Name: Seguimiento conductual y Neuromast proyección de imagen de mexicana Cavefish (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 58 s
Description: Aprende ensayos conductuales de alto rendimiento en pez ciego mexicano para neurociencia y estudios biomédicos. Este método permite analizar respuestas a estímulos vibratorios y patrones de sueño de forma rentable.

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Agradecemos a todos los miembros del laboratorio de Yoshizawa incluyendo N. Cetraro, Simon N., C. Valdez, C. Macapac, J. Choi, Lu L., J. Nguyen, S. Podhorzer, Hernandes H., J. Fong, Kato J. e I. Señor, para el cuidado de peces en los pescados experimentales utilizados en este manuscrito. También agradecemos a los miembros de lab A. Keene incluyendo Masek de P. para entrenar a mi montar cámara IR CCD. Por último, nos gustaría agradecer el Media Lab - Facultad de ciencias sociales - escuela de comunicaciones en la Universidad de Hawai ' i Mānoa su inestimable ayuda para hacer el video, especialmente B. Smith, J. Lam y blanco S. a. Este trabajo fue apoyado por Fundación comunitaria hawaiano (78919 16CON y 18CON 90818) e Instituto Nacional de salud NIGMS (P20GM125508) concede a mi.

<ol><li>Keene, A. C., Yoshizawa, M., McGaugh, S. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKeene%2C+AC+%22Biology+and+Evolution+of+the+Mexican+Cavefish.+Biology+and+Evolution+of+the+Mexican+Cavefish%22">Biology and Evolution of the Mexican Cavefish. Biology and Evolution of the Mexican Cavefish</a>. , Elsevier Inc. Amsterdam. (2015).</li>
<li>Mitchell, R. W., Russell, W. H., Elliott, W. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMitchell%2C+RW+%22Mexican+eyeless+characin+fishes%2C+genus+Astyanax%3A+Environment%2C+distribution%2C+and+evolution.Special+publications+the+museum+Texas+Tech+University%22">Mexican eyeless characin fishes, genus Astyanax: Environment, distribution, and evolution.Special publications the museum Texas Tech University</a>. (12), Texas Tech Press. Texas. (1977).</li>
<li>Wilkens, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+genetics+of+epigean+and+cave+Astyanax-fasciatus+%28Characidae%2C+Pisces%29+-+Support+for+the+neutral+mutation+theory%5BTitle%5D)+AND+%22Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution and genetics of epigean and cave Astyanax-fasciatus (Characidae, Pisces) - Support for the neutral mutation theory.</a> Evolutionary Biology. 23, 271-367 (1988).</li>
<li>Fumey, J., Hinaux, H., Noirot, C., Thermes, C., Rétaux, S., Casane, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+late+Pleistocene+origin+of+Astyanax+mexicanus+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Evidence for late Pleistocene origin of Astyanax mexicanus cavefish.</a> BMC Evolutionary Biology. 18 (1), 1-19 (2018).</li>
<li>Yoshizawa, M., Gorički, S., Soares, D., Jeffery, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+a+behavioral+shift+mediated+by+superficial+neuromasts+helps+cavefish+find+food+in+darkness%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution of a behavioral shift mediated by superficial neuromasts helps cavefish find food in darkness.</a> Current Biology. 20 (18), 1631-1636 (2010).</li>
<li>Moran, D., Softley, R., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eyeless+Mexican+cavefish+save+energy+by+eliminating+the+circadian+rhythm+in+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Eyeless Mexican cavefish save energy by eliminating the circadian rhythm in metabolism.</a> PloS One. 9 (9), e107877(2014).</li>
<li>Moran, D., Softley, R., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+energetic+cost+of+vision+and+the+evolution+of+eyeless+Mexican+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">The energetic cost of vision and the evolution of eyeless Mexican cavefish.</a> Science Advances. 1 (8), e1500363(2015).</li>
<li>Yoshizawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Evolution+of+a+Series+of+Behavioral+Traits+is+associated+with+Autism-Risk+Genes+in+Cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">The Evolution of a Series of Behavioral Traits is associated with Autism-Risk Genes in Cavefish.</a> BMC Evolutionary Biology. 18 (1), 89(2018).</li>
<li>Riddle, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+in+cavefish+as+an+adaptation+to+a+nutrient-limited+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance in cavefish as an adaptation to a nutrient-limited environment.</a> Nature. 555 (7698), 647-651 (2018).</li>
<li>Protas, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+cavefish+reveals+molecular+convergence+in+the+evolution+of+albinism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of cavefish reveals molecular convergence in the evolution of albinism.</a> Nature Genetics. 38 (1), 107-111 (2006).</li>
<li>Yoshizawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+genetic+architecture+underlies+the+emergence+of+sleep+loss+and+prey-seeking+behavior+in+the+Mexican+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biology%22%5BJournal%5D)">Distinct genetic architecture underlies the emergence of sleep loss and prey-seeking behavior in the Mexican cavefish.</a> BMC Biology. 13 (1), 15(2015).</li>
<li>Duboué, E. R., Keene, A. C., Borowsky, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolutionary+convergence+on+sleep+loss+in+cavefish+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolutionary convergence on sleep loss in cavefish populations.</a> Current Biology. 21 (8), 671-676 (2011).</li>
<li>Fernandes, V. F. L., Macaspac, C., Lu, L., Yoshizawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+developmental+plasticity+and+a+coupling+between+left+mechanosensory+neuromasts+and+an+adaptive+foraging+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution of the developmental plasticity and a coupling between left mechanosensory neuromasts and an adaptive foraging behavior.</a> Developmental Biology. 441 (2), 262-271 (2018).</li>
<li>Pérez-Escudero, A., Vicente-Page, J., Hinz, R. C., Arganda, S., de Polavieja, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((idTracker%3A+tracking+individuals+in+a+group+by+automatic+identification+of+unmarked+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">idTracker: tracking individuals in a group by automatic identification of unmarked animals.</a> Nature Methods. 11, 743(2014).</li>
<li>Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nature Methods. 6 (6), 451-457 (2009).</li>
<li>Yoshizawa, M., Jeffery, W. R., Van Netten, S. M., McHenry, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sensitivity+of+lateral+line+receptors+and+their+role+in+the+behavior+of+Mexican+blind+cavefish+%28Astyanax+mexicanus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The sensitivity of lateral line receptors and their role in the behavior of Mexican blind cavefish (Astyanax mexicanus).</a> Journal of Experimental Biology. 217 (6), (2014).</li>
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<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li>
<li>Cavallari, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+blind+circadian+clock+in+cavefish+reveals+that+opsins+mediate+peripheral+clock+photoreception%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">A blind circadian clock in cavefish reveals that opsins mediate peripheral clock photoreception.</a> PLoS Biology. 9 (9), e1001142(2011).</li>
<li>Swimmer, B., Lang, H. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSwimmer%2C+B+%22Surface+Wave+Discrimination+between+Prey+and+Nonprey+by+the+Back+Swimmer+Notonecta+glauca+L.+%28Hemiptera+%2C+Heteroptera+%29%22">Surface Wave Discrimination between Prey and Nonprey by the Back Swimmer Notonecta glauca L. (Hemiptera , Heteroptera )</a>. 6 (3), Springer Stable. https://www.jstor.org/stable/4599284 233-246 (1980).</li>
<li>Montgomery, J. C., Macdonald, J. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMontgomery%2C+JC+%22Sensory+Tuning+of+Lateral+Line+Receptors+in+Antarctic+Fish+to+the+Movements+of+Planktonic+Prey%22">Sensory Tuning of Lateral Line Receptors in Antarctic Fish to the Movements of Planktonic Prey</a>. 235 (4785), American Association for the Advancement of Science Stable. https://www.jstor.org/stable/1698962 195-196 (1987).</li>
<li>Prober, D. A., Rihel, J., Onah, A. A., Sung, R. J., Schier, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypocretin%2Forexin+overexpression+induces+an+insomnia-like+phenotype+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hypocretin/orexin overexpression induces an insomnia-like phenotype in zebrafish.</a> The Journal of Neuroscience. 26 (51), 13400-13410 (2006).</li>
<li>Zhdanova, I. V., Wang, S. Y., Leclair, O. U., Danilova, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melatonin+promotes+sleep-like+state+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Melatonin promotes sleep-like state in zebrafish.</a> Brain Research. 903 (1-2), 263-268 (2001).</li>
<li>Nussbaum-Krammer, C. I., Neto, M. F., Brielmann, R. M., Pedersen, J. S., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+Spreading+and+Toxicity+of+Prion-like+Proteins+Using+the+Metazoan+Model+Organism+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Investigating the Spreading and Toxicity of Prion-like Proteins Using the Metazoan Model Organism C. elegans.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), e52321(2015).</li>
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<li>Ferreira, T., Rasband, W. Create Shortcuts. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFerreira%2C+T+%22ImageJ+User+Guide%22">ImageJ User Guide</a>. , https://imagej.nih.gov/ij/docs/guide/146-31.html#sub:Create-Shortcuts... (2012).</li>
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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Estos métodos presentados son de fácil acceso pero pueden ser complicados de realizar debido a la naturaleza de sus orígenes de freeware. Por lo tanto, se recomienda realizar ensayos de prueba y análisis ante cualquier experimentación real.
La tasa de generación de datos puede ser rápida una vez que se establecen el marco experimental y analítico. Una vez establecida, es posible grabamos dos peces en 7 minutos para el ensayo de VAB, 30 peces en 24 h para el ensayo de actividad/sueño y un pez d...

El tetra mexicano, Astyanax mexicanus (Teleostei: Characidae), es único entre los peces por tener dos morfos alternativas radicalmente distintas - un morph vidente, de superficie y un ciego, cavernas morph consta de varios distintos las poblaciones1. Aunque diferentes en morfología y fisiología, son interfértiles todavía2,3. Estos morfos distintas parecen que han evolucionado rápidamente (~ 20.000 años)4, que los hace un sistema modelo ideal para el estudio de rápida adaptación. Cavefish es conocidos por tener una serie de divergentes características morfológicas y conductuales como aumento de densidad de brotes del gusto, aumento del número de mechanosensors, sintonizada a una frecuencia particular de un estímulo vibratorio, hiperactividad, conducta de forrajeo y falta de sueño. Muchos de estos comportamientos probablemente evolucionados simultáneamente, algunos de los cuales se han sugerido para ser ventajoso en la oscuridad de las cuevas para forrajeo5 y conservación de la energía en entornos oscuros y escasos alimentos6,7.
En muchos sistemas del modelo evolutivo, es difícil adquirir conocimientos integrados en cambio cómo animal de morfología y comportamiento en respuesta al medio ambiente porque la mayoría de las especies se distribuye en un gradiente continuo en entornos complejos. Sin embargo, el contraste entre la cueva y morph superficial Astyanax que evolucionaron en ambientes delineados por un ecotono agudo altamente contrastantes ha llevado a Astyanax emerge como un excelente modelo para entender la evolución animal. Esto hace posible conectar más fácilmente los genes y procesos de desarrollo con características adaptativas y selección en el medio ambiente. Además, recientes investigaciones biomédicas de estos rasgos en Astyanax ha demostrado que estos rasgos pueden paralelo humano síntomas8,9,10. Por ejemplo, pérdida de sociabilidad y de sueño y aumento de la hiperactividad, comportamiento repetitivo y niveles de cortisol son similares a lo que se observa en los seres humanos con autismo espectro desorden8.
Para abordar la compleja coevolución de muchos comportamientos y rasgos morfológicos, es conveniente analizar a muchos de ellos para destacar las vías genéticas y moleculares subyacentes. Se presentan adjunto los métodos para caracterizar el grado de fenotipos conductuales cueva-tipo de superficie, cueva y híbrido morfos de Astyanax. Los comportamientos focales analizados para caracterizar el fenotipo son cueva adaptada alimentación comportamiento (vibración atracción, denominada en lo sucesivo VAB) y sueño hiperactividad duración11,12. También es un método imagenológico para el sistema sensorial asociado con VAB13. Recientemente, muchos programas de seguimiento de código abierto para ejecutar ensayos de comportamiento se han convertido en disponibles14,15. Éstos trabajan muy bien para videos cortos, de menos de 10 minutos de duración. Sin embargo, se convierte en problemática si el video es más largo debido a tiempo de seguimiento de computación intensos. Software disponible comercialmente capaz puede ser caro. Los métodos presentados principalmente usan freeware y por lo tanto se consideran métodos rentables y de alto rendimiento. También se incluyen resultados representativos basan en estos métodos.

<table><tbody><tr><td>4-Di-1-ASP (4-(4-(dimetilaminostiril)-1-yoduro de metilpiridinio)</td><td>MilliporeSigma</td><td>D3418</td><td></td></tr><tr><td>longitud de onda de 880 nm luz negra</td><td>Iluminación avanzada</td><td>BL41192-880</td><td></td></tr><tr><td>avfs</td><td>freeware</td><td>Versión 1.0.0.6</td><td>http://turtlewar.org/avfs/</td></tr> <tr><td>Avisynth</td><td>freeware</td><td>Versión 2.6.0</td><td>http://avisynth.nl/index.php/Main_Page</td></tr><tr><td>Cygwin</td><td>freeware</td><td>Versión 2.11.0</td><td>https://www.cygwin.com/</td></tr> Cámara <tr><td>de ensayo cilíndrica (plato de vidrio Pyrex de 325 ml)</td><td>Corning</td><td>3140-100</td><td>10 cm de diámetro 5 cm de alto</td></tr><tr><td>Ethovision XT</td><td>Noldus Información&nbsp; Tecnología, Wageningen, Países Bajos</td><td>Versión 14</td><td>https://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt</td></tr><tr><td>Fish Aquarium Cylinder Soft Sponge Stone Filtro de agua, Black</td><td>Jardin (hasta Amazon.com)</td><td>NA</td><td>Filtro de esponja para sistema de registro de sueño/hiperactividad</td></tr><tr><td>Grado A Huevos de camarones en salmuera Camarones</td><td>en salmuera directos</td><td>BSEA16Z</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>freeware</td><td>Versión 1.52e</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/</td></tr> <tr><td>macro 1.8/12.5-75mm Lente zoom con montura C</td><td>Toyo</td><td>NA</td><td>Conéctelo a la cámara web USB mediante el uso de la montura C, que se imprime en la impresora 3D</td></tr><tr><td>Regulador de neutro</td><td>Seachem</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Filtro óptico de paso largo IR de plástico fundido</td><td>óptico Edmund optics</td><td>43-948</td><td>Cortado en una pequeña pieza para que quepa en el CCD de la cámara web USB</td></tr><tr><td>pfmap</td><td>freeware</td><td>Build 178</td><td>http://pismotec.com/download/ (en " Descargar Archivo" enlace en la parte inferior)</td></tr><tr><td>Reef Crystals Reef Salt</td><td>Instant Ocean</td><td>RC15-10</td><td></td></tr><tr><td>SwisTrack</td><td></td><td>freeware Version 4</td><td>https://en.wikibooks.org/wiki/SwisTrack</td></tr><tr><td>USB webcam (LifeCam Studio 1080p HD Webcam)</td><td>Microsoft</td><td>Q2F-00013</td><td>Corte 2-2,5 cm de la parte delantera</td></tr><tr><td>WinAutomation</td><td></td><td>freeware Version 8</td><td>https://www.winautomation.com/ (free-alone aplicación para este procedimiento)</td></tr><tr><td>Sistema operativo Windows</td><td>Microsoft</td><td>7, 8 o 10</td><td>https://www.microsoft.com/en-us/windows</td></tr><tr><td>x264vfw</td><td>freeware</td><td>NA</td><td>https://sourceforge.net/projects/x264vfw/</td></tr></tbody></table>

seguimiento conductual y neuromast proyección de imagen de mexicana cavefish

Behavioral Tracking and Neuromast Imaging of Mexican Cavefish

Animales cavernícolas han evolucionado una serie de rasgos morfológicos y de comportamiento para adaptarse a sus entornos permanentemente oscuros y escaso de alimentos. Entre estos rasgos, comportamiento de alimentación es una de las ventanas útiles en ventajas funcionales de la evolución del rasgo de comportamiento. Aquí se presentan métodos actualizados para el análisis de comportamiento de atracción de vibraciones (VAB: un comportamiento de forrajeo adaptativo) y proyección de imagen de mechanosensors asociado de adaptado de cueva tetra, Astyanax mexicanus. Además, se presentan métodos para el rastreo de alto rendimiento de una serie de comportamientos cavefish adicional incluyendo hiperactividad y pérdida de sueño. Cavefish también muestra asociality, conducta repetitiva y mayor ansiedad. Por lo tanto, cavefish sirve como un modelo animal para comportamientos evolucionados. Estos métodos utilizan scripts software libre y a medida que se pueden aplicar a otros tipos de comportamiento. Estos métodos proporcionan alternativas prácticas y rentables de software de seguimiento disponibles en el mercado.

Los resultados presentados en este documento son ejemplos representativos de lo que puede ser adquirido con los métodos presentados. Por lo tanto, resultados pueden diferir ligeramente de los presentados aquí para peces superficie dependiendo de las condiciones experimentales y cavefish.
Comportamiento de atracción de vibraciones
Resultados representat...

Aquí, presentamos métodos para estudio de alto rendimiento de una serie de cavefish mexicano comportamientos y la coloración vital de un sistema de mechanosensory. Estos métodos utilizan scripts software libre y a medida, ofreciendo un método práctico y rentable para los estudios de comportamientos.

Seguimiento conductual y Neuromast proyección de imagen de mexicana Cavefish

Cave-dwelling animals have evolved a series of morphological and behavioral traits to adapt to their perpetually dark and food-sparse environments. Among ...

Cavefish está criando como un fantástico mural animal para entender la evolución y los procesos biomédicos. Ahora estamos llevando a cabo una investigación biomédica utilizando estos rasgos como un paralelismo de los síntomas humanos. Aquí vamos a mostrar la batería del ensayo de comportamientos y el sistema de análisis que se puede utilizar tanto para estudios evolutivos como biomédicos.Para ensayar la vibración atrae y el comportamiento, se inserta una varilla de vidrio vibratoria en un recipiente de vidrio que contiene un pez en la oscuridad. Los peces se aclimatan cuatro días antes del ensayo en agua acondicionada con un ciclo oscuro de 12, 12. El día anterior al día del ensayo después de tres días de aclimatación, reemplace el agua en la cámara de ensayo con agua fresca condicionada.El día del ensayo, los peces se ven privados de alimentos hasta después de que se complete el ensayo, porque el cese cambiará su respuesta a las vibraciones. Prepare el aparato emisor de vibraciones ajustando a 40 Hertz. Establezca los parámetros de grabación adecuados, las condiciones de stock y el archivo de destino.Coloque el cilindro de ensayo en el escenario de grabación, iluminado con retroil

behavioral-tracking-and-neuromast-imaging-of-mexican-cavefish

Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

Se describe un conjunto de técnicas para el estudio de la conducta espontánea de nadar libremente peces débilmente eléctrica durante un período prolongado de tiempo, de forma sincrónica medir el tiempo de descarga de órgano eléctrico del animal, la posición del cuerpo y la postura tanto de forma precisa y fiable en un tanque del acuario especialmente diseñado dentro de un sensorial cámara de aislamiento.

Seguimiento del comportamiento a largo plazo de Libremente Natación débilmente eléctrico Fish

En este protocolo, demostrar cómo criar a adultos Astyanax mexicanus , criar las larvas y realizar montaje conjunto immunohistochemistry en post-larvaria pescado a los fenotipos de superficie y morfotipos de la cueva.

Aumento de la Tetra mexicano Astyanax mexicanus para análisis de fenotipos Post-larval y Immunohistochemistry Whole-mount

Se describen métodos para la manipulación de genes en el sistema del modelo evolutivo Astyanax mexicanus. Se describen tres técnicas diferentes: transgénesis mediada de Tol2, manipulación dirigida del genoma utilizando CRISPR/Cas9 y caída de expresión usando morfolinos. Estas herramientas deben facilitar la investigación directa de los genes subyacentes a la variación entre las formas de la superficie y cavernas.

Manipulación de la función del Gene en mexicano Cavefish

Este protocolo permite la visualización de la expresión génica en embrionario Astyanax cavefish. Este enfoque ha sido desarrollado con el objetivo de maximizar la señal de la expresión del gene, minimizando tinción de fondo inespecífica.

Wholemount hibridación In Situ de embriones de Astyanax

Este protocolo detalla la metodología para cuantificar el comportamiento locomotor y sueño en el mexicano cavefish. Análisis anteriores se extienden para medir estos comportamientos en pescados ubicado socialmente. Este sistema puede ser ampliamente aplicado para el estudio de sueño y actividad en otras especies de peces.

Mediciones automatizadas de sueño y actividad locomotriz en mexicano Cavefish

La fertilización in vitro es una técnica comúnmente utilizada con una variedad de organismos modelo para mantener las poblaciones de laboratorio y producir embriones sincronizados para aplicaciones posteriores. Aquí, presentamos un protocolo que implementa esta técnica para diferentes poblaciones del tetra pescado mexicano, Astyanax mexicanus.

Gamete Collection y Fertilización In Vitro de Astyanax mexicanus

Este artículo describe las condiciones básicas de laboratorio y los protocolos para un régimen de temperatura incremental para estimular el desove máximo en el tetra mexicano Astyanax mexicanus,que es un modelo emergente para los estudios de desarrollo y evolutivos.

Cambios incrementales de temperatura para la cría y el desove máximos en Astyanax mexicanus

Monitoreo prolongado y exhaustivo de los ratones en un ambiente en el hogar jaula proporciona una comprensión más profunda de la conducta aberrante en modelos murinos de enfermedades cerebrales. Este artículo describe la estación del Comportamiento Integrado (InBest) como componente clave del análisis del comportamiento contemporáneo.

Comportamiento Fenotipificación de modelos murinos de enfermedades con la Estación Integrada Comportamiento (InBest)

Este protocolo está destinado a permitir a los investigadores realizar experimentos diseñados para probar estos aspectos de la adicción utilizando los ensayos de preferencia de lugar condicionado y sensibilización conductual locomotora.

Evaluación del comportamiento de sensibilización inducida por la cocaína y la preferencia de lugar condicionado en ratones

Una versión de la rata de la prueba humana vigilancia psicomotora (PVT) se describe que mide los aspectos de la atención similares a los medidos con el PVT humana, incluyendo los aspectos de la vigilancia humana tales como la precisión de rendimiento, velocidad del motor, que responden prematuro y fallas en la atención.

La prueba de roedores psicomotor Vigilancia (rPVT): Un método para evaluar el rendimiento neuroconductual en ratas y ratones

Aprende ensayos conductuales de alto rendimiento en pez ciego mexicano para neurociencia y estudios biomédicos. Este método permite analizar respuestas a estímulos vibratorios y patrones de sueño de forma rentable.

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