Name: Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: Aprende análisis de huella y prueba de colgante de bajo costo para evaluar trastornos del movimiento en ratones sometidos a estrés de retención crónico. Este protocolo permite detectar fenotipos motores sin equipos costosos.

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Este trabajo fue apoyado por KAKENHI de JSPS (sociedad japonesa para la promoción de la ciencia) (subvenciones para investigación científica), conceder subsidios de universidades privadas y número 18K 07373 (H.S.).

Todos los experimentos con animales se realizaron en forma humana. La institucional Animal experimento Comité de Jichi Universidad médica aprobó el estudio. El estudio se realizó conforme a la regulación institucional experimento Animal y pautas fundamentales para la correcta conducta de Animal experimento y actividades afines en instituciones académicas de investigación bajo la jurisdicción del MEXT de Japón. Ratones en este protocolo han sido descrito previamente21.
1. colgar la caja de prueba
<ol><li>Registrar el peso de cada ratón. Marque la cola Pen de la marca para la discriminación individual (por ejemplo., una línea, doble líneas y líneas triples). Nota: Se utilizan las curvas de crecimiento de un índice de salud general22.</li>
	<li>Coloque el ratón en la sala experimental por lo menos 30 min antes de la prueba de comportamiento. Establecer el cuadro de la suspensión, que consiste en una caja transparente (25 x 25 x 40 cm3) con una tapa de malla giratorio en la parte superior (figura 1). La tapa de la malla puede ser rotada a lo largo de una barra central para que la tapa se gira 180 grados.</li>
	<li>Poner un ratón en el centro de la tapa de malla. Baje la tapa de la malla lado cuidadosamente.</li>
	<li>Medir la latencia de la caída (tiempo de la suspensión) del ratón de la tapa de malla. Nota: Si el ratón no se dentro de 5 min, registrar la latencia como 5 minutos.</li>
	<li>Volver el ratón a la jaula del hogar. Limpie la caja colgante con etanol al 70% después de cada prueba.</li>
</ol>2. huella análisis
Nota: Tras la caja colgante prueba, realizar el análisis de huella.
<ol><li>
Configurar el Pista de aterrizaje (Figura 2A).<ol>
<li>Cortar un trozo de papel blanco (29,7 cm x 42 cm x 0.09 mm) longitudinalmente en tres tiras de igual ancho. Fijar un trozo del libro blanco (9,9 cm x 42 cm) sobre la mesa.</li>
		<li>Poner la caja de gol oscuro en el extremo distal del papel. Poner otras cajas (aproximadamente la misma longitud que el del papel) con las paredes a ambos lados de la pista, evitando el escape de los ratones.</li>
		<li>Poner tinta negra y tinta roja en platos de Petri separadas (35 mm de diámetro).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sesión de entrenamiento. Nota: Llevar a cabo la sesión de entrenamiento sólo a 4 semanas de edad.<ol>
<li>Poner un ratón en el extremo proximal del papel (cara de la cabeza hacia la caja de gol). Deja el ratón a pie desde el extremo proximal a la caja de gol. Quitar el ratón de la caja de gol. Si el ratón se detiene en el papel, empuje suavemente el ratón hacia la caja de gol por el dedo.</li>
		<li>Sujete el mouse agarrando el pescuezo entre los dedos pulgar e índice para limitar el movimiento de las extremidades anteriores. Luego, sostenga la espalda y la cola entre la bola del pulgar y los otros dedos para limitar el movimiento de miembros posteriores. Nota: Insuficiente explotación del ratón resulta en manchas blancas /negras de la tinta en la ropa.</li>
		<li>Sumergir la parte inferior de extremidades anteriores en tinta roja y la parte inferior de miembros posteriores en tinta negra. Inmediatamente ponga el ratón en el extremo proximal del papel (cara de la cabeza hacia la caja de gol). Deja el ratón a pie desde el extremo proximal a la caja de gol. Si el ratón se detiene en el papel, empuje suavemente el ratón hacia la caja de gol por el dedo.</li>
		<li>Quitar el ratón de la caja de gol. Ir a la sesión de prueba.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sesión de prueba.
	<ol>
<li>Tras la sesión de entrenamiento, establecer el cauce para huellas con una nueva pieza de corte de papel blanco.</li>
		<li>Sujete el mouse agarrando el pescuezo entre los dedos pulgar e índice para limitar el movimiento de las extremidades anteriores. Luego, sostenga la espalda y la cola entre la bola del pulgar y los otros dedos para limitar el movimiento de miembros posteriores.</li>
		<li>Sumergir la parte inferior de extremidades anteriores en tinta roja y la parte inferior de miembros posteriores en tinta negra. Inmediatamente ponga el ratón en el extremo proximal del papel. Deja el ratón a pie desde el extremo proximal a la caja de gol. Nota: Porque los ratones prefieren la oscuridad, caminar se convierte en más estable como el ratón acerca a la caja de gol oscuro. Si el ratón se detiene en el papel, empuje suavemente el ratón hacia la caja de gol por el dedo. Entonces, si no se obtienen huellas confiables para el análisis (véase el paso 2.4. Análisis de huellas para detalles) porque el ratón se detiene, vuelva a intentar la sesión de prueba.</li>
		<li>Volver el ratón a la estructura de la casa de la caja de gol. Limpie la caja de gol con etanol al 70% después de cada sesión de prueba. Seque el papel impreso de pie.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análisis de huellas
	<ol>
<li>Obtener tres mediciones de cada parámetro (paso longitud de miembros anteriores y posteriores, delantero y trasero anchos de base, se superponen entre la extremidad delantera y trasera, figura 2B) con una regla de papel impreso de pie. Nota: Porque huellas de extremos proximales y distales con frecuencia muestran grandes variaciones debido a la parada o funcionamiento, elegir la parte con un patrón del paso constante de huellas. La parte media del pie impreso papel generalmente es adecuada para el análisis.<ol>
<li>Para la longitud de zancada, medir las distancias entre las mismas partes de la pata (por ejemplo, almohadilla de la pata o del dedo del pie).</li>
			<li>Para el delantero ancho base, trazar una línea entre huellas delanteras derecha (o izquierdas) consecutivos. Luego, mida la longitud de la línea vertical de la almohadilla de la huella delantera izquierda (o derecha) a la línea trazada entre las huellas de la derecha (o izquierdas).</li>
			<li>Para la anchura base trasera, trace una línea entre huellas traseras (izquierdas o derecha) consecutivos. Luego, mida la longitud de la línea vertical de la almohadilla de la huella trasera izquierda (o derecha) a la línea trazada entre las huellas de la derecha (o izquierdas).</li>
			<li>Superposición, mida la distancia entre teclas de la izquierda (o derecha) frente y huellas traseras.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Promedio de las tres medidas para cada individuo. Utilice la media individual de cada parámetro para el análisis estadístico.<ol>
<li>Para la longitud de zancada, use el promedio de los promedios individuales de los avances de la izquierda y derecho.</li>
			<li>Asimetría de longitud de zancada, utilizar el valor absoluto de la diferencia entre promedios individuales del miembro izquierdo y longitud de zancada de la extremidad derecha.</li>
			<li>Para el análisis estadístico de los otros parámetros (ancho base delantero, ancho base trasera y superposición), utilizar la media individual directamente.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. sistema de seguridad para carga de estrés
<ol><li>
Preparación de tubos de sujeción.
	<ol>
<li>Hacer 16 hoyos (aproximadamente 2 mm de diámetro) en un tubo cónico de 50 ml (30 mm de diámetro x 115 mm de longitud) a lo largo de las marcas de la escala (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 mL) y la parte trasera de cada escala marca con un taladro cuadrado (figura 3). Hacer un agujero en la punta del tubo cónico de 50 mL (aproximadamente 5 mm de diámetro) para respirar por el corte la punta. Hacer un hueco (aproximadamente 4 mm de diámetro) en la tapa del tubo para pasar la cola de los ratones.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Carga de estrés
	<ol>
<li>Colocar los ratones en la habitación experimental.</li>
		<li>Sostenga un ratón agarrando el pescuezo entre el pulgar y el dedo índice. Introduzca el ratón en el tubo de retención de la cabeza. Pasar la cola por el orificio de la tapa. Cierre la tapa. Nota: Limitar el movimiento del miembro anterior, ya que ratones rechazan entrar en el tubo por los miembros anteriores.</li>
		<li>Mantenga el ratón incluido por 2 h en una mesa a temperatura ambiente. Retire el ratón desde el tubo de retención y vuelva a la jaula casera. Nota: Los tubos de retención pueden ser reutilizados después de un lavado y seco.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. experimental horario (Figura 4):
<ol><li>Realizar el colgante caja de prueba y el análisis de la huella en el mismo día a las 4 semanas de edad (consulte el paso 1. Colgante caja de prueba y paso 2. Análisis de la huella para obtener más información) como una medida de línea de base en todos los ratones antes de la agrupación en 'estrés grupo' y ' sin estrés '. Nota: Sobre 8-10 ratones en camadas de 2-3 pueden ser convenientes utilizar en un experimento. Análisis de la huella a las 4 semanas de edad consiste en sesiones de entrenamiento y prueba.</li>
	<li>Dividir los ratones, al azar, un 'estrés grupo' y ' sin estrés '. Nota: Cuando los ratones se utilizan consisten en varias camadas, dividir hermanos de camada en ambos grupos. Número en cada grupo se compone de unos 4-5 ratones.</li>
	<li>Aplicar la tensión de restricción al grupo de estrés 6 veces en el transcurso de dos semanas (vea el paso 3. Tensión de seguridad carga para más detalles). Nota: 6 veces de retención se aplican cada dos semanas, seguido de un colgante caja análisis de prueba y huella de 6-12 semanas de edad. No aplique la tensión del sistema de seguridad para el día de la prueba de colgar la caja de prueba y el análisis de huella.</li>
	<li>Realizar el colgante caja de prueba y la sesión de la prueba de análisis de la huella en el mismo día en 6, 8, 10 y 12 semanas de edad.</li>
</ol>

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<li>Chu, X., Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((24-hour-restraint+stress+induces+long-term+depressive-likephenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">24-hour-restraint stress induces long-term depressive-likephenotypes in mice.</a> Scientific Reports. 6, 32935(2016).</li>
<li>Freeman, M. L., Sheridan, B. S., Bonneau, R. H., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychological+Stress+Compromises+CD8%2B+T+cell+control+of+latent+herpes+simplex+virus+type+1+infections%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Psychological Stress Compromises CD8+ T cell control of latent herpes simplex virus type 1 infections.</a> The Journal of Immunology. 179 (1), 322-328 (2007).</li>
<li>Lauretti, E., Di Meco, A., Merali, S., Praticò, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+behavioral+stress+exaggerates+motor+deficit+and+neuroinflammation+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Chronic behavioral stress exaggerates motor deficit and neuroinflammation in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Translational Psychiatry. 6, e733(2016).</li>
<li>Quartermain, D., Stone, E. A., Charbonneau, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+stress+disrupts+risk+assessment+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Acute stress disrupts risk assessment behavior in mice.</a> Physiology and Behavior. 59 (4-5), 937-940 (1996).</li>
<li>Bannon, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBannon%2C+D+%22The+Behavioural+effects+of+stress+and+aluminum+toxicity+on+a+mouse+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+Parkinsonism-dementia+complex%22">The Behavioural effects of stress and aluminum toxicity on a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis Parkinsonism-dementia complex</a>. , 1-186 (2015).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El análisis de la huella y la caja colgante prueba Test conductual simple y barato para la función motora de los ratones. Los fenotipos de neurobehavioral en varios modelos de ratón han sido correctamente detectados por estas pruebas. Por ejemplo, acortar la longitud de zancada en esclerosis lateral amiotrófica24, mayor longitud de zancada asimétrica en la ataxia-telangiectasia25, mayor longitud de la superposición de la enfermedad de Huntington26 y ...

Trastornos del movimiento se definen como alteraciones del sistema nervioso, mostrando un exceso o falta de movimientos voluntarios o automáticos1. En particular, disturbio del paso se documenta con frecuencia entre los pacientes con trastornos de movimiento2,3,4. Por lo tanto, análisis de la marcha es una prueba de comportamiento adecuada para la validación de modelos animales de trastornos del movimiento. En ratones, análisis de la marcha automática se han realizado para caminar a velocidad natural5 y a las velocidades ajustables por cinta de correr6,7. Estos análisis ofrecen resultados cuantitativos de la marcha automáticamente. Un método alternativo para detectar la alteración de la marcha se llama análisis de huella. Después de etiquetar los fondos de los pies con tinta, ratones caminando sobre el papel, y se analizan las huellas. Inicialmente, vaselina y carbón en polvo se utilizaron para visualizar la huella8y luego fueron reemplazados por tinta sobre papel de polígrafo9 y revelador fotográfico papel fotográfico10. Un método más barato y menos tóxico con tinta y el papel que los otros métodos sigue siendo hasta la fecha11. Análisis de la huella es menos costoso en comparación con análisis automatizado5,6,7 y serían útil para evaluar los trastornos del movimiento en modelos de ratón para los investigadores sin fondos de abundante investigación .
El colgante caja de prueba es una clase de cuatro extremidades colgantes pruebas con alambre jaula tapa12 y13de la pantalla de malla de alambre. La caja es un aparato con la tapa de la malla rotativa en la tapa de la caja a lo largo de una barra central. Además de análisis de la marcha, puede se realizar el examen fácilmente y económicamente. Por lo tanto, llevamos a cabo el colgante caja de prueba para evaluar la fuerza de agarre y el equilibrio, además para el análisis de la huella en el presente Protocolo.
El estrés induce los síntomas de trastornos de movimiento14,15. Déficit motor es inducido a menudo por varias tensiones crónicas aun cuando ningún fenotipo motor espontáneo se observa en los modelos de ratón de un desorden de movimiento16,17,18. Moderación es uno de los métodos comúnmente usados para tensión de carga en los ratones, porque el animal no está físicamente dañado19 y costo menos comparado con otros métodos como descargas eléctricas con aparato dedicado y forzado con el uso de una caminadora. Restricción por un tubo, que se realiza en confinamiento de un ratón en un tubo cónico de 50 mL agujereado, es más fácil que otros métodos tales como alambre de malla de tamiz, extremidades con cinta y envoltura de animal con una gasa (ha comentado20). En este artículo, resumimos los protocolos de la huella de análisis y el cuadro del colgante de prueba después de moderación por un tubo. Este protocolo nos ayudaría a utilizar modelos de ratón de trastornos del movimiento sin fenotipo motor espontáneo.

<table><tbody><tr><td>Caja colgante</td><td>O' Hara & Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/</td><td></td></tr> <tr><td>Rotulador</td><td>ZEBRA</td><td>MO-120-MC-BK</td><td></td></tr><tr><td>Caja de portería</td><td>O' Hara & Co.</td><td>http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/</td> <td>Accesorio para aparatos de prueba de haz equilibrado</td></tr><tr><td>Cajas</td><td>O' Hara & Co.</td><td>-</td><td>Pared lateral de la pista</td></tr><tr><td>Tinta negra</td><td>Shin-asahi-Tinta</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>roja</td><td>Maruyamakogyo</td><td>BC-6</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petri Desechable</td><td>Corning</td><td>351008</td><td>Placas de Petri (35 mm de diámetro)</td></tr><tr><td>Askul Multipaper Super White J Monochrome A3</td><td>Askul</td><td>701-712</td><td>Papel blanco (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)</td></tr><tr><td>50 mL Tubo cónico</td><td>Corning</td><td></td><td></td>430829</tr><tr><td>Taladro cuadrado</td><td>FÁBRICA DE BRICOLAJE DE KAKURI Corporation (K32-0313)</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Disturbio del paso se observa con frecuencia en pacientes con trastornos del movimiento. En modelos de ratón utilizados para trastornos del movimiento, análisis de la marcha es prueba de comportamiento importante para determinar si los ratones imitan los síntomas de los pacientes. Déficit motor es a menudo inducida por el estrés cuando no fenotipo motor espontáneo se observa en los modelos de ratón. Por lo tanto, el análisis de la marcha siguió por la tensión de carga sería un método sensible para evaluar el fenotipo motor en modelos de ratón. Sin embargo, los investigadores enfrentan la exigencia de un aparato costoso para obtener automáticamente resultados cuantitativos de análisis de la marcha. Para estrés, tensión carga por métodos simples sin aparatos costosos necesarios para la descarga eléctrica y forzado a correr es deseable. Por lo tanto, presentamos un protocolo simple y de bajo costo que consiste en análisis de la huella con tinta y papel colgante caja de prueba para evaluar la función motora, y carga de estrés por restricción con un tubo cónico. El déficit motor de los ratones con éxito fueron detectado por este protocolo.

Los ratones machos heterocigotos de Atp1a3 (Atp1a3+ / −) que son el modelo de ratón para inicio rápido distonía parkinsonismo y hermanos de camada de tipo salvaje fueron utilizados en este protocolo. Atp1a3+ / − mostraron significativamente más cortos longitudes de zancada de la extremidad delantera y trasera que las del tipo salvaje en 4 semanas de edad (figura 5A y figura 5B, abr...

El protocolo de bajo costo que consiste en análisis de la huella y colgante caja de prueba después de sistema de seguridad para el estrés es útil para evaluar los trastornos de movimiento del modelo del ratón.

Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...

Nuestro protocolo mediante el análisis de la marcha es muy útil para determinar si los motores de ratón de los trastornos del movimiento imitan el síntoma del paciente con alteración de la marcha. Por lo tanto, el análisis de la marcha en la prueba de carga de tensión se puede realizar fácilmente, y sin equipos caros, para detectar ciertos fenotipos motores en ratones, sin efectos espontáneos. Antes de iniciar la prueba de comportamiento, registre el peso de cada ratón y use un lápiz de marcado para etiquetar cada cola.Cuando todos los animales hayan sido pesados y marcados, coloque los ratones en la sala experimental durante al menos 30 minutos, y coloque una caja colgante transparente, de 25 por 25 por 40 centímetros, con una tapa de malla giratoria, en el banco de laboratorio. Cuando los ratones se hayan aclimatada, coloque un ratón en el centro de la tapa de malla y gire cuidadosamente la tapa boca abajo. A continuación, mida la latencia de caída del ratón desde la tapa de malla, antes de devolver el ratón a su jaula de inicio.Cuando todos los ratones hayan sido probados, coloque un pedazo de papel blanco de 9,9 por 42 centímetros en el banco del laboratorio y coloque una caja de gol oscura en el extremo distal del papel. Coloque otras cajas, aproximadamente de la misma longitud que el papel, a ambos lados de la pista para evitar el escape. Y agregue tinta negra y roja para separar los platos de Petri de 35 mililitros.Para entrenar a los ratones para el análisis, coloque un ratón en el extremo proximal del papel, frente al cuadro de objetivos, y deje que el ratón camine desde el extremo proximal del papel hasta el cuadro de meta. Cuando el ratón llega a la caja, raspa suavemente al animal, metiendo la espalda y la cola entre la bola del pulgar y los otros dedos, para limitar el movimiento de las extremidades posteriores. Y sumerja los fondos de las extremidades delanteras en tinta roja, y la parte inferior de las extremidades posteriores en tinta negra.A continuación, vuelva a colocar el ratón en el extremo proximal del papel, frente al cuadro de objetivos, y deje que el ratón camine desde el extremo proximal hasta el cuadro de meta. Después de secar al aire el papel impreso del pie, utilice una regla para obtener tres medidas de la longitud de la zancada, midiendo las distancias entre las mismas partes de las huellas de la pata. Del ancho de la base frontal, dibujando una línea entre huellas delanteras consecutivas, del mismo lado, y midiendo la longitud de la línea vertical desde la almohadilla de la huella frontal, hasta la línea trazada entre las huellas.Y del ancho de la base posterior, dibujando una línea entre las huellas traseras derechas consecutivas, y midiendo la longitud de la línea vertical desde la almohadilla de la huella trasera izquierda, hasta la línea trazada entre las otras huellas derechas. Para la superposición, mida la distancia entre las almohadillas de las huellas delanteras y traseras. Para preparar un tubo de retención, utilice un taladro cuadrado para hacer 16 agujeros de dos milímetros en un tubo de 50 mililitros a lo largo de las marcas de la escala, y la parte posterior de cada marca de escala.Cortar la punta del tubo para hacer un agujero de cinco milímetros, para respirar, y hacer un agujero de cuatro milímetros en la tapa del tubo, para la cola. Para la prueba de carga de tensión, raspa un ratón y coloca al animal en la cabeza del tubo de sujeción primero, con las extremidades delanteras confinadas suavemente. Pase la cola a través del orificio de la tapa antes de tapar el tubo.Y coloque el ratón en la mesa durante dos horas a temperatura ambiente. Al final del período de carga de tensión, retire el ratón del tubo y devuelva al animal a su jaula de origen. Como se observa en estas figuras representativas, los ratones modelo de distonismo de inicio rápido heterocigoto del Parkinsonismo, demuestran longitudes de zancada delantera y posterior significativamente más cortas, que sus compañeros de basura de tipo salvaje a las cuatro semanas de edad.Los ratones modelo de distonismo de inicio rápido heterocigoto de estrés, también exhiben longitudes de zancada significativamente más cortas de ambas extremidades que las de las familias de basura de tipo salvaje estresadas a las ocho semanas de edad. Las asimetrías de las longitudes de zancada de ambas extremidades no son significativamente diferentes, en ningún grupo de ratones, a cualquier edad. La base frontal y las superposiciones de ambas extremidades también son similares, en todos los grupos, a todas las edades.La base posterior es significativamente más ancha en estos ratones modelo de pismismo de distonía heterocigota de inicio rápido estresado, que la observada en los animales de tipo salvaje de estrés a las 10 semanas de edad, lo que indica que el estrés causa déficit motor en ratones modelo de disctonismo de inicio rápido heterocigoto De Parkinson. No se observan diferencias significativas en el tiempo de ahorcamiento, entre el tipo salvaje y el mutante, en animales de cuatro a 10 semanas de edad. A las 12 semanas de edad, sin embargo, el tiempo de suspensión de los ratones de tipo salvaje de estrés es significativamente más largo que el de los otros animales, lo que sugiere que el déficit motor en ratones modelo de distonía de inicio rápido heterocigoto Parkinson, se distingue de ratones de tipo salvaje por prueba de restricción en animales mayores.Coloque el ratón sobre el papel inmediatamente después de que el ratón cuelgue la parte inferior de las extremidades en la tinta para evitar que la tinta se seque antes de la prueba a pie. Se pueden realizar pruebas adicionales para las características emocionales, como campo abierto, más laberinto elevado y prueba de natación completa, para responder si la anormalidad de la marcha resulta de sólo déficit motor. Nuestro protocolo se puede utilizar para explorar la susceptibilidad al estrés, cambiando el número y la duración de la carga de tensión, y comparando fenotipos del motor entre varias condiciones de carga.Nuestro protocolo se puede utilizar para explorar la susceptibilidad al estrés cambiando el número y la duración de las cargas de tensión, y comparando fenotipos del motor entre varias condiciones de carga.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

La prueba de la cola de suspensión se valida como un procedimiento experimental para evaluar la eficacia de los tratamientos farmacológicos antidepresivos en ratones. Los ratones son suspendidos por la cola durante seis minutos y escapar de conductas relacionadas con la evaluación son. Se describen los procedimientos utilizados en la realización de la prueba de suspensión de la cola.

La prueba de la suspensión trasera

En este video, describimos el procedimiento de prueba de pisada y el análisis relacionado para evaluar la marcha y la coordinación motora en ratones.

Evaluación de la marcha mediante el análisis de la huella: un método para probar la coordinación motora en ratones

El protocolo de estrés crónico leve impredecible (UCMS) es un método validado para estudiar los cambios conductuales y fisiológicos asociados con el estrés crónico y los síntomas depresivos. Ocho semanas de imposición del protocolo UCMS induce cambios de comportamiento y malos resultados de salud en roedores de ambos sexos.

Un protocolo de estrés leve crónico impredecible para los síntomas depresivos, instigar cambios de comportamiento y los resultados de salud negativos en los roedores

Aquí presentamos el protocolo de estrés leve crónico impredecible en ratones. Este protocolo induce un depresivo-como el fenotipo a largo plazo y permite evaluar la eficacia de los antidepresivos putativos en la reversión de los déficits depresivos-como comportamiento y neuromolecular.

El protocolo de estrés leve crónico impredecible para inducir la Anhedonia en ratones

Una batería de pruebas de comportamiento integral de las habilidades motoras, estado de ánimo, incluyendo la interacción social, depresión y ansiedad — y cognición está diseñada para la evaluación repetida de cambios de comportamiento relacionados con la neurodegeneración en ratones.

Una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones

Este artículo proporciona un protocolo simplificado y estandarizado para la inducción de un comportamiento depresivo en ratones inmovilizados crónicamente mediante el uso de un restrainer. Además, se explican las técnicas fisiológicas y de comportamiento para verificar la inducción de la depresión.

Un Protocolo de Estrés de Inmovilización Crónica para Inducir el Comportamiento Similar a la Depresión en Ratones

Este artículo describe una técnica de manejo en ratones, la técnica de manejo 3D, que facilita el manejo de rutina al reducir los comportamientos similares a la ansiedad y presenta detalles sobre dos técnicas relacionadas existentes (manejo de túnel y cola).

Técnicas de manejo para reducir el estrés en ratones

La prueba de seguridad y amenaza social permite una evaluación simultánea del desarrollo de la evitación social como una medida del aprendizaje condicionado aversivo y la capacidad de discriminación de la seguridad y la amenaza social, ambas utilizadas para identificar individuos susceptibles al estrés y resistentes al estrés dentro de un solo grupo de ratones machos crónicamente derrotados socialmente.

Una prueba de seguridad y amenaza social descubre fenotipos relacionados con el estrés psicosocial

Mediante la integración de cuatro estresores sociales diarios, el presente estudio describe un modelo de estrés social integrado múltiple (MISS) para trastornos psiquiátricos en ratones hembra C57BL/6J. Después de diez días de exposición repetida a MISS, los ratones desarrollaron fenotipos depresivos y similares a la ansiedad, proporcionando así un modelo animal natural basado en la etiología para estudiar los trastornos psiquiátricos en sujetos femeninos.

Un modelo de estrés social integrado múltiple para trastornos psiquiátricos en ratones hembra C57BL/6J

Este artículo cubre los procedimientos para inducir respuestas al estrés utilizando el estrés de restricción física en ratones y ratas. Se discuten las consideraciones adicionales que deben observarse al seleccionar y usar el estrés de restricción en modelos de roedores.

Restricción para inducir estrés en ratones y ratas

Aprende análisis de huella y prueba de colgante de bajo costo para evaluar trastornos del movimiento en ratones sometidos a estrés de retención crónico. Este protocolo permite detectar fenotipos motores sin equipos costosos.

Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica (Video) | JoVE Journal

Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica

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