Tres procedimientos de laboratorio para la evaluación de diversas manifestaciones de la impulsividad en las ratas

La realización de procedimientos conductuales para evaluar la impulsividad en ratas proporciona una visión de la base ambiental, neurofisiológica y neuroquímica de la impulsividad, es decir, sobre los factores que desencadenan y subyacen a esos comportamientos. Este protocolo permite el estudio de la impulsividad con un buen equilibrio de eficiencia y accesibilidad, e instrucción de datos adecuados para el análisis cuantitativo. El rendimiento en estos protocolos puede ser considerado como un análogo de impulsividad en los seres humanos.

Por lo tanto, las versiones humanas de ellos sirven para el diagnóstico y tratamiento de trastornos psiquiátricos relacionados como el TDAH o el juego patológico. Demostrando el procedimiento con Patsy Moreno serán Gustavo Lago, un técnico, y Pablo Saavedra, un estudiante de pregrado de nuestro laboratorio. Después de iniciar el régimen de restricción de alimentos, añadir 60 pellets de alimentos al recipiente alimentario para habituar la neofobia alimentaria antes de introducir las ratas en las cámaras de acondicionamiento sin el inicio de ningún protocolo durante 30 minutos para habituar las respuestas de exploración.

Después de la etapa de habituación, introducir las ratas en las cámaras de acondicionamiento para dos sesiones diarias adicionales de 30 minutos de entrega de un pellet de alimentos cada 45 segundos para ayudar a las ratas a identificar la fuente de los pellets. Para la elección intertemporal y el refuerzo diferencial de bajas tasas de respuesta, o protocolos DRL, coloque una o dos palancas en la cámara y entregue alimentos para cada prensa de nivel junto con una entrega gratuita de pellets de alimentos cada 45 segundos. Para un protocolo de elección intertemporal, seleccione los valores para el retraso y la magnitud de la recompensa.

Por ejemplo, las opciones para la alternativa más grande-posterior, o LL, entregan cinco pellets de alimentos después de un retraso fijo de 20 segundos y las opciones para el pequeño-antes, o alternativa de SS, entregar un pellet de alimentos inmediatamente. Seleccione un criterio de acabado y finalice las sesiones automáticamente después de completar el criterio especificado, por ejemplo, después de 40 pruebas de opción o después de 50 minutos. Combine cada alternativa con una palanca dentro de la cámara de acondicionamiento, contrapesando la lateralidad de las alternativas entre los sujetos, y haga que las alternativas SS y LL estén disponibles en la realización de un cronograma de intervalo variable.

En las pruebas de libre elección, cuando se presiona una de las palancas después de que haya transcurrido un cierto intervalo, se activará la alternativa asociada. Ambas palancas se retraerán, y se activará la consecuencia asociada con las alternativas SS o LL después de la realización de un cronograma de refuerzo de intervalo variable. Después de la entrega de la recompensa, realice una condición de tiempo de espera, ajustando la duración de esta condición para equiparar la duración media de los intervalos intertriales para ambas alternativas.

La siguiente prueba de elección comienza después de la finalización del tiempo de espera. Si un sujeto selecciona una alternativa para dos pruebas consecutivas, el programa determinará que el siguiente ensayo será una prueba forzada de la alternativa restante, es decir, en el próximo ensayo, ambas palancas estarán disponibles, pero solo una funcionará para asegurarse de que el sujeto experimente los resultados asociados con ambas alternativas. Para la programación DRL, seleccione el valor del tiempo mínimo después del cual responder producirá una recompensa.

Después del comienzo de una sesión o después de cualquier respuesta de pulsación de palanca, inicie un temporizador de cuenta atrás desde el valor de tiempo seleccionado a cero. Si el sujeto muestra una respuesta antes de que el temporizador alcance el valor de cero, el temporizador se restablecerá para que el sujeto debe esperar una nueva oportunidad para obtener una recompensa. Si el sujeto emite una respuesta después de que el temporizador alcance el valor de cero, entregue un pellet de comida.

El temporizador se reiniciará después de dos segundos para permitir que el animal consuma el pellet. Para la discriminación negativa de características, seleccione primero las duraciones de los estímulos, las duraciones del intervalo intertrial y los criterios de finalización de las sesiones. Después de presentar un estímulo A en ensayos A-plus, entregar un pellet de alimentos.

Después de presentar el mismo estímulo A acompañado de un estímulo adicional X en ensayos AX-menos, no entregue ningún alimento. Después de configurar los protocolos en el software informático, limpie las paredes interiores, el techo y el suelo de la parrilla de las cámaras de operación con una solución desinfectante adecuada para eliminar los olores de las sesiones anteriores o estudios anteriores. Utilice el ordenador para activar y supervisar manualmente las entradas y salidas cruciales para asegurarse de que funcionan y comprobar que el dispensador de alimentos contiene suficiente comida para ser entregado durante la sesión.

Mueva las jaulas de la carcasa con las ratas dentro cerca de las cámaras de acondicionamiento, y abra la jaula de la carcasa. Coloque suavemente la rata en su cámara de acondicionamiento correspondiente antes de cerrar las cámaras de acondicionamiento en las conchas aislantes. Inicie el programa y espere hasta que finalice el programa.

Si los datos no se guardan automáticamente, guarde los archivos de salida de la sesión en la unidad del equipo o en otro lugar. Cuando el programa haya terminado, devuelva suavemente a las ratas a sus jaulas de alojamiento correspondientes y dé alimentos complementarios a los animales de acuerdo con el régimen de restricción de alimentos seleccionado. En este procedimiento de elección intertemporal, la relación de registro de la tasa de respuesta de palanca asociada con la alternativa de las SS fue mayor en ratas espontáneamente hipertensas en comparación con ratas de tipo salvaje, lo que sugiere que las ratas modelo de TDAH prefieren una recompensa inmediata a expensas de una alternativa más rica pero retrasada.

En este experimento representativo del protocolo DRL, los datos longitudinales de una sola rata con una restricción temporal de 10 segundos en la respuesta demuestran que con el tiempo, el animal adquirió experiencia en la tarea, finalmente aprendiendo a responder alrededor de 10 segundos. Este experimento farmacológico puso a prueba si el rendimiento impulsivo en un procedimiento de DRL con una restricción temporal de 10 segundos disminuyó con un tratamiento que consiste en niveles bajos de un fármaco antipsicótico. Las gráficas de densidad azul representan la distribución de las respuestas cuando se administra la solución salina, y las parcelas de salmón representan la distribución de dichas respuestas cuando se administró haloperidol.

Las gráficas superiores incrustadas muestran tasas de respuesta, y las más bajas muestran tasas de recompensa para la solución salina y el haloperidol con el mismo código de color que las gráficas anteriores. Cabe señalar que la tasa de respuesta se redujo de tres a cinco sujetos, específicamente para aquellos sujetos con una alta proporción de respuestas de ráfaga en la condición salina. Típicamente, en el protocolo de discriminación característica negativa, responder durante el estímulo único más ensayos alimentarios y durante el estímulo compuesto sin ensayos alimentarios no difieren sustancialmente en las primeras sesiones.

Sin embargo, después de unas pocas sesiones, las ratas responden diferencialmente en ambos tipos de ensayos, revelando que la adición de un segundo estímulo contrarresta la tendencia de respuesta controlada por el primero. Es importante destacar que los sujetos presentan diferencias individuales bastante sólidas en ambos tipos de ensayos. Tenga cuidado de que los protocolos apropiados se carguen en las cámaras de acondicionamiento correspondientes, que las ratas estén correctamente asignadas a cada cámara y que todas las cámaras estén cerradas.

Una vez completado un procedimiento de referencia, se podrían administrar tratamientos conductuales, farmacológicos o quirúrgicos para probar su efecto en el rendimiento. Los resultados no siempre son concluyentes, por lo que los investigadores podrían querer considerar si los datos observados dependen de los parámetros seleccionados o son inducidos de hecho por factores de confusión. Asegúrese de manejar las ratas apropiadamente para evitar dañar a las ratas y evitar que las ratas le dañen.