Name: Colección de aliento de los niños para el descubrimiento de biomarcadores de la enfermedad (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 9 s
Description: Aprenda a recolectar muestras de aliento no invasivas en niños para identificar biomarcadores de infecciones, trastornos metabólicos y cáncer. Este método estandarizado facilita diagnósticos pediátricos reproducibles.

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Expresamos nuestro agradecimiento a los niños y familias del Hospital de St. Louis los niños que participaron en este estudio. Reconocemos los esfuerzos únicos de la Sra. Stacy Postma y Sra. Janet Sokolich durante la colección de la respiración. Este trabajo es apoyado por la Fundación del Hospital infantil de St. Louis.

El estudio ha sido aprobado por la institucional Review Board de Washington University School of Medicine (#201709030). El consentimiento informado fue obtenido de un padre o tutor legal antes de la inclusión en el estudio. Fotografías en la figura 2 se reproducen con el consentimiento informado de los padres.
1. Asamblea de aliento sampler
<ol><li>Utilizando guantes desechables, instale una boquilla de cartón en el sampler de la respiración, como se muestra en suplementario figura 1. Fije un tramo corto de tubería de gran diámetro en el otro extremo del muestreador de aire, como se muestra en la figura 1 complementaria. Use tubería nueva para cada paciente.</li>
	<li>Acople el conector de aire a la válvula de la bolsa a través de la tubería. Vea la figura 1 para la foto del muestreador de aire y bolsa conectado.</li>
	<li>Girar la tuerca moleteada en el lado de la entrada de ajuste hacia la izquierda para desbloquear la válvula y presione el vástago de la válvula del bolso, para abrir la entrada para toma de muestras.</li>
	<li>Bloquear la válvula abierta, girando el tornillo moleteado en el lado de la entrada de la colocación de las agujas del reloj.</li>
	<li>Confirme que la válvula azul en el dechado de respiración está abierta (en paralelo con el conector).</li>
	<li>Escriba ID de paciente, fecha y la hora en la etiqueta de la bolsa de polímero.</li>
	<li>Tubo adsorbente de condición TD antes de usar de colección de respiración recomienda procedimientos (disponibles de fabricantes individuales). La tapa y almacenar tubos de desorción térmica a 4 – 5 ° C antes de la recogida de la respiración para minimizar los artefactos.</li>
</ol>2. colección de respiración
<ol><li>Realizar una demostración de la exhalación de la respiración al niño mediante un muestreador de aire (sin bolsa). Explicar al niño que debe respirar hacia fuera como haría cuando "soplo de un globo" y continuar respirando hacia fuera como puede cómodamente. Poner la cartulina boquilla entre los labios y exhale como usted puede.</li>
	<li>Proporcionar al niño un nuevo sampler de respiración conectado a una bolsa y les pedimos que exhala como en la demostración, tal como se ilustra en la figura 2.</li>
	<li>Cierre la válvula azul del dispositivo de sampler de respiración tan pronto como el niño haya terminado de exhalar. Reabrir la válvula según sea necesario antes de exhalaciones adicionales.</li>
	<li>Repita el paso 2.2 y 2.3 hasta que se ha recogido por lo menos 1 L de aire. Para un niño sano puede tardar 2 exhalaciones y exhalaciones de un niño enfermo o más jóvenes 2-4. 1 L de aire es el requisito mínimo de análisis. Nota sobre la etiqueta de la bolsa cuántas respiraciones fueron recogidos del paciente. Ver suplementario Figura 2 para una foto del bolso que contiene diferentes volúmenes de la respiración.</li>
	<li>Antes de desmontar la bolsa de la muestra de aliento, asegúrese de aflojar el tornillo moleteado en el lado de la entrada de la guarnición girando en sentido antihorario y empuje el vástago de la válvula hasta cerrar la conexión de entrada. Ver figura 3 complementaria para la foto de la válvula de la bolsa en la posición abierta y cerrada.</li>
	<li>Cierre la válvula de la bolsa cerrada girando el tornillo moleteado en el lado de la entrada de la colocación de las agujas del reloj.</li>
	<li>Separar la bolsa de la muestra de aliento.</li>
	<li>Tire de la boquilla y dejar a un lado el muestreador de aire para la limpieza antes de usar con otro paciente.</li>
</ol>3. transferencia de aliento a tubos de desorción térmica
<ol><li>Retire el tubo de TD de la nevera. Retire las tapas de almacenamiento a largo plazo del tubo adsorbente, mediante la herramienta de nivelación/destapar tubo proporcionado por el fabricante.</li>
	<li>Conecte el extremo del tubo absorbente de TD a la bolsa de muestreo con tubos. Tenga en cuenta que tubo orientación es importante, como TD tubos están diseñados para tener el aire que fluye en un solo sentido, a partir del extremo. Tenga en cuenta que la transferencia de aire de la bolsa de TD debe hacerse dentro de 1 hora de colección de la respiración.</li>
	<li>Inserte el otro extremo del tubo de TD en el tubo, que está conectado a una bomba.</li>
	<li>Encienda la bomba y funcionar en 100 mL/min durante 10 minutos.</li>
	<li>Abra la válvula de la bolsa girando en sentido antihorario el tornillo moleteado en el lado de la conexión de entrada y empuje el vástago de la válvula hacia abajo para abrir la conexión de entrada. Esto se ilustra en el suplementario figura 4, que demuestra la transferencia de aliento en un tubo absorbente TD con una bomba.</li>
	<li>Arrancar la bomba, que se detendrá después de 10 min de colección.</li>
	<li>Retire el tubo adsorbente de TD y apriete los tapones en ambos extremos con la herramienta tubo de recubrimiento/destapar. Tapas de almacenamiento a largo plazo deben apretarse firmemente para asegurar un sello hermético.</li>
	<li>Coloque una etiqueta en el extremo de una tapa para indicar que el tubo se ha utilizado. En la etiqueta, indicar fecha y número de identificación (ID) del estudio paciente.</li>
	<li>Coloque el tubo en una pequeña bolsa de plástico resellable. Tubo absorbente tienda a 4 – 5 ° C. Presione el resto de la respiración de la bolsa y deseche la bolsa. Grabación estudio paciente ID, TD tubo serie, colección día, momento de la recogida de la respiración, el tiempo de transferencia de respiración y la ingestión de alimentos (época de la ingestión de alimentos antes de la colección de aliento y comidas consumidas).</li>
</ol>4. ambiente aire colección
<ol><li>Recolectar las muestras de aire ambiente en el entorno del paciente inmediatamente después de la colección de respiración.<ol>
<li>Colocar la bolsa al puerto de salida de la bomba mediante el uso de tubería, como se ilustra en la figura 5 suplementarios.</li>
		<li>Empuje el vástago de la válvula de la bolsa hacia abajo para abrir la conexión de entrada para el muestreo.</li>
		<li>Bloquear la apertura de válvula girando el tornillo moleteado en el lado de la conexión de entrada.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Encienda la bomba y funcionar en 100 mL/min durante 12 minutos. La bomba recoge 1.200 mL de aire ambiente.</li>
	<li>Después de que se ha recogido el volumen solicitado, afloje el tornillo moleteado en el lado de la entrada de la guarnición girando en sentido antihorario y empuje el vástago de la válvula hasta cerrar la conexión de entrada.</li>
	<li>Cierre la válvula de la bolsa cerrada girando el tornillo moleteado en el lado de la conexión de entrada.</li>
	<li>Separar la bolsa de la bomba.</li>
	<li>Siga los mismos pasos que en apartado 3. La única diferencia es aire ambiente que se transferirá COV, no los de la respiración.</li>
</ol>5. la muestra y análisis de datos
Nota: Las condiciones para el análisis de muestras de aliento y aire han sido descritos previamente9.
<ol><li>Analizar los datos recogidos y detectar compuestos en los cromatogramas. Utilizar programas de software típico para encontrar e identificar a todos los compuestos detectados por el instrumento (Figura 3A). Por ejemplo, utilizar una característica de deconvolución para identificar compuestos. Filtrar datos utilizando factor de tamaño de ventana de retención de 80, altura total filtros ≥100 cuenta, y el área absoluta compuesto filtro ≥500 cuenta.</li>
	<li>Utilizar estándares químicos a compuestos de identidad en las muestras de aliento y el aire. Extraer el área de pico de ion base de compuestos de interés, como el isopreno y β-pineno (figura 4) y comparar los niveles de volátiles en el aire y la respiración.</li>
</ol>

<ol><li>Ahmed, W. M., Lawal, O., Nilsen, T. M., Goodacre, R., Fowler, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exhaled+volatile+organic+compounds+of+infection%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Exhaled volatile organic compounds of infection: a systematic review.</a> ACS Infectious Diseases. 3 (10), 695-710 (2017).</li>
<li>Berna, A. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+breath+specimens+for+biomarkers+of+Plasmodium+falciparum+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Analysis of breath specimens for biomarkers of Plasmodium falciparum infection.</a> Journal of Infectious Diseases. 212 (7), 1120-1128 (2015).</li>
<li>Lawal, O., Ahmed, W. M., Nijsen, T. M. E., Goodacre, R., Fowler, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exhaled+breath+analysis%3A+a+review+of+%27breath-taking%27+methods+for+off-line+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolomics%22%5BJournal%5D)">Exhaled breath analysis: a review of 'breath-taking' methods for off-line analysis.</a> Metabolomics. 13 (10), (2017).</li>
<li>Kang, S., Thomas, C. L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+long+may+a+breath+sample+be+stored+for+at-80+degrees+C%3F+A+study+of+the+stability+of+volatile+organic+compounds+trapped+onto+a+mixed+Tenax%3ACarbograph+trap+adsorbent+bed+from+exhaled+breath%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Breath+Research%22%5BJournal%5D)">How long may a breath sample be stored for at-80 degrees C? A study of the stability of volatile organic compounds trapped onto a mixed Tenax:Carbograph trap adsorbent bed from exhaled breath.</a> Journal of Breath Research. 10 (2), (2016).</li>
<li>Basanta, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+metabolomic+analysis+of+breath+using+differential+mobility+spectrometry+in+patients+with+chronic+obstructive+pulmonary+disease+and+healthy+smokers%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Non-invasive metabolomic analysis of breath using differential mobility spectrometry in patients with chronic obstructive pulmonary disease and healthy smokers.</a> Analyst. 135 (2), 315-320 (2010).</li>
<li>Mochalski, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+and+breath+levels+of+selected+volatile+organic+compounds+in+healthy+volunteers%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Blood and breath levels of selected volatile organic compounds in healthy volunteers.</a> Analyst. 138 (7), 2134-2145 (2013).</li>
<li>Mochalski, P., Wzorek, B., Sliwka, I., Amann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suitability+of+different+polymer+bags+for+storage+of+volatile+sulphur+compounds+relevant+to+breath+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B-Analytical+Technologies+in+the+Biomedical+and+Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Suitability of different polymer bags for storage of volatile sulphur compounds relevant to breath analysis.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 877 (3), 189-196 (2009).</li>
<li>Mochalski, P., King, J., Unterkofler, K., Amann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stability+of+selected+volatile+breath+constituents+in+Tedlar%2C+Kynar+and+Flexfilm+sampling+bags%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Stability of selected volatile breath constituents in Tedlar, Kynar and Flexfilm sampling bags.</a> Analyst. 138 (5), 1405-1418 (2013).</li>
<li>Schaber, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breathprinting+reveals+malaria-associated+biomarkers+and+mosquito+attractants%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Breathprinting reveals malaria-associated biomarkers and mosquito attractants.</a> Journal of Infectious Diseases. 217 (10), 1553-1560 (2018).</li>
<li>Herbig, J., Beauchamp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+standardization+in+the+analysis+of+breath+gas+volatiles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Breath+Research%22%5BJournal%5D)">Towards standardization in the analysis of breath gas volatiles.</a> Journal of Breath Research. 8 (3), (2014).</li>
<li>Phillips, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+volatile+organic+compounds+in+the+breath+of+normal+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%22%5BJournal%5D)">Variation in volatile organic compounds in the breath of normal humans.</a> Journal of Chromatography B. 729 (1-2), 75-88 (1999).</li>
<li>Eckel, S. P., Baumbach, J., Hauschild, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+importance+of+statistics+in+breath+analysis-hope+or+curse%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Breath+Research%22%5BJournal%5D)">On the importance of statistics in breath analysis-hope or curse?</a> Journal of Breath Research. 8 (1), (2014).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

A pesar de progresos considerables en la investigación de la respiración durante la última década, las prácticas estándares para el muestreo y análisis de volátiles del gas de respiración siendo indefinido10. La razón principal de esta falta de estandarización ha sido la diversidad de métodos de recolección de la respiración, que tienen impacto directo sobre la diversidad química resultante en cualquier muestra dada respiración exhalada. Aliento exhalado contiene una amplia gama de compuestos orgá...

Biomarcadores pueden producir información valiosa sobre los procesos biológicos normales y patológicos que pueden contribuir a la enfermedad clínicamente identificable. Recientemente, ha habido interés creciente en la evaluación de volátiles de respiración como biomarcadores para una variedad de Estados de enfermedad, incluyendo infecciones, enfermedades metabólicas y cáncer 1. Espirado contiene niveles cuantificables de compuestos orgánicos volátiles (COV), compuestos orgánicos semivolátiles y microbios derivada material (por ejemplo, los ácidos nucleicos de las bacterias y virus). El objetivo central del análisis del aire espirado es profundizar en el estado de una condición médica o exposiciones ambientales en forma no invasiva. Existen varios métodos para recolectar y analizar el aire espirado, dependiendo de los componentes de interés. Actualmente no existe ningún método de colección de respiración exhalada estandarizados, que complica el análisis comparativo de resultados entre los estudios. Estandarización de procedimientos de recopilación de la respiración es esencial, como el procedimiento de muestreo sí mismo tiene un efecto considerable sobre los resultados posteriores de análisis de aliento.
En muchos estudios, muestras respiratorias respiración finales son empleada2,3. Este muestreo consiste en descartar la parte inicial del aire espirado ("espacio muerto"), con el fin de captar preferentemente el aire al final del ciclo de respiración. La ventaja de esta estrategia es que reduce los niveles de VOC exógeno (por ejemplo, COV ambiental), enriqueciendo para compuestos orgánicos volátiles endógenos, específico para cada paciente. Este método excluye a los primeros segundos de exhalación de un individuo antes de tomar la muestra de aliento. Otros investigadores han utilizado un sensor de presión para activar el muestreo durante la fase de predefinidos de vencimiento4,5. Porque los sensores de presión requieren compleja ingeniería, este método alternativo requiere un dispositivo de muestreo dedicado y relativamente costosos.
Muestreo de respiración pediátrica puede ser particularmente difícil. Una preocupación fundamental es que los niños pequeños no puede cooperar con protocolos para la espiración voluntaria del aire de "dead space". Por esta razón, es más fácil obtener mezcla respiratoria respiración de los niños. Sin embargo, una advertencia importante con muestras mixtas respiración respiratoria es el riesgo de contaminación ambiental y material. Por lo tanto, la viabilidad de colección pediátrica es una preocupación de conducción en el campo.
Además de los métodos de recopilación, almacenamiento de muestras de aliento también puede influir la calidad de la muestra. La humedad alta en aire exhalado y las concentraciones bajas (partes por billón) de respiración orgánicos volátiles compuestos hacen muestras de aliento especialmente susceptibles a problemas relacionados con el almacenamiento6,7. A pesar del gran potencial de técnicas en tiempo real como protón transferencia reacción espectrometría de masas (PTR-MS), GC-MS sigue siendo el gold standard para el análisis de muestras de aliento. Análisis por GC-MS de muestras de aliento es una técnica fuera de línea, es junto con métodos de preconcentración como tubos de desorción térmica (TD), micro-extracción en fase sólida y dispositivos de la trampa de la aguja. Antes de la concentración, las muestras de aliento necesitan almacenarse temporalmente en polímero bolsas8. Bolsas de polímero son populares debido a su precio moderado, relativamente buena durabilidad y reutilización. Mientras que las bolsas se pueden reutilizar, tiempo y esfuerzo se requieren para asegurar la eficiente limpieza de7,8. Cada tipo de bolsa específica también requiere procedimientos empíricamente determinados y estandarizados de control de calidad, reutilización y recuperación.
Tubos de TD son ampliamente utilizados para la concentración la respiración porque captura a una gran cantidad de volátiles y se pueden personalizar. Los materiales absorbentes usados para embalar tubos de TD se pueden adaptados a aplicaciones particulares y objetivo particular volátiles de interés. Tubos de TD substancialmente mejorar la comodidad de los estudios de biomarcadores de la respiración, especialmente en sitios remotos, porque TD tubos con seguridad tienda volátiles de la respiración durante al menos dos semanas y son fáciles de transporte3.
En un esfuerzo por estandarizar la colección respiración pediátrica para el descubrimiento de biomarcadores, aquí describimos un método simple para recoger el aliento de los niños pequeños. Para ilustrar los resultados representativos de los protocolos implementados, se presentan datos desidentificados de una cohorte en curso de niños (8-17 años) sometidos a evaluación para la enfermedad sin alcohol ácido graso hígado (EHGNA). Resultados y análisis de este estudio serán denunciados en una posterior publicación. En este trabajo se presenta un subconjunto de datos para demostrar la aplicación de nuestro protocolo. En Resumen, los niños sean instruídos que exhale normalmente a través de la boquilla en una bolsa de polímero, como si "sopla un globo". El proceso se repite 2 a 4 veces hasta que se recogió 1 L de aire. La muestra es entonces transferida a un tubo de TD y almacenada a 5 ° C antes del análisis por GC-MS.

<table><tbody><tr><td>Bolsa de aliento&nbsp;</td><td>SKC</td><td>237-03</td><td>Estas son bolsas de 3 L</td></tr><tr><td>Boquilla de cartón&nbsp;</td><td>Sistemas A-M</td><td>161902</td><td>0.86" OD, 2.00" L</td></tr><tr><td>Tubo de gran diámetro</td><td>Cole Parmer</td><td>95802-11 Tubo de</td><td>silicona, 1/4" de diámetro interno x 5/16" de diámetro exterior,</td></tr> <tr><td>tapas de almacenamiento a largo plazo&nbsp;</td><td>Markes International</td><td>C-CF010</td><td>Tapa de almacenamiento de latón &frac14; " & Férula de PTFE, pk 10</td></tr><tr><td>Adaptador macho</td><td>Charlotte Pipe</td><td>2109</td><td>Parte 1/3 de conector de respiración (1/2" Nº de pieza universal 436-005)</td></tr><tr><td>Adaptador macho (de teflón)</td><td>Pieza</td> 3/3 de fabricación <td></td> propia <td>de conector de respiración (1/4" ID x 1/2" MIP). Esta pieza fue especialmente mecanizada a partir de varillas hechas de teflón virgen</td></tr><tr><td>Bomba</td><td>SKC</td><td>220-1000TC-C</td><td>Bomba de bolsillo Touch con cargador</td></tr><tr><td>Tubo de diámetro pequeño&nbsp;</td><td>Supelco</td><td>20533</td><td>Tubo de teflón&nbsp; L y veces; D.O. y tiempos; Diámetro interior: 25 pies y tiempos; 1/4 pulg. (6,35 mm) y tiempos; 0.228 pulg. (5,8 mm)&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubos de desorción térmica&nbsp;</td><td>Markes International</td><td>C2-CAXX-5314</td><td>Tubo, inerte, TnxTA/Sulficarb, cond/tapón, pk 10</td></tr><tr><td>Herramienta de taponado/destaponado de tubos</td><td>Markes International</td><td>C-CPLOK</td><td></td></tr><tr><td>Conector de válvula de bola de dos vías&nbsp;</td><td>Homewerks Worldwide</td><td>VBV-P40-E3B</td><td>Parte 2/3 de conector de respiración (1/2")</td></tr></tbody></table>

colección de aliento de los niños para el descubrimiento de biomarcadores de la enfermedad

Breath Collection from Children for Disease Biomarker Discovery

Análisis y colección de respiración pueden utilizarse para descubrir biomarcadores volátiles en un número de enfermedades infecciosas y no infecciosas, como la malaria, tuberculosis, cáncer de pulmón y enfermedad hepática. Este protocolo describe un método reproducible para el muestreo de aliento en los niños y luego estabilizar las muestras de aliento para su posterior análisis con cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS). El objetivo de este método es establecer un protocolo estandarizado para la adquisición de muestras de aliento para su posterior análisis químico, de los niños de 4 a 15 años de edad. En primer lugar, se muestrea respiración usando una boquilla de cartón unida a una válvula de 2 vías, que está conectada a una bolsa de 3 L. Analitos de respiración se transfirió a un tubo de desorción térmica y almacenados a 4-5 ° C hasta su análisis. Esta técnica se ha utilizado previamente para capturar el aliento de los niños con malaria para la identificación de biomarcadores de respiración exitosa. Posteriormente, hemos aplicado con éxito esta técnica a las cohortes pediátricas adicionales. La ventaja de este método es que requiere mínima cooperación por parte del paciente (de valor particular en población pediátrica), tiene un período corto de la colección, no requiere de personal capacitado y se puede realizar con equipos portátiles en configuración del campo de recursos limitados.

En nuestro estudio, respiración se colectaron muestras de 10 niños (8-17 años) sometidos a evaluación en el Hospital infantil de St. Louis. Las muestras de aliento y muestras de aire ambiente (n = 10) fueron recogidos como se describió anteriormente. Muestras fueron analizadas mediante cromatografía de gases cuadrupolo tiempo de vuelo espectrometría de masas (GC-MS-QToF) y desorción térmica, como se describió previamente9. Después de la eliminación de cont...

Este protocolo describe un método simple para la adquisición de muestras de aliento de los niños. Brevemente, las muestras de aire mezclado previamente se concentran en tubos absorbentes antes del análisis de cromatografía de gases-espectrometría de masas. Biomarcadores de la respiración de las enfermedades infecciosas y no infecciosas pueden identificarse mediante este método de colección de la respiración.

Colección de aliento de los niños para el descubrimiento de biomarcadores de la enfermedad

Breath collection and analysis can be used to discover volatile biomarkers in a number of infectious and non-infectious diseases, such as malaria, ...

Un método estandarizado de recolección de aliento en niños podría utilizarse para responder preguntas clave sobre el estado de las condiciones médicas pediátricas de manera no invasiva y para comparar los resultados entre estudios. La principal ventaja de esta técnica es que permite la recogida de muestras de aliento de niños de una manera sencilla, no invasiva y reproducible. Las implicaciones de estas técnicas se extienden al diagnóstico de una amplia gama de estados de la enfermedad, incluyendo infecciones, trastornos metabólicos y cáncer y para pruebas de punto de atención para uso clínico.La instrucción visual es muy útil porque hay muchas partes en nuestro equipo de recolección de aliento y porque la configuración del equipo puede ser complicada. Para ensamblar el equipo de muestra de aliento, conecte una boquilla de cartón al tomamuestras de aliento y conecte una longitud corta de tubo de gran diámetro al otro extremo del tomamuestras. Fije el conector de respiración a la válvula de la bolsa a través del tubo.Gire el tornillo de pulgar moleteado en el lado del accesorio de entrada en sentido antihorario para desbloquear la válvula en la posición abierta y empuje el vástago d

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Investigación

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Chemistry

Química

Los biomarcadores son indicadores biológicos medidos directamente-de la enfermedad o la salud. En la población y de las ciencias sociales, los biomarcadores deben ser fáciles de obtener, transportar y analizar. Secado de gotas de sangre (DBS) colección responde a esta necesidad, se puede recoger en el campo con altas tasas de respuesta y analizada por una variedad de biomarcadores.

Sangre Seca Colección de Biomarcadores de salud para maximizar la participación en estudios de población

extracción de ADN de la saliva puede proporcionar una fuente fácilmente disponible de ADN de alto peso molecular, con poca o ninguna degradación/fragmentación.  Este protocolo proporciona parámetros optimizados para la recolección/almacenamiento de saliva y la extracción de ADN para que sean de calidad y cantidad suficientes para ensayos de ADN posteriores con requisitos de alta calidad.

Recolección y extracción de ADN de la saliva de Next Generation Sequencing

Este protocolo describe una técnica no invasiva para la toma de muestras del líquido guarnición mucosa de las vías aéreas superiores. Puede ser utilizado para realizar la cuantificación de en vivo los niveles de mediadores de la proteína, tales como citoquinas y quimioquinas, en sujetos de todas las edades.

Muestreo no invasivo de revestimiento mucoso líquido para la cuantificación In Vivo de la vía aérea superior mediador inmune niveles

Cambios en el microbioma oral a lo largo de la infancia son de creciente interés. Comparación de microbioma diferentes estudios revela una falta de protocolos de muestreo estandarizados. Espacio limitado hace muestreo del sonido surco subgingival de niños desafiantes. Papel punto de muestreo se presenta aquí en detalle como el método de elección para esta área.

Biofilm oral toma de muestras para análisis de microbioma en niños sanos

Un protocolo para la caracterización de la composición química de la respiración exhalada en tiempo real mediante el uso de ionización secundaria nanoelectrospray junto a alta resolución, espectrometría de masas se demuestra.

Análisis de la respiración en tiempo real mediante el uso de ionización secundaria Nanoelectrospray acoplada a espectrometría de masas de alta resolución

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Captura de compuestos orgánicos volátiles microbianos producidos activamente a partir de muestras asociadas con humanos con extracción de sorbente asistida por vacío

Detallamos los procedimientos consistentes y de alta calidad utilizados a lo largo de los procesos de muestreo biológico y de aire en los sitios de campo indios durante un gran ensayo controlado aleatorio. Los conocimientos obtenidos de la supervisión de las aplicaciones de tecnologías innovadoras, adaptadas para la evaluación de la exposición en las regiones rurales, permiten mejores prácticas de recopilación de datos de campo con resultados más confiables.

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Varios patógenos bacterianos pueden causar infecciones del tracto respiratorio y provocar graves problemas de salud si no se detectan con precisión y se tratan con prontitud. La detección rápida y precisa de estos patógenos a través de la amplificación isotérmica mediada por bucle proporciona una gestión y un control eficaces de las infecciones del tracto respiratorio en entornos clínicos.

Detección rápida de patógenos bacterianos que causan infecciones del tracto respiratorio inferior a través de la amplificación isotérmica mediada por bucle basada en chips microfluídicos

Radical basado en la química biomimética ha sido aplicada a bibliotecas de hasta edificio-necesarias para el desarrollo de biomarcadores.

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