Un ensayo de la matanza de esferoide por las células de T automóvil

Este método puede ayudar a responder a preguntas clave en el campo de la inmunoterapia sobre la evaluación de la citotoxicidad de las células inmunitarias contra las células tumorales de la estructura 3D. Las principales ventajas de este método son que es sencillo y combina tecnología de imagen avanzada y un ensayo inmunológico sensible. Comience lavando la línea de interés de la célula de cáncer colorrectal con cinco mililitros de PBS y retirando las células del fondo del matraz con 0,5 mililitros de trippsina durante cinco minutos a 37 grados centígrados.

Después de confirmar el desprendimiento bajo un microscopio, neutralice la enzima de disociación celular con 10 mililitros de medio completo y recoja las células por centrifugación. Resuspender el pellet en cinco mililitros de medio fresco completo para contar y resuspender las células a una concentración de 1,5 veces 10 a las terceras células por mililitro. A continuación, sembrar 200 microlitros de células en cada pozo de placa inferior redonda de 96 pozos y colocar la placa en un aparato de imágenes automatizado dentro de una incubadora de 37 grados Celsius con 5% de CO2 y 95% de humedad.