décadas para desarrollar nuevas opciones terapéuticas para reemplazar convencionales injertos de piel1,2 . Recientemente hemos desarrollado un método alternativo de recolección piel para aprovechar las ventajas del injerto de piel de grosor total reduciendo al mínimo morbosidad del sitio donante. Recogida de piel de grosor total en forma de pequeño (~0.5 mm de diámetro) "microcolumns", sitios dispensadores de aceite son capaces de sanar rápidamente y sin dejar cicatrices en circunstancias normales (para posibles excepciones, véase la sección discusión)3. Microcolumns puede ser aplicado directamente en camas de la herida para acelerar el cierre de la herida, reducir la contracción3y restaurar una amplia gama de tipos de células epidérmicas y dérmicas y las estructuras adnexal funcional4, muchos de los cuales carecen de injerto de piel del partir-grueso convencional o actual Bioingeniería de sustitutos de piel,5. La capacidad de microcolumns para aumentar la curación y de sus sitios de donantes a curar sin dejar cicatrices tanto sido independientemente validados por otros grupos de investigación6,7.
Previamente hemos desarrollado un sistema de recolección de laboratorio para permitir la colección de microcolumns en escala de8; sin embargo, este sistema se compone de muchos componentes modificados para requisitos particulares que no están ampliamente disponibles. Aquí, describimos en detalle el proceso de recolección de agujas, así como sistemas de recolección simple, sobre todo componentes estándar, que puede utilizarse para lograr alto volumen cosecha produciendo. El aparato descrito en este manuscrito es conveniente para la vitro y el trabajo animal, pero no para el uso en seres humanos. Un dispositivo clínico con autorización de la FDA para la aplicación de esta técnica en seres humanos está disponible en el mercado pero no se discutirá en detalle aquí.

<table><tbody><tr><td>Rueda de diamante</td><td>Dremel</td><td>545</td><td></td></tr><tr><td>Aguja hipodérmica (19G)</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-840-98</td> Se <td>pueden utilizar otros tamaños de aguja, dependiendo de las necesidades experimentales</td></tr><tr><td>Rueda de piedra</td><td>Dremel</td><td>540</td><td></td></tr><tr><td>Jeringa (20mL con bloqueo luer)</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-124-967</td><td></td></tr><tr><td>Adaptador de succión</td><td>Tulip Medical</td><td>PA20BD</td><td>Opcional, para la recolección de grandes volúmenes</td></tr><tr><td>Recipiente de succión</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-898-212</td><td>Opcional, para la recolección de grandes volúmenes. Esterilizar antes de usar.</td></tr><tr><td>Tubo de succión</td><td>Medline</td><td>DYND50216H</td><td>Opcional, para cosecha de gran volumen</td></tr></tbody></table>

aparato para la recolección de tejido microcolumns

Apparatus for Harvesting Tissue Microcolumns

Este manuscrito describe el proceso de producción de un aparato de laboratorio, componentes estándar, que puede utilizarse para recoger microcolumns del tejido cutáneo de espesor total. El tamaño pequeño de la microcolumns permite que los donantes sitios curar rápidamente sin causar sitio dispensador de aceite marcar con una cicatriz, mientras cosecha tejido de grosor total permite la incorporación de todos los componentes celulares y extracelulares del tejido de la piel, los incluidos asociados con regiones dérmicas más profundas y las estructuras anexiales de la piel, que todavía tienen que ser reproducido con éxito utilizando la técnicas de ingeniería convencional. El microcolumns puede ser aplicado directamente en las heridas de la piel para aumentar la sanación, o pueden utilizarse como fuente de tejido autólogo de la célula de otros enfoques de ingeniería de tejidos. Las agujas de cosecha se hacen modificando agujas hipodérmicas estándar, y puede ser usados solo para cosechar pequeñas cantidades de tejido o combinados con un sistema de simple colección basada en succión (también hecho de suministros de laboratorio comúnmente disponibles) para alto volumen de la cosecha para facilitar los estudios en modelos animales grandes.

Las agujas de cosecha deben ser capaces de recoger microcolumns del tejido de piel de espesor total con aproximadamente un 80-90% de éxito, y debe contener cada microcolumna epidermis, dermis y algunas grasa subcutánea (figura 4). Si la tasa de éxito de la cosecha es baja, o si resulta difícil insertar una aguja en el tejido, luego una aguja nueva es probable que se necesita. Si la tasa de éxito para la cosecha es consistentemente baja, incluso con agujas nue...

Aquí se describe un protocolo para la producción de la cosecha las agujas que pueden utilizarse para recoger tejidos de la piel de espesor total sin causar donantes sitio marcar con una cicatriz. Las agujas pueden combinarse con un sistema de recolección simple para lograr la recolección de gran volumen.

Aparato para la recolección de tejido Microcolumns

This manuscript describes the production process for a laboratory apparatus, made from off-the-shelf components, that can be used to collect microcolumns ...

Este método puede ayudar a responder preguntas esenciales en el campo de regeneración de tejido de la piel que es cómo reemplazar los diversos tipos celulares y estructuras que están contenidos en la piel natural. La principal ventaja de esta técnica es que la piel autóloga de espesor completo se puede recoger con una morbilidad mínima en el sitio del donante. Demostrando el procedimiento estará Bill Farinelli, quien es un investigador asociado en nuestro laboratorio.Comience este procedimiento con la configuración de la etapa de producción como se describe en el protocolo de texto. Instale dos ruedas de corte concéntricamente en la herramienta giratoria. Utilice una rueda de corte de diamante de rejilla inferior más pequeña sobre una rueda de corte de piedra de rejilla más grande.Coloque una fuente de luz aérea con un brazo ajustable sobre la herramienta giratoria con la luz dirigida a las ruedas de corte. Para mejorar la visualización, coloque un microscopio de disección sobre la configuración de producción para que el ocular se centre en los discos de corte. Al remodelar la punta de la aguja, use gafas protectoras y una máscara quirúrgica para evitar que las partículas de metal fino entren en los ojos o las vías respiratorias.Elija agujas hipodérmicas del tamaño de calibre adecuado en función de los requisitos experimentales. Marque la longitud prevista en cada aguja de cosecha. Baje la aguja perpendicularmente a la herramienta giratoria con la potencia encendida utilizando el borde del disco de corte exterior para cortar la longitud excesiva de la aguja en el punto marcado.Conecte la aguja contundente acortada al conector de bloqueo Luer hembra en la etapa de producción. Ajuste la etapa de rotación horizontal de modo que la aguja esté en un ángulo de 12 grados paralelo a los discos de corte de la herramienta giratoria. Encienda la luz superior y ajuste su posición mientras observa la aguja bajo aumento hasta que la luz se refleje en la línea media de la aguja.Encienda la herramienta giratoria. A continuación, utilice la etapa de traducción para avanzar la aguja hacia el disco de corte interior. Siga avanzando lentamente la aguja contra el disco de corte hasta que el disco de corte alcance aproximadamente la línea media de la aguja.Mueva lentamente la superficie de la aguja de corte de la rueda interior del diamante a la rueda exterior de piedra para terminar la superficie de la aguja de corte con un pulido más fino. Retire la aguja del disco de corte. Usando la etapa de rotación vertical, gire la aguja 180 grados.Repita estos pasos para remodelar el otro lado de la aguja. Ahora retire la aguja de la etapa de producción. Limpie el orificio interior con un alambre metálico ligeramente más pequeño que el diámetro interior de la aguja.Con un palo de madera afilado, retire las rebabas que aún puedan estar unidas a los bordes de la aguja recién formada. Cuando se necesite un gran volumen de microcolumnas, retire el émbolo de una jeringa de 20 mililitros. A continuación, conecte la jeringa a un adaptador de aspiración.Complete el conjunto fijando una aguja de cosecha a la jeringa. Utilice una pieza de tubo de succión estéril para conectar el adaptador de succión a un recipiente de succión estéril. Asegúrese de que el aparato de cosecha esté conectado a una entrada de recipiente que permita que el fluido fluya hacia el recipiente sin obstáculos.Ahora conecte el aparato a una fuente de presión negativa. Cosecha las microcolumnas insertando la aguja de cosecha en la piel. Sumerja intermitentemente la aguja de cosecha en un recipiente de solución salina estéril durante el procedimiento de recolección para vaciar el sistema.Mantenga a mano un alambre metálico o una aguja ligeramente más pequeña que el diámetro interno de la aguja de cosecha. Si la aguja se obstruye, se puede limpiar insertando el alambre metálico en el orificio de la aguja. Cuando se haya acumulado la cantidad deseada de microcolumnas en el contenedor, desconecte el dispositivo de la succión.A continuación, vierta el contenido de la bombona de succión a través de un filtro para recoger las microcolumnas. Aquí se muestra una aguja de cosecha terminada vista desde el frente y desde el costado. Observe los dos puntos de corte en la punta.Las agujas de cosecha deben ser capaces de recoger microcolumnas de tejido cutáneo de espesor completo con una tasa de éxito aproximada de 80 a 90%. En esta figura, las marcas de verificación representan un milímetro. Cada microcolumna debe contener epidermis, dermis y algo de grasa subcutánea.Las microcolumnas se pueden aplicar directamente a la cicatrización de heridas o se pueden combinar con diferentes materiales de matriz para producir construcciones combinadas. Las microcolumnas también se pueden mantener en cultivo para estudios in vitro. Mientras se realiza una cosecha de gran volumen, es importante recordar incorporar un lavado salino intermitente.Aunque este método fue diseñado para la reparación de heridas en la piel, un principio similar podría aplicarse a otros sistemas de órganos como los músculos donde se necesita injerto de tejido autólogo.

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Los leucocitos pulmonares marginadores exhiben características únicas y funciones inmunológicas distintas en comparación con otras poblaciones de leucocitos. En este trabajo describimos la recolección selectiva de esta subpoblación de leucocitos pulmonares, mediante perfusión forzada de los pulmones en ratas y ratones. Los leucocitos pulmonares marginadores parecen ser fundamentales para determinar la susceptibilidad a las enfermedades transmitidas por la sangre y relacionadas con los pulmones.

La recolección selectiva de leucocitos marginando-pulmonar

Los leucocitos hepáticos marginadores exhiben características únicas y funciones inmunológicas distintas en comparación con otras poblaciones de leucocitos. En este trabajo describimos un método para la recolección selectiva de esta población específica de células hepáticas, mediante perfusión forzada del hígado de ratas o ratones. Los leucocitos hepáticos marginadores parecen ser fundamentales para determinar la susceptibilidad a las enfermedades y metástasis relacionadas con el hígado.

La recolección selectiva de leucocitos marginando-hepáticas

Este manuscrito detalla la fabricación de redes neuronales de ingeniería micro-tejidos: construcciones tridimensionales de tamaño micrométrico compuestas por extensos tramos axonales alineados que abarcan la (s) población (es) neuronal (es) agregada (s) encerrada (s) en un hidrogel tubular. Estos andamios vivos pueden servir como relés funcionales para reconstruir o modular circuitos neuronales o como bancos de pruebas biofidelic imitando la neuroanatomía de la sustancia gris-blanca.

Anatomía Inspirada Tridimensional Micro-tejido Ingeniería de Redes Neuronales para la Reconstrucción del Sistema Nervioso, Modulación y Modelado

Nos muestra el desarrollo de los paquetes uno mismo-montado, tridimensionales de somata astrocytic longitudinalmente alineado y procesos dentro de un protector nuevo biomaterial. Estos diseñados "andamios de vida", que diámetro de la escala del micrón pero extiende centímetros de longitud, puede servir como bancos de pruebas para estudiar los mecanismos del desarrollo neurológico o facilitar la Neurorregeneración por dirige la migración neuronal y axonal pathfinding.

Ingeniería tisular tridimensional alineado astrositos redes para recapitular los mecanismos del desarrollo y facilitar la regeneración del sistema nervioso

Este protocolo describe un método rentable para acelerar la extracción de ADN plasmid. Utilizando racks personalizados impresos en 3D compatibles con rotores estándar de placas de cubo oscilante, los investigadores pueden procesar hasta 48 columnas de giro con condensadores o hasta 116 columnas de giro sin condensadores simultáneamente, reduciendo significativamente el tiempo de manipulación en comparación con los métodos manuales de microcentrífuga.

Extracción de ADN en columna de rendimiento medio usando racks de 24 pozos

Aprende a recolectar piel de espesor completo con mínima morbilidad en el sitio donante usando agujas especializadas. Este método facilita la obtención de tejido autólogo para investigación en regeneración dérmica.

Aparato para la recolección de tejido Microcolumns

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