Name: Represión del crecimiento de la célula del mieloma múltiple en Vivo de nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT)-entregado Oligos antisentido MALAT1 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 24 s
Description: Aprende a empaquetar oligonucleótidos con nanotubos de carbono de pared simple para mejorar la entrega de fármacos en células de mieloma múltiple. Este método potencia tratamientos terapéuticos in vivo.

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Los autores agradecen el Instituto de Investigación Lerner proteómicos, genómicos y núcleos de proyección de imagen para su ayuda y apoyo. Financiación: Este trabajo fue apoyado financieramente por la subvención del NIH/NCI R00 CA172292 (a J.J.Z.) y fondos de puesta en marcha (a J.J.Z.) y la clínica y traslacional ciencia colaborativa (CTSC) de caso Western Reserve University base utilización piloto (a J.J.Z.). Este trabajo utilizó el microscopio confocal Leica SP8 que fue comprado con fondos de los institutos nacionales de salud SIG grant 1S10OD019972-01.

Todos los experimentos con animales fueron aprobados previamente por la Cleveland Clinic IACUC (Comité de uso y cuidado de Animal institucional).
1. síntesis de NTCSPs funcionalizados
<ol><li>Mezclar 5 mL de agua libre de nucleasa estéril en un vial de centelleo de vidrio (20 mL), 1 mg de NTCSPs y 5 mg de DSPE-PEG2000-amina. Sacúdalo bien para disolver todos los reactivos totalmente.</li>
	<li>Someter a ultrasonidos el frasco en un sonicador de baño de agua a un nivel de potencia de 40 W durante 1 hora a temperatura ambiente (RT, 20 min x 3, cambiar el agua cada 20 minutos para evitar el sobrecalentamiento). Luego, centrifugar a 24.000 x g durante 6 h y recoger la solución sobrenadante. Esta solución SWCNT funcional puede almacenarse a 4 ° C durante 2 meses.</li>
	<li>Añadir 1 mL de solución SWCNT de paso 1.2 a un dispositivo de filtro centrífugo de MWCO de 100 kDa, seguido de 4 mL de agua estéril libre de nucleasas. Centrifugar 10 min a 4.000 x g a temperatura ambiente para quitar extra DSPE-PEG2000-amina. Repetir la adición de 4 mL de agua y la centrifugación 5 x. Más de 0,5 mL de disolución SWCNT sobrante se quedarán en el filtro después de cada centrifugación.</li>
	<li>Medir la concentración de la solución SWCNT sobrante en el filtro utilizando un espectrómetro de UV/VIS en 808 nm después del último lavado. La concentración final es típicamente cerca de 50 mg/L (calculados según el método desarrollado por Kam et al.18). Nota: Asegúrese de que NTCSPs funcionalizados DSPE-PEG son solubles en agua tras el paso 1.4 y son estables en diferentes soluciones biológicas sin agregación visible después de algunas semanas.</li>
</ol>2. Conjugación de Anti-MALAT1 Gapmer ADN flanqueado por 2'-O ARN modificado a SWCNT funcionalizado
<ol><li>Añadir 0,5 mg de Sulfo-LC-SPDP en 450 μl de DSPE-PEG2000-amine functionalized SWCNT. Añadir 50 μl de PBS de x 10 y luego incubar por 2 h a TA.</li>
	<li>Para quitar extra Sulfo-LC-SPDP, añadir la reacción del paso 2.1 a un dispositivo de filtro centrífugo de MWCO de 100 kDa, seguida de 4 mL de agua libre de nucleasa. Centrifugar durante 10 min a 4.000 x g en RT. repetir la adición de 4 mL de agua y la centrifugación 5 x.</li>
	<li>Añadir 200 nM modificación de tiol anti-MALAT1-Cy3 gapmer ADN en 1,5 mL de solución comercial de TDT e incubar durante 90 min en RT. purificar el producto con una siesta-5 columna, siguiendo el protocolo del fabricante. Eluir el anti-MALAT1-Cy3 con 500 μl de esterilizado libre de nucleasa 1 x PBS. Nota: SWCNT funcionalizado puede almacenarse con TDT adicional, que podría unirse disulfuro formado durante el almacenamiento de la gapmer anti-MALAT1 de thiolated DNA. La TDT añadida puede eliminarse por aNAP-5 columna antes de la conjugación con SWCNT.</li>
	<li>Recoger la solución DSPE-PEG2000-amina SWCNT sulfo-LC-SPDP-tratados en el filtro y diluirlo en 500 μl de solución de anti-MALAT1-Cy3. Entonces, lo incube a 4 ° C por 24 h. El conjugado SWCNT-anti-MALAT1 puede almacenarse a 4 ° C durante 3 semanas. Siguiendo el mismo procedimiento, el SWCNT conjugado con oligo antisentido scramble puede ser sintetizado y utilizado como control de SWCNT.</li>
</ol>3. cola inyección en la vena de SWCNT-Anti-MALAT1
<ol><li>
Generar un modelo de ratón diseminada MM.
	<ol>
<li>Para lograr los mejores resultados de la comparación, al azar organizar 14 NOD. CB17-Prkdcscid/J ratones (8 semanas) en grupos de control o ensayo (siete en cada grupo) con la misma proporción de hombres y mujeres.</li>
		<li>Limpiar el Banco de funcionamiento y esterilizar con alcohol al 70%.</li>
		<li>Use una lámpara de calefacción para calentar el ratón para ayudar a la cola de la vena para aparecer. Refrenar el ratón correctamente con un limitador de la inyección de cola.</li>
		<li>Inyectar las células 5 x 106 MM.1S-Luc-mCherry en 50 μl de PBS a través de la vena de la cola sin anestesia. Presione el sitio de la inyección con un algodón embebido en alcohol de 30 marca s. el ratón inyectado y volver a una jaula limpia.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Iniciar el tratamiento el día 7 después de la inyección de células MM.1S.
	<ol>
<li>Inyectar 50 μl de PBS con SWCNT-anti-MALAT1 en la vena de la cola del ratón. Uso PBS con un control de SWCNT como control.</li>
		<li>Presione el sitio de la inyección con un algodón embebido en alcohol durante 30 s.</li>
		<li>Observar el sangrado local en la cola y el comportamiento general del ratón durante 1 min y volver a una jaula limpia. Observar los ratones todo inyectados otra vez antes de regresar a la jaula a la parrilla, para asegurarse de que las inyecciones son bien toleradas.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Repetir la inyección cada 7 días hasta la finalización del experimento.
	<ol>
<li>Terminar el experimento cuando se degrada la salud general del ratón: Cuándo no comer o beber, la aparición de patas pálidas, sangrado subcutáneo, una dificultad para respirar, disminución de la actividad, una parálisis de las extremidades inferiores o una masa tangible en el se observa el abdomen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. evaluación de la progresión de la enfermedad
<ol><li>Evaluar el estado general de los ratones cada día después de la inyección de células MM.1S-Luc-mCherry. Preste especial atención si los ratones desarrollan paraliza de extremidades inferiores.</li>
	<li>
Evaluar el crecimiento del tumor usando un sistema en vivo de imagen 1 x semana, antes de la inyección de SWCNT-anti-MALAT1.
	<ol>
<li>Preparar el fresco 15 mg/mL D-Luciferin con PBS 1 x.</li>
		<li>Anestesiar los ratones con un vaporizador de isoflurano (3 – 5% para la inducción y 1 – 3% para el mantenimiento, dependiendo del estado de los ratones).</li>
		<li>Inyectar a 150 mg/kg D Luciferin en cada ratón por vía intraperitoneal, a 5 minutos antes de la proyección de imagen; entonces, imagen de los ratones en una posición propensa con un espectro de sistema de imagen.</li>
		<li>Recoger imágenes secuenciales de los ratones cada 2 minutos, hasta que se alcanza la saturación de la luminescencia. Ajustar el intervalo de tiempo según la absorción de D-Luciferin/señal.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Utilizar CO2 para sacrificar a los ratones una vez que se llega a la terminación del experimento.</li>
	<li>
Ya que este es un modelo diseminado MM, proceso de los ratones como sigue.
	<ol>
<li>Pesar el ratón antes de la disección.</li>
		<li>Recolección de sangre periférica desde el corazón para un ensayo de conteo sanguíneo completo (CSC) realizado por una máquina contadora de células de la sangre. Las cuentas de glóbulos blancos y glóbulos rojos, así como la proporción de linfocitos, que es los índices principales.</li>
		<li>Aislar el bazo y pésalo. Calcular el cociente del peso corporal del bazo; examinar > 0.5% como agrandamiento del bazo.</li>
		<li>Recoge los tejidos de la médula ósea, bazo, ganglios linfáticos, riñón y el tejido con metástasis visible.</li>
		<li>Recoger la columna si el ratón desarrolló una parálisis de las extremidades inferiores.</li>
		<li>Extracto de RNA y proteína de las muestras de médula ósea.</li>
		<li>Fijar todos los restantes tejidos en formalina.</li>
		<li>Para descalcificación, sumergir las muestras de hueso en solución de 0,25 M de EDTA (pH 8.0) durante 5 días después de 24 horas de fijación.</li>
		<li>Sumergir las muestras en alcohol al 75% para el almacenamiento a largo plazo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Comparar la intensidad de la señal de luciferasa en los mismos puntos de tiempo en dos grupos. De ambos grupos, registrar las fechas de sacrificio de cada ratón y calcular las curvas de supervivencia de los dos grupos con el software. Nota: Todos los procedimientos se resumen en la figura 1.</li>
</ol>

<ol><li>Jiang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNase+non-sensitive+and+endocytosis+independent+siRNA+delivery+system%3A+delivery+of+siRNA+into+tumor+cells+and+high+efficiency+induction+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">RNase non-sensitive and endocytosis independent siRNA delivery system: delivery of siRNA into tumor cells and high efficiency induction of apoptosis.</a> Nanoscale. 5 (16), 7256-7264 (2013).</li>
<li>Murakami, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Water-dispersed+single-wall+carbon+nanohorns+as+drug+carriers+for+local+cancer+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Water-dispersed single-wall carbon nanohorns as drug carriers for local cancer chemotherapy.</a> Nanomedicine (Lond). 3 (4), 453-463 (2008).</li>
<li>Kam, N. W., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+intracellular+protein+transporters%3A+generality+and+biological+functionality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as intracellular protein transporters: generality and biological functionality.</a> Journal of the American Chemical Society. 127 (16), 6021-6026 (2005).</li>
<li>Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionalization+of+carbon+nanotubes+via.+cleavable+disulfide+bonds+for+efficient+intracellular+delivery+of+siRNA+and+potent+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Functionalization of carbon nanotubes via. cleavable disulfide bonds for efficient intracellular delivery of siRNA and potent gene silencing.</a> Journal of the American Chemical Society. 127 (36), 12492-12493 (2005).</li>
<li>Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+intracellular+transporters+for+proteins+and+DNA%3A+an+investigation+of+the+uptake+mechanism+and+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition+in+English%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as intracellular transporters for proteins and DNA: an investigation of the uptake mechanism and pathway.</a> Angewandte Chemie International Edition in English. 45 (4), 577-581 (2006).</li>
<li>Ntziachristos, P., Abdel-Wahab, O., Aifantis, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+concepts+of+epigenetic+dysregulation+in+hematological+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Immunology%22%5BJournal%5D)">Emerging concepts of epigenetic dysregulation in hematological malignancies.</a> Nature Immunology. 17 (9), 1016-1024 (2016).</li>
<li>Evans, J. R., Feng, F. Y., Chinnaiyan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bright+side+of+dark+matter%3A+lncRNAs+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">The bright side of dark matter: lncRNAs in cancer.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (8), 2775-2782 (2016).</li>
<li>Ronchetti, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+lncRNA+transcriptional+fingerprints+characterize+progressive+stages+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Distinct lncRNA transcriptional fingerprints characterize progressive stages of multiple myeloma.</a> Oncotarget. 7 (12), 14814-14830 (2016).</li>
<li>Wong, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+a+long+non-coding+RNA+KIAA0495+in+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of a long non-coding RNA KIAA0495 in multiple myeloma.</a> Molecular Cancer. 14, 175(2015).</li>
<li>Schmidt, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long+noncoding+MALAT-1+RNA+indicates+a+poor+prognosis+in+non-small+cell+lung+cancer+and+induces+migration+and+tumor+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+Oncology%22%5BJournal%5D)">The long noncoding MALAT-1 RNA indicates a poor prognosis in non-small cell lung cancer and induces migration and tumor growth.</a> Journal of Thoracic Oncology. 6 (12), 1984-1992 (2011).</li>
<li>Ji, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MALAT-1%2C+a+novel+noncoding+RNA%2C+and+thymosin+beta4+predict+metastasis+and+survival+in+early-stage+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">MALAT-1, a novel noncoding RNA, and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer.</a> Oncogene. 22 (39), 8031-8041 (2003).</li>
<li>Luo, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+and+genomic+analysis+of+human+hepatocellular+carcinomas+and+hepatoblastomas%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic and genomic analysis of human hepatocellular carcinomas and hepatoblastomas.</a> Hepatology. 44 (4), 1012-1024 (2006).</li>
<li>Guffanti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transcriptional+sketch+of+a+primary+human+breast+cancer+by+454+deep+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">A transcriptional sketch of a primary human breast cancer by 454 deep sequencing.</a> BMC Genomics. 10, 163(2009).</li>
<li>Cho, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MALAT1+long+non-coding+RNA+is+overexpressed+in+multiple+myeloma+and+may+serve+as+a+marker+to+predict+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">MALAT1 long non-coding RNA is overexpressed in multiple myeloma and may serve as a marker to predict disease progression.</a> BMC Cancer. 14, 809(2014).</li>
<li>Handa, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+non-coding+RNA+MALAT1+is+an+inducible+stress+response+gene+associated+with+extramedullary+spread+and+poor+prognosis+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Haematology%22%5BJournal%5D)">Long non-coding RNA MALAT1 is an inducible stress response gene associated with extramedullary spread and poor prognosis of multiple myeloma.</a> British Journal of Haematology. 179 (3), 449-460 (2017).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+MALAT1%2FPARP1%2FLIG3+complex+induces+DNA+damage+and+apoptosis+in+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Targeting the MALAT1/PARP1/LIG3 complex induces DNA damage and apoptosis in multiple myeloma.</a> Leukemia. , (2018).</li>
<li>Lennox, K. A., Behlke, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+localization+of+long+non-coding+RNAs+affects+silencing+by+RNAi+more+than+by+antisense+oligonucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Cellular localization of long non-coding RNAs affects silencing by RNAi more than by antisense oligonucleotides.</a> Nucleic Acids Research. 44 (2), 863-877 (2016).</li>
<li>Kam, N. W., O'Connell, M., Wisdom, J. A., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+multifunctional+biological+transporters+and+near-infrared+agents+for+selective+cancer+cell+destruction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as multifunctional biological transporters and near-infrared agents for selective cancer cell destruction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (33), 11600-11605 (2005).</li>
<li>Zeineldin, R., Al-Haik, M., Hudson, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+polyethylene+glycol+integrity+in+specific+receptor+targeting+of+carbon+nanotubes+to+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Role of polyethylene glycol integrity in specific receptor targeting of carbon nanotubes to cancer cells.</a> Nano Letters. 9 (2), 751-757 (2009).</li>
<li>Amodio, N., D'Aquila, P., Passarino, G., Tassone, P., Bellizzi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+modifications+in+multiple+myeloma%3A+recent+advances+on+the+role+of+DNA+and+histone+methylation%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Therapeutic+Targets%22%5BJournal%5D)">Epigenetic modifications in multiple myeloma: recent advances on the role of DNA and histone methylation.</a> Expert Opinion on Therapeutic Targets. 21 (1), 91-101 (2017).</li>
<li>Ahmad, N., Haider, S., Jagannathan, S., Anaissie, E., Driscoll, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+theragnostics+for+the+clinical+management+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">MicroRNA theragnostics for the clinical management of multiple myeloma.</a> Leukemia. 28 (4), 732-738 (2014).</li>
<li>Amodio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drugging+the+lncRNA+MALAT1+via.+LNA+gapmeR+ASO+inhibits+gene+expression+of+proteasome+subunits+and+triggers+anti-multiple+myeloma+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Drugging the lncRNA MALAT1 via. LNA gapmeR ASO inhibits gene expression of proteasome subunits and triggers anti-multiple myeloma activity.</a> Leukemia. , (2018).</li>
<li>Highleyman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDA+approves+fomivirsen%2C+famciclovir%2C+and+Thalidomide.+Food+and+Drug+Administration%5BTitle%5D)+AND+%22BETA%22%5BJournal%5D)">FDA approves fomivirsen, famciclovir, and Thalidomide. Food and Drug Administration.</a> BETA. 5, (1998).</li>
<li>Smith, R. J., Hiatt, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+new+drugs+for+homozygous+familial+hypercholesterolemia%3A+managing+benefits+and+risks+in+a+rare+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Two new drugs for homozygous familial hypercholesterolemia: managing benefits and risks in a rare disorder.</a> JAMA Internal Medicine. 173 (16), 1491-1492 (2013).</li>
<li>Aartsma-Rus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDA+Approval+of+Nusinersen+for+Spinal+Muscular+Atrophy+Makes+2016+the+Year+of+Splice+Modulating+Oligonucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acid+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">FDA Approval of Nusinersen for Spinal Muscular Atrophy Makes 2016 the Year of Splice Modulating Oligonucleotides.</a> Nucleic Acid Therapeutics. 27 (2), 67-69 (2017).</li>
<li>Nelson, S. F., Miceli, M. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28399245">FDA Approval of Eteplirsen for Muscular Dystrophy.</a> The Journal of the American Medical Association. 317 (14), 1480(2017).</li>
<li>Liu, Z., Sun, X., Nakayama-Ratchford, N., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supramolecular+chemistry+on+water-soluble+carbon+nanotubes+for+drug+loading+and+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22American+Chemical+Society+Nano%22%5BJournal%5D)">Supramolecular chemistry on water-soluble carbon nanotubes for drug loading and delivery.</a> American Chemical Society Nano. 1 (1), 50-56 (2007).</li>
<li>Ali-Boucetta, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiwalled+carbon+nanotube-doxorubicin+supramolecular+complexes+for+cancer+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+communications+%28Cambridge%29%22%5BJournal%5D)">Multiwalled carbon nanotube-doxorubicin supramolecular complexes for cancer therapeutics.</a> Chemical communications (Cambridge). (4), 459-461 (2008).</li>
<li>Bianco, A., Kostarelos, K., Partidos, C. D., Prato, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15672140">Biomedical applications of functionalised carbon nanotubes.</a> Chemical communications. (5), Cambridge. 571-577 (2005).</li>
<li>Hadidi, N., Kobarfard, F., Nafissi-Varcheh, N., Aboofazeli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+single-walled+carbon+nanotube+solubility+by+noncovalent+PEGylation+using+experimental+design+methods%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of single-walled carbon nanotube solubility by noncovalent PEGylation using experimental design methods.</a> International Journal of Nanomedicine. 6, 737-746 (2011).</li>
<li>Padilla-Parra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+imaging+of+endosome+acidification+and+single+retrovirus+fusion+with+distinct+pools+of+early+endosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Quantitative imaging of endosome acidification and single retrovirus fusion with distinct pools of early endosomes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (43), 17627-17632 (2012).</li>
<li>Wu, H., Zhu, L., Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((pH-sensitive+poly%28histidine%29-PEG%2FDSPE-PEG+co-polymer+micelles+for+cytosolic+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">pH-sensitive poly(histidine)-PEG/DSPE-PEG co-polymer micelles for cytosolic drug delivery.</a> Biomaterials. 34 (4), 1213-1222 (2013).</li>
<li>Oishi, M., Nagatsugi, F., Sasaki, S., Nagasaki, Y., Kataoka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smart+polyion+complex+micelles+for+targeted+intracellular+delivery+of+PEGylated+antisense+oligonucleotides+containing+acid-labile+linkages%5BTitle%5D)+AND+%22Chembiochem%22%5BJournal%5D)">Smart polyion complex micelles for targeted intracellular delivery of PEGylated antisense oligonucleotides containing acid-labile linkages.</a> Chembiochem. 6 (4), 718-725 (2005).</li>
<li>Dong, H., Ding, L., Yan, F., Ji, H., Ju, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+polyethylenimine-grafted+graphene+nanoribbon+for+cellular+delivery+of+locked+nucleic+acid+modified+molecular+beacon+for+recognition+of+microRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The use of polyethylenimine-grafted graphene nanoribbon for cellular delivery of locked nucleic acid modified molecular beacon for recognition of microRNA.</a> Biomaterials. 32 (15), 3875-3882 (2011).</li>
<li>Arunachalam, B., Phan, U. T., Geuze, H. J., Cresswell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+reduction+of+disulfide+bonds+in+lysosomes%3A+characterization+of+a+gamma-interferon-inducible+lysosomal+thiol+reductase+%28GILT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Enzymatic reduction of disulfide bonds in lysosomes: characterization of a gamma-interferon-inducible lysosomal thiol reductase (GILT).</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (2), 745-750 (2000).</li>
<li>Lelimousin, M., Sansom, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+perturbation+by+carbon+nanotube+insertion%3A+pathways+to+internalization%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Membrane perturbation by carbon nanotube insertion: pathways to internalization.</a> Small. 9 (21), 3639-3646 (2013).</li>
<li>Thomas, M., Enciso, M., Hilder, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insertion+mechanism+and+stability+of+boron+nitride+nanotubes+in+lipid+bilayers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phys+Chem+B%22%5BJournal%5D)">Insertion mechanism and stability of boron nitride nanotubes in lipid bilayers.</a> J Phys Chem B. 119 (15), 4929-4936 (2015).</li>
<li>Jin, H., Heller, D. A., Strano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-particle+tracking+of+endocytosis+and+exocytosis+of+single-walled+carbon+nanotubes+in+NIH-3T3+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Single-particle tracking of endocytosis and exocytosis of single-walled carbon nanotubes in NIH-3T3 cells.</a> Nano Letters. 8 (6), 1577-1585 (2008).</li>
<li>Jin, H., Heller, D. A., Sharma, R., Strano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-dependent+cellular+uptake+and+expulsion+of+single-walled+carbon+nanotubes%3A+single+particle+tracking+and+a+generic+uptake+model+for+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22American+Chemical+Society+Nano%22%5BJournal%5D)">Size-dependent cellular uptake and expulsion of single-walled carbon nanotubes: single particle tracking and a generic uptake model for nanoparticles.</a> American Chemical Society Nano. 3 (1), 149-158 (2009).</li>
<li>Ruggiero, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradoxical+glomerular+filtration+of+carbon+nanotubes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Paradoxical glomerular filtration of carbon nanotubes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (27), 12369-12374 (2010).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

La evidencia ha mostrado que lncRNAs participar en la regulación de numerosos procedimientos fisiológicos y patofisiológicos de cánceres, incluyendo el m7,8,9; tienen el potencial de ser objeto de tratamiento del cáncer, que puede ser realizado por oligonucleótidos antisentido20,21,22. La U.S. Food y Drug Administration (FDA) ha aprobad...

El SWCNT es un nuevo nanomaterial que puede ofrecer a varios tipos de drogas, como las proteínas, moléculas pequeñas y los ácidos nucleicos, estable y eficiente con tolerabilidad ideal y mínima toxicidad en la1 de la vitro y en vivo2. Un SWCNT funcionalizado tiene gran solubilidad en agua y biocompatibilidad, puede utilizarse como un servicio de transporte para moléculas más pequeñas y llevarlas para penetrar la membrana de la célula3,4,5.
lncRNAs son un grupo de RNA (> 200 nt) que se transcriben a mRNA de genoma, pero no puede ser traducido a proteínas. Cada vez más pruebas ha demostrado que lncRNAs participar en la regulación de la expresión de genes6 y participan en la iniciación y progresión de la mayoría de los tipos de cáncer, incluyendo MM7,8,9. MALAT1 es una transcripción codifica nuclear enriquecido 2 (NEAT2) y un altamente conservado lncRNA10. MALAT1 es reconocido inicialmente en metastásico de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) el cáncer11, pero ha sido sobre expresa en numerosos tumores5,12,13; es uno de los lncRNAs más altamente expresada y se correlaciona con un pronóstico pobre en MM8,14. El nivel de expresión de MALAT1 es significativamente mayor en pacientes con MM extramedular curso fatal en comparación con aquellos diagnosticados sólo como MM15.
En un estudio previo, hemos confirmado que oligos de anti-MALAT1 robusta conducen a daños en el ADN y la apoptosis en MM16 mediante el uso de oligonucleótidos de antisentido del ADN de gapmer a MALAT1 (anti-MALAT1) en células de MM. La DNA gapmer es compuesta de ADN antisentido y unida por 2'-OMe-RNAs, que podrían sugerirán el escote de la MALAT1 por la Rnasa H actividad una vez atado17. La eficiencia de la entrega en vivo de oligos antisentido todavía limita su uso clínico.
Para probar la entrega efecto de SWCNT para oligos de gapmer anti-MALAT1, el gapmer anti-MALAT1 ADN se conjuga a DSPE-PEG2000-amina funcionalizados SWCNT. SWCNT-anti-MALAT1 luego se inyecta por vía intravenosa en un modelo de ratón diseminada MM; se observa una inhibición notable después de cuatro tratamientos.

<table><tbody><tr><td>SWCNTs</td><td>Millipore-Sigma</td><td>704113</td><td></td></tr><tr><td>DSPE-PEG2000-Amine</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>880128</td><td></td></tr><tr><td>sonicador de baño</td><td>VWR</td><td>97043-992</td><td></td></tr><tr><td>Filtro centrífugo de 4 mL</td> Espectrómetro UV/VIS <td>Millipore-Sigma</td><td>Z740208-8EA</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>accuSkan GO Espectrofotómetro</td> <td>de microplacascoeficiente de extinción de 0,0465 L/mg/cm a 808 nm</td></tr><tr><td>Sulfo-LC-SPDP</td><td>ProteoChem</td><td>c1118</td><td></td></tr><tr><td>solución DTT</td><td>Millipore-Sigma</td><td>43815</td><td></td></tr><tr><td>columna NAP-5 GE</td><td>Healthcare</td><td>17-0853-01</td><td></td></tr><tr><td>sistema de imagen in vivo</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NOD. CB17-Prkdcscid/J ratones</td><td>Charles River lab</td><td>250</td><td></td></tr><tr><td>Citómetro de flujo</td><td>Becton Dickinso</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lipofectamine</td><td>Invitrogen</td><td>11668019</td><td>Lipofectamine2000</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>Invitrogen</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>RMPI-1640 medio</td><td>Invitrogen</td><td>11875-093</td><td></td></tr><tr><td>MALAT1-QF:</td> <td>sintetizado por IDT Empresa</td><td></td><td>5'- GTTCTGATCCCGCTGCTATT - 3'</td></tr><tr><td>MALAT1-QR:</td> <td>sintetizado por la empresa</td><td></td> IDT <td>5'- TCCTCAACACTCAGCCTTTATC - 3'</td></tr><tr><td>GAPDH-QF:</td> <td>sintetizado por la empresa</td><td></td> IDT <td>5'- CAAGAGCACAAGAGGAAGAGAG - 3'</td></tr><tr><td>GAPDH-QR:</td> <td>sintetizado por la empresa</td><td></td> IDT <td>5'- CTACATGGCAACTGTGAGGAG - 3'</td></tr><tr><td>PCR cuantitativa con la mezcla maestra SYBR Green PCR</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A25780</td><td></td></tr><tr><td>RevertAid kit de síntesis de ADNc de primera posición</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>K1621</td><td></td></tr><tr><td>anti-MALAT1</td><td>sintetizado por IDT Company</td><td></td><td>5'-mC*mG*mA*mA*mA*C*A*T*T *G*G*C*A*C*mC*mA*mG*mC*mA-3'</td></tr><tr><td>kit de ensayo de viabilidad celular</td><td>Promega Corporation</td><td>G7570</td><td>CellTiter-GloKit de ensayo de viabilidad celular luminiscente</td></tr><tr><td>accuSkan GO Espectrofotómetro de microplaca UV/Vis</td><td>Thermo Fisher</td> Scientific <td></td><td></td></tr><tr><td>filtro centrífugo</td><td>Millipore-Sigma</td><td>UFC910008</td><td></td></tr><tr><td>SPSS software</td><td>IBM</td><td>versión 24.0</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin</td><td>Millipore-Sigma</td><td>L9504</td><td></td></tr></tbody></table>

represión del crecimiento de la célula del mieloma múltiple en vivo de nanotubos de carbono de pared simple (swcnt)-entregado oligos antisentido malat1

Repression of Multiple Myeloma Cell Growth In Vivo by Single-wall Carbon Nanotube (SWCNT)-delivered MALAT1 Antisense Oligos

Los nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT) es un nuevo tipo de nanopartícula, que se ha utilizado para ofrecer a varios tipos de drogas en las células, como las proteínas, oligonucleótidos y drogas sintéticas de molécula pequeña. El SWCNT tiene dimensiones personalizables, una gran área superficial y flexible puede enlazar con las drogas a través de diferentes modificaciones en su superficie; por lo tanto, es un sistema ideal para el transporte de drogas en las células. Larga noncoding RNAs (lncRNAs) son un grupo de RNA codifica más de 200 nt, que no puede ser traducido a proteína, pero juega un papel importante en procesos biológicos y fisiopatológicos. Adenocarcinoma pulmón metástasis asociadas 1 (MALAT1) es un lncRNA altamente conservado. Se demostró que niveles más altos de MALAT1 están relacionados con el pronóstico de varios tipos de cáncer, como mieloma múltiple (MM). Hemos revelado que MALAT1 regula ADN reparación y muerte celular en MM; así, MALAT1 puede considerarse como una diana terapéutica para m. Sin embargo, la entrega eficiente de oligo antisentido para inhibir/caída MALAT1 en vivo sigue siendo un problema. En este estudio, nos modificar SWCNT con PEG-2000 conjugar un oligo de anti-MALAT1 a él, prueba de la entrega de este compuesto en vitro, inyectar por vía intravenosa en un modelo de ratón MM diseminado y observar una inhibición significativa de la progresión de MM, que indica SWCNT es una entrega ideal para anti-MALAT1 gapmer ADN.

Para demostrar el efecto de inhibición de la gapmer anti-MALAT1 ADN en MM, había derribado de la expresión de MALAT1 y había usada en células H929 y MM.1S. Cuarenta y ocho horas más tarde, las células fueron recogidas para el análisis de la eficiencia de la precipitación y el estado de apoptosis en las células transfected con control DNA o anti-MALAT1 gapmer. resultados de qRT-PCR demostrados que anti-MALAT1 gapmer ADN derribado la expresión MALAT1 en H929 y MM.1S las células eficientemen...

Este manuscrito describe la síntesis de un nanotubo de carbono de pared simple (SWCNT)-conjugado MALAT1 gapmer antisentido DNA oligonucleotide (SWCNT-anti-MALAT1), que demuestra la entrega confiable de la SWCNT y el potente efecto terapéutico de anti-MALAT1 in vitro e in vivo. Métodos utilizados para la síntesis, modificación, verbal, y la inyección de SWCNT-anti-MALAT1 se describen.

Represión del crecimiento de la célula del mieloma múltiple en Vivo de nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT)-entregado Oligos antisentido MALAT1

The single-wall carbon nanotube (SWCNT) is a new type of nanoparticle, which has been used to deliver multiple kinds of drugs into cells, such as ...

El método que estamos utilizando aquí puede ayudar a empaquetar oligonucleótidos con nanotubo de carbono de pared única, que es un nuevo tipo de nanopartícula para la administración de fármacos. La principal ventaja de esta técnica es la entrega más eficiente de fármacos oligonucleótidos en células in vivo. Las implicaciones de esta técnica se extienden a la investigación de mieloma múltiple, porque ha introducido nanopartículas para mejorar la entrega de fármacos oligonucleótidos.A través de este método puede proporcionar información sobre el tratamiento para el mieloma múltiple. También se puede aplicar a otras enfermedades y conjugar con otra carga, como proteínas y moléculas pequeñas. En primer lugar, mezcle un miligramo de nanotubos de carbono de una sola pared, cinco miligramos de amina DSPE-PEG 2000 y cinco mililitros de agua esterilizada sin nucleasas en un vial de centelleo de vidrio de 20 mililitros.Sonicar el vial en un sonicador de baño de agua a un nivel de potencia de 90 vatios durante una hora a temperatura ambiente. Después de la sonicación, centrifugar el vial a 24.000 g durante seis horas. A continuación, recoja la solución de sobrenadante.Añada un mililitro de la solución de nanotubo de carbono de una sola pared a un dispositivo de filtro centrífugo de corte de peso molecular de 100 kilodalton seguido de cuatro mililitros de agua esterilizada sin nucleasa. Centrifugar durante 10 minutos a 4.000 g a temperatura ambiente para eliminar el exceso de amina. Agregue 0,5 miligramos de Sulfo-LC-SPDP a 450 microlitros del nanotubo de carbono de una sola pared funcionalizado por amina.A continuación, añadir 50 microlitros de 10x PBS, e incubar durante dos horas a temperatura ambiente. A continuación, añada la mezcla de reacción a un dispositivo de filtro centrífugo de corte de peso molecular de 100 kilos de kilodalton, seguido de cuatro mililitros de agua libre de nucleasas. Centrifugar la muestra durante 10 minutos a 4.000 g a temperatura ambiente para eliminar el exceso de Sulfo-LC-SPDP.Recoja la solución de nanotubo de carbono de una sola pared tratada con Sulfo-LC-SPDP que queda en el filtro y diluya con 500 microlitros de solución anti-MALAT1-Cy3 previamente preparada. Luego incubar la muestra a cuatro grados centígrados durante la noche. Para lograr los mejores resultados de la comparación, organice aleatoriamente 14 ratones en grupos de ensayo o control con siete en cada grupo, y con la misma relación hombre-mujer en cada grupo.A continuación, limpie el banco de operaciones y el esterilice con 70% de alcohol etílico. Utilice una lámpara de calentamiento para calentar uno de los ratones para ayudar a que aparezca la vena de la cola. Sujete el ratón correctamente con un limitador de inyección de cola.Inyectar células MM.1S-luc/mCherry en 50 microlitros de PBS a través de la vena de la cola. Presione el lugar de inyección con un hisopo de alcohol durante 30 segundos. A continuación, marque el ratón inyectado y devuélvalo a una jaula limpia.En el día siete, después de la inyección celular MM1S, inyecte 50 microlitros de PBS que contengan nanotubo de carbono de una sola pared anti-MALAT1 en la vena de la cola del ratón. A continuación, presione el lugar de inyección con un hisopo de alcohol durante 30 segundos. Observe el sangrado local en la cola y el comportamiento general del ratón durante un minuto, y luego devuélvalo a una jaula limpia.Observe todos los ratones inyectados de nuevo antes de devolver la jaula al bastidor para asegurarse de que las inyecciones se toleran bien. Pesar cada ratón antes de la disección. Recoger la sangre periférica del corazón para un ensayo completo de hemograma realizado por una máquina contadora de células sanguíneas.A continuación, recoja los tejidos de la médula ósea, el bazo, el ganglio linfático, el riñón y el tejido con metástasis visible. Extraiga ARN y proteína de las muestras de médula ósea. Arregla todos los tejidos restantes en formalina.Después de 24 horas de fijación, sumerja las muestras óseas en una solución EDTA de 0,5 molares durante cinco días para la descalcificación. A continuación, sumerja todas las muestras en 75% alcohol etílico para su almacenamiento a largo plazo. Los resultados de QRT PCR mostraron que el ADN anti-MALAT1 gapmeR derribó la expresión MALAT1 e indujo apoptosis significativamente en células H929 y MM.1S.Nanotubo de carbono de pared única anti-MALAT1-Cy3 fue entregado en el núcleo de las células MM, y suprimió significativamente el nivel ENDógeno MALAT1 en las células H929 y MM.1S. La viabilidad de la célula BMEC-1 no tiene ninguna diferencia significativa después del tratamiento del nanotubo de carbono de una sola pared anti-MALAT1-Cy3 o el control en diferentes dosis y puntos de tiempo. Esto indica que la toxicidad de nanotubos de carbono de pared única anti-MALAT1-Cy3 tiene una toxicidad limitada y aceptable para las células normales a dosis altas.Se estableció un modelo de ratón diseminado por MM humano para evaluar los efectos del tratamiento de nanotubos de carbono de una sola pared anti-MALAT1 in vivo. Las señales de luciferon de ratones en el grupo de tratamiento anti-MALAT1 de nanotubos de carbono de una sola pared fueron notablemente más bajas en comparación con el control después de 21 días de tratamiento. A partir de estos resultados, se concluyó que el tratamiento anti-MALAT1 de nanotubo de carbono de una sola pared a través de inyección intravenosa podría administrar los oligos anti-MALAT1 a las células tumorales de manera eficaz.No se observaron efectos secundarios significativos del tratamiento, lo que indica que la inyección anti-MALAT1 de nanotubo de carbono de una sola pared es un tratamiento seguro para ratones. Al intentar este procedimiento, es importante recordar que la composición de la molécula celular influirá en la entrega, eficiencia, y el efecto terapéutico de los fármacos oligonucleótidos. Siguiendo este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como la conjugación de proteínas o moléculas pequeñas para responder preguntas adicionales.Como usar nanotubos de carbono de una sola pared para suministrar otros medicamentos.

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Investigación

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Investigación del cáncer

Las células humanas de mieloma múltiple (MM) requieren el microambiente de apoyo de células mesenquimales y componentes de la matriz extracelular para la supervivencia y proliferación. Hemos establecido un modelo in vivo de embriones en pollo con células de mieloma y mesenquimales humanas injertadas para estudiar los efectos de fármacos contra el cáncer en el crecimiento tumoral, la invasión y la angiogénesis.

Establecimiento de un modelo de xenoinjerto Humano mieloma múltiple en el pollo para estudiar el crecimiento del tumor, la invasión y la angiogénesis

Aquí, describimos un método de microscopía de lapso de tiempo a largo plazo para rastrear longitudinalmente células individuales en respuesta a terapias contra el cáncer.

A través del espejo: Microscopía de lapso de tiempo y de seguimiento longitudinal de las células individuales para el Estudio de la terapéutica contra el cáncer

Aquí describimos la entrega de microRNA usando un serotipo de virus adeno-asociado recombinante 9 en un modelo de ratón de una enfermedad neuromuscular. Una sola administración periférica en ratones dio lugar a la sobreexpresión de miRNA sostenida en el músculo y neuronas del motor, proporcionando una oportunidad de estudio miRNA función y potencial terapéutico en vivo.

Entrega sistémica de microARN mediante Virus Adeno-asociado recombinante serotipo 9 para tratar enfermedades neuromusculares en roedores

Aquí utilizamos bioluminiscente, rayos x y emisión de positrones la tomografía/computado tomografía la proyección de imagen para estudiar cómo inhibidor mTOR actividad impactos tumores mieloma engrafted de médula ósea en un modelo de xenoinjerto. Esto permite fisiológicamente relevantes, no invasivo y multimodales análisis del efecto anti-mieloma de tratamientos contra tumores mieloma médula engrafted en vivo.

Proyección de imagen de tomografía multimodal bioluminiscente y emisión positrónica tomografía/computacional de xenoinjertos de médula ósea del mieloma múltiple en ratones NOG

Este protocolo describe los modelos de xenoinjerto y ratón ortotópico de la tumorigenesis tiroidea humana como una plataforma para probar los tratamientos inhibidores basados en microARN. Este enfoque es ideal para estudiar la función de los ARN no codificantes y su potencial como nuevas dianas terapéuticas.

En Vivo inhibición de MicroRNA para disminuir el crecimiento tumoral en ratones

miRNA la terapéutica tienen un potencial significativo en la regulación de la progresión del cáncer. Demostrado aquí son enfoques analíticos utilizados para la identificación de la actividad de un miRNA combinatoria tratamiento en detener el ciclo celular y la angiogénesis.

Análisis de miRNA combinatoria tratamientos para regular el ciclo de celular y la angiogénesis

Este trabajo describe la síntesis y caracterización de un homo-PROTAC bifuncional basado en pomalidomida como un enfoque novedoso para inducir la ubiquitinación y degradación de la e3 ubiquitina ligreblon (CRBN), el objetivo de los análogos de la talidomida.

Inactivación química del E3 Ubiquitin Ligase Cereblon por Homo-PROTACs basados en Pomalidomida

Aquí, describimos un método para suministrar medicamentos al sistema nervioso central de la rata mediante la implantación de un catéter en el espacio intratecal lumbar de la columna vertebral. Nos centramos en la entrega de oligonucleótidos antisentido, aunque este método es adecuado para la entrega de otras modalidades terapéuticas también.

Entrega intratecal de oligonucleótidos antisentido en el sistema nervioso central de Rata

Aquí, describimos el protocolo para la administración in vivo de nanopartículas magnéticas de óxido de hierro portadoras de oligómeros de ARN al cáncer de mama metastásico en modelos animales, proporcionando un enfoque clínicamente viable para el silenciamiento terapéutico de ácidos nucleicos oncogénicos.

Monitorización de la acumulación de nanofármacos en metástasis de cáncer de mama murino

La barrera hematoencefálica es un obstáculo importante en la administración de terapias para el glioblastoma, una enfermedad para la que no hay cura. Aquí, reportamos una nano plataforma terapéutica de óxido de hierro guiada por imágenes in vivo que puede eludir esta barrera fisiológica en virtud de su tamaño y acumularse en el tumor.

Entrega de nanopartículas de una carga útil de oligonucleótidos en un modelo animal de glioblastoma multiforme

Aprende a empaquetar oligonucleótidos con nanotubos de carbono de pared simple para mejorar la entrega de fármacos en células de mieloma múltiple. Este método potencia tratamientos terapéuticos in vivo.

Represión del crecimiento de la célula del mieloma múltiple en Vivo de nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT)-entregado Oligos antisentido MALAT1 (Video) | JoVE Journal

Represión del crecimiento de la célula del mieloma múltiple en Vivo de nanotubos de carbono de pared simple (SWCNT)-entregado Oligos antisentido MALAT1

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