Miedo estrés mayor aprendizaje, un modelo de roedor robusto del trastorno por estrés postraumático

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la neurociencia conductual, como cómo entender mejor los mecanismos biológicos subyacentes del TEPT. La principal ventaja de esta técnica es que es robusta, fiable, cuantitativa, y se puede realizar en múltiples especies. Comience por establecer un conjunto de cámaras de acondicionamiento de miedo para servir como contexto A, y un segundo conjunto de cámaras de condicionamiento de miedo para servir como contexto B.Coloque cada cámara de acondicionamiento de miedo dentro de un cubículo de atenuación de sonido para evitar la intrusión de ruido exterior.

A continuación, coloque los pisos de rejilla en cada cámara de acondicionamiento de miedo para la entrega de choque de pies, utilizando un patrón de rejilla diferente para cada contexto para diferenciar la textura del suelo entre contextos. A continuación, coloque inserciones triangulares de plexiglás negro en el contexto B para diferenciar el diseño interno de los dos contextos. Limpie las paredes y puertas de la cámara y rocíe las sartenes debajo de los pisos de la rejilla con una solución de limpieza diluida.

Después de limpiar el piso de la red, conecte un generador de choque y un codificador capaces de entregar un choque de amplitud de 1 miliamperio o inferior a cada piso de la rejilla para la entrega de impactos del pie. Por último, utilice un multímetro para probar la corriente suministrada por el generador de choque colocando cada sonda en una barra diferente del piso de la red, y confirmando que se produce la amplitud de choque deseada. En el primer día, configure el contexto A con pisos de rejilla y luz visible.

Asegúrese de que el multímetro esté unido a diferentes barras para confirmar la amplitud de choque deseada. Transporte animales desde el vivarium a la sala experimental en sus jaulas de origen colocadas en un carro, y colóquelos individualmente en las cuatro cámaras de acondicionamiento de miedo. Para experimentos con ratones, utilice el generador de choque y los revólores para entregar 10 impactos de pie de un segundo y un miliamperio presentados al azar durante 60 minutos a través de los pisos de rejilla de las cámaras que contienen sujetos condicionados por trauma.

Para experimentos con ratas, utilice el generador de choque y los revóringos para entregar 15 impactos de un segundo y un pie de miliamperio presentados al azar durante 90 minutos a través de las barras de rejilla de las cámaras que contienen sujetos condicionados por trauma. Después de 90 minutos para la rata, o 60 minutos para los experimentos del ratón, devolver todos los animales a sus jaulas de origen y volver rápidamente al vivarium. En el segundo día, configure el contexto A y transporte animales a la sala experimental como se hizo el primer día.

Coloque a los animales en el contexto A durante ocho minutos, sin entrega de choque, y grabe el comportamiento en video durante toda la sesión. Después de ocho minutos, regresen todos los animales a sus jaulas de origen y regresen rápidamente al vivario. En el tercer día, configure el contexto B con un conjunto diferente de pisos de rejilla de los utilizados en el contexto A y las plaquitas de plexiglás curvado triangular o blanco negro.

Utilice luz infrarroja o cercana al infrarrojo si es necesario para iluminar las cámaras y comprobar la amplitud del choque con el multímetro. Limpie las cámaras y rocíe las sartenes debajo de los pisos de la rejilla con la solución no utilizada en el contexto A.Next, transporte animales desde el vivarium hasta la sala experimental en una bañera de plástico negro, y colóquelos individualmente en cámaras de acondicionamiento de miedo. Después de un período de referencia de 180 segundos, entregue un solo segundo, un choque de pies de miliamperio para ratas, o un solo choque de dos segundos, un pie de miliamperio para ratones, a todos los animales.

Luego, retire todos los animales 30 segundos después del parto de choque y regrese rápidamente al vivarium. En el cuarto día del procedimiento, establezca el contexto B como se hizo el día tres. Transporte animales desde el vivarium a la sala experimental en el mismo transporte que se realiza el día tres.

Coloque a los animales en el contexto B durante ocho minutos sin la entrega de choque, y grabe video la congelación durante toda la sesión. Finalmente, retire todos los animales después de ocho minutos y regrese rápidamente al vivarium. Los resultados indican que los animales en la condición de trauma mostraron niveles significativamente más altos de congelación en el contexto A en comparación con los controles sin trauma, lo que indica la adquisición de miedo al contexto de trauma.

Tanto el trauma como los animales de trauma mostraron niveles mínimos de congelación que no diferían entre sí. Además, los animales de trauma mostraron una menor reactividad del shock en comparación con los controles sin trauma, y los animales traumatismo mostraron una mayor congelación en comparación con los controles sin trauma, lo que indica que la exposición al estresador traumático aumentó el miedo inmediatamente después del estrés leve. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como el laberinto elevado más, campo abierto y caja oscura clara con el fin de responder a preguntas adicionales como cómo el trauma afecta a los fenotipos similares a la ansiedad.