Name: Medición de los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 33 s
Description: Aprende a medir el estrés biofísico y psicológico en entornos naturales mediante análisis de cortisol y α-amilasa en saliva. Este método permite evaluar objetivamente los efectos restauradores de la naturaleza.

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Este estudio fue financiado en parte a través del Programa de Becas de Investigación de la Facultad (FRGP) patrocinado a través de la Escuela de Salud Pública de la Universidad de Indiana, Bloomington, IN. Los autores quieren agradecer a la Dra. Alison Voight y Melissa Page por su asistencia editorial y comentarios constructivos.

Este estudio sigue las políticas y directrices del Programa de Protección de Investigación Humana de la Junta de Revisión Institucional de la Universidad de Indiana.
1. Selección de ubicación
<ol><li>Seleccione el número de sitios (n) en función de los diferentes niveles de la naturaleza. NOTA: Elegimos tres sitios para nuestro trabajo. Utilizando un continuo basado en los niveles de "naturalidad", el Sitio A fue considerado el más natural y se compone de aproximadamente 1,200 acres de crestas boscosas que bordean un lago y se encuentra dentro de un bosque caducifolio. Las actividades más comunes incluyen caminar y observar la vida silvestre. El sitio B era un parque municipal de 33 acres que ofrece senderos para caminar, lugares para reuniones, áreas de juegos infantiles y espacio de campo abierto para actividades recreativas causales. El Sitio C era un gimnasio urbano, en interiores con el nivel más bajo de naturalidad. Los tres sitios están relativamente cerca de una ciudad de tamaño mediano (población estimada de 46.000 personas) en el medio oeste de los Estados Unidos.</li>
</ol>2. Examen y preparación de los participantes
<ol><li>Completar el reclutamiento de participantes antes de que las asignaturas participen en experiencias recreativas. NOTA: Para los sitios A y B, los sujetos fueron abordados por el investigador en el estacionamiento de la entrada del parque. Para el Sitio C, los sujetos fueron abordados en la recepción del gimnasio interior. Para controlar las diferencias en el tipo de actividad, los sujetos reclutados para los sitios A y B eran predominantemente de senderismo, mientras que para el Sitio C la actividad principal corría o caminaba por la pista cubierta.</li>
	<li>Durante el reclutamiento, recuerde a los sujetos que cumplan con las pautas relacionadas con la recolección de muestras de cortisol salival. No deben comer ni beber 10 minutos antes de proporcionar muestras de saliva. NOTA: Cabe señalar que en este caso, las muestras de saliva no se normalizaron para el volumen o dilución (concentración) - es decir, si los participantes estaban adecuadamente hidratados y/o cambiaron la hidratación entre las colecciones de muestras.</li>
	<li>Dar brazaletes rojos (o ropa notablemente perceptible) a cada participante para permitir una identificación fácil cuando salide al final de sus compromisos.</li>
	<li>Asigne una asignación de tiempo de 30-40 minutos para que todos los sujetos de los tres sitios pasen una cantidad similar de tiempo en cada sitio. Excluya los sujetos que pasen sustancialmente más o menos tiempo que el resto de la muestra.</li>
	<li>Mantenga el tipo de actividad comprometida de forma constante. NOTA: En este caso, la actividad "media" era caminar o hacer senderismo. Los sujetos que participaban en actividades sustancialmente diferentes de caminar o hacer senderismo fueron excluidos de la muestra. Por ejemplo, los sujetos que pescaban, hacían picnic o levantaban pesas no estaban incluidos en las muestras respectivas.</li>
</ol>3. Condiciones y diseño experimental
<ol><li>Utilice un diseño cuasi-experimental pre-prueba/post-prueba.</li>
	<li>Después de identificar a los sujetos y al aceptar participar, pida a cada sujeto que lea y firme un formulario IRB que explique la naturaleza voluntaria, el propósito y los procedimientos del estudio.</li>
	<li>Después de este proceso, entregar a los sujetos una pieza de ropa (por ejemplo, brazalete rojo) para la identificación futura y obtener medidas fisiológicas y psicológicas de los niveles de estrés (es decir, PSQ, 1-2 mL de saliva que escupe o se babea en un tubo de ensayo). Recoger muestras desde la tarde hasta la noche. NOTA: Estos datos fueron recogidos por los investigadores tanto 1) justo antes de que los sujetos entraran en el sitio y 2) inmediatamente después de finalizar la visita al sitio.</li>
</ol>4. Muestras de saliva
<ol><li>Para evitar la dilución de la muestra, pida a los sujetos que no coman, beban o enjuaguen bocas 10 minutos antes de proporcionar muestras de saliva.</li>
	<li>Pida a los sujetos que proporcionen muestras de saliva de 1-2 ml (excluyendo espuma) justo antes de la experiencia recreativa e inmediatamente después de la conclusión de la experiencia.</li>
	<li>Recoger muestras de saliva utilizando un método de baba pasiva:<ol>
<li>Proporcione a los sujetos un 2 en plástico de paja para beber gotea en un criovial de 2 ml (ver Tabla de Materiales).</li>
		<li>Instruya a los sujetos para que permitan que la saliva se ameta en la boca, luego babee por la paja y en el criovial. Según el Consejo de Recogida y Manipulación de Saliva (2011), 1 mL (excluyendo espuma) es adecuado para la mayoría de las pruebas.</li>
		<li>Etiquetar muestras con un número de identificación asignado de 3 dígitos (es decir, 001) y una letra para indicar el momento de la recopilación de datos (es decir, A representa la prueba previa, B representa la prueba posterior; donde 001A representa la muestra de saliva proporcionada por el participante 001 antes de realizar la experiencia recreativa).</li>
		<li>Después de que la muestra se recoge y etiquetado, entonces debe ser almacenado congelado temporalmente en una caja de espuma de esteroides llena de hielo seco durante no más de 2 h.</li>
		<li>Transportar las muestras marcadas a un laboratorio y almacenar a -80 oC hasta que se analicen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Cuantificación de la amilasa
NOTA: En este ensayo, hidroliza 2-cloro-p-nitrofenil--D-maltotrioside a 2-cloro-nitrofenol y forma glucosa, 2-cloro-p-nitrofenilo--D-maltoside, maltotriosa y glucosa. La reacción se controla a una absorbancia de 405 nm, que corresponde a la actividad de la amilasa en la muestra. Este ensayo demuestra la linealidad entre 0 y 2000 U/L.
<ol><li>
Materiales
	<ol>
<li>Se utilizó un conjunto de reactivos de amilasa líquida (ver Tabla de materiales)para cuantificar la amilasa en muestras de saliva. Todos los reactivos se proporcionan como líquidos listos para usar y se almacenan a 0-4 oC.</li>
		<li>Utilice un lector multimodo (ver Tabla de Materiales)capaz de leer una densidad óptica a 405 nm con una temperatura controlada a 37 oC durante el ensayo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análisis
	<ol>
<li>Descongelar las muestras en hielo antes del análisis.</li>
		<li>Las muestras diluir 1:10 con 1x PBS (10 l de saliva + 90 l de PBS).</li>
		<li>Analice cada muestra por duplicado.</li>
		<li>Equilibre el reactivo de amilasa a 20-25 oC durante al menos 30 min.</li>
		<li>Añadir 0,1 ml de reactivo de amilasa a una microplaca de 96 pocillos para cada muestra.</li>
		<li>Pre-incubar la microplaca a 37oC durante un mínimo de 5 min.</li>
		<li>Añadir 2,5 ml de la muestra al reactivo de amilasa.</li>
		<li>Tome una lectura inicial después de los 60 s.</li>
		<li>Continúe las lecturas cada 60 s durante 2 minutos adicionales.</li>
		<li>Calcular la diferencia media de absorbancia por minuto (.Abs/min).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Cálculo
	<ol>
<li>Para calcular la actividad de la amilasa, utilice la siguiente fórmula: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq1.jpg"> Donde ElAbs/min cambia en la diferencia de absorbancia por minuto; TV : volumen total de ensayo (0,1025 ml); *1000 - conversión de U/mL a U/L; MMA - absorción milimolar de 2-cloro-p-nitrofenol á 12.9; SV - volumen de la muestra (0.0025 mL); y LP - camino de luz (1 cm). La sustitución da: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq2.jpg"> Por lo tanto, multiplique los Abs/min por 3178x el factor de dilución (10) para obtener amilasa en U/L.</li>
		<li>Para muestras superiores a 2000 U/L (linealidad del ensayo) diluir aún más (al menos 2 veces usando PBS) y volver a analizar, luego multiplicar el resultado de la amilasa por el factor de dilución adicional.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. Cuantificación del cortisol
NOTA: En este ensayo, el cortisol libre se cuantifica en la saliva utilizando una curva estándar de cortisol. Las normas y las muestras diluidas se añaden a una placa de microtíter pre-recubierta con un anticuerpo. Se añade un conjugado de cortisol-peroxidasa a los pozos, seguido de la adición de un anticuerpo monoclonal al cortisol. La cantidad de unión conjugada cortisol/peroxidasa disminuye a medida que aumenta la concentración de cortisol en la muestra.
<ol><li>
Materiales
	<ol>
<li>Utilice un kit de inmunoensayo de enzimas cortisol (ver Tabla de materiales)para cuantificar el cortisol en muestras de saliva. Todos los reactivos necesarios para realizar este ensayo están incluidos en el kit. Todos los componentes del kit se almacenan a 0-4 oC antes de alcanzar la fecha de caducidad.</li>
		<li>Utilice un espectrofotómetro capaz de leer una densidad óptica (OD) a 450 nm (consulte Tabla de materiales),así como un software capaz de utilizar grabaciones OD del lector de placas para realizar un ajuste de curva logística de cuatro parámetros (4 PLC).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparación de reactivos
	<ol>
<li>Permita que todos los reactivos se equilibren a 20-25 oC durante un mínimo de 30 min.</li>
		<li>Diluir el tamón de ensayo de cortisol 1:5 utilizando agua desionizada.</li>
		<li>Diluir el tampón de lavado 1:20 con agua desionizada. NOTA: Los tampones de ensayo y lavado son estables durante 3 meses cuando se almacenan a 0-4 oC.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparación de muestras
	<ol>
<li>Descongelar las muestras en hielo antes del análisis.</li>
		<li>Diluir las muestras 1:10 con tampón de ensayo de cortisol (20 l de saliva + 180 l de tampón) y utilizar dentro de 2 h de preparación.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparación de normas
	<ol>
<li>Etiquetar tubos de ensayo de vidrio #1-#7.</li>
		<li>Pipet 225 l de tampón de ensayo en #1 de tubo y 125 ml de tampón en tubos #2-#7.</li>
		<li>Añadir 25 l de la solución de material de cortisol al tubo #1 y vórtice.</li>
		<li>Retire 125 ml de tampón del tubo #1 y agréguelo al tubo #2, luego vórtice.</li>
		<li>Repita las diluciones en serie para tubos #7 #3. NOTA: Las concentraciones finales de cortisol de cada norma se muestran en la Tabla1.</li>
		<li>Las normas deben utilizarse dentro de las 2 h de la preparación.</li>
	</ol>
</li>
</ol><table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>Estándar</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
			<td>#7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volumen de búfer de ensayo (L)</td>
			<td>225</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
<tr>
<td>Adición</td>
			<td>Stock Std</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volumen de Adición (L)</td>
			<td>25</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
			<td>125</td>
		</tr>
<tr>
<td>Concentración final (pg/mL)</td>
			<td>3200</td>
			<td>1600</td>
			<td>800</td>
			<td>400</td>
			<td>200</td>
			<td>100</td>
			<td>50</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabla 1: Tabla de preparación de curvas estándar.
<ol start="5"><li>
Análisis
	<ol>
<li>Utilice el diseño de placa que figura a continuación en la Figura 1 como guía para configurar la microplaca.</li>
		<li>Se recomienda utilizar una pipeta multicanal para la adición de reactivos.</li>
		<li>Añadir 50 l de muestras o normas en el número adecuado de pozos en la placa. Las muestras y los estándares deben ejecutarse por duplicado.</li>
		<li>Agregue el búfer de ensayo (75 l) en los pozos de enlace no específicos (NSB).</li>
		<li>Agregue el búfer de ensayo (50 l) en los pozos de unión máxima (B0) y los pozos estándar cero (en blanco).</li>
		<li>Añadir 25 s de la conjugación de cortisol a cada poca.</li>
		<li>Añadir 25 éL del anticuerpo cortisol a cada pocal, a excepción de los pozos NSB.</li>
		<li>Toque suavemente el lado de la placa para mezclar los reactivos.</li>
		<li>Cubra con el sellador de placas y agite a temperatura ambiente (RT) a 20-25 oC durante 1 h.</li>
		<li>Retire el contenido del pozo y enjuague cada poca con tampón de lavado (300 l). Toque el plato para secar las toallas absorbentes entre lavados.</li>
		<li>Añadir el sustrato de TMB a cada pocal (100 l).</li>
		<li>Incubar la placa a 20-25 oC durante 30 min sin agitar.</li>
		<li>Añadir solución de parada a cada pocal (50 l).</li>
		<li>Lea la densidad óptica en cada pocal de la microplaca a 450 nm.</li>
		<li>Promedio de las densidades ópticas para cada estándar, luego muestrear y restar la densidad óptica media para los pozos NSB.</li>
		<li>Calcule el % consolidado (B/B0) para todas las muestras utilizando controles de enlace máximo (B0).</li>
		<li>Cree una curva estándar utilizando un software capaz de ajustar la curva de regresión logística de cuatro parámetros, calculada a partir de la curva %B/B0.</li>
		<li>Multiplique el resultado por el factor de dilución (10) para obtener valores de cortisol en pg/mL.</li>
		<li>Las muestras con densidades ópticas que estén por encima del estándar más alto deben diluirse con el búfer de ensayo y volver a ensayo, entonces el resultado debe multiplicarse por el factor de dilución adicional.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59272/59272fig1.jpg"> Figura 1 : Diseño de placa de ejemplo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59272/59272fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
7. Medición psicológica (Cuestionario de Estrés Percibido)
<ol><li>Mida los niveles psicológicos de sujetos utilizando el PSQ publicado por Fliege et al.13, que incluye cuatro factores (preocupación, tensión, tensión, alegría) y utiliza 20 artículos.</li>
	<li>Pídale al sujeto que llene el PSQ justo antes de su experiencia recreativa e inmediatamente después de la conclusión de la experiencia.</li>
	<li>Etiquete cuestionarios con un número de identificación de 3 dígitos idéntico al nivel biofisiológico de estrés de cada sujeto.</li>
</ol>

<ol><li>Hansmann, R., Hug, S., Seeland, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+and+stress+relief+through+physical+activities+in+forests+and+parks%5BTitle%5D)+AND+%22Urban+Forestry+and+Urban+Greening%22%5BJournal%5D)">Restoration and stress relief through physical activities in forests and parks.</a> Urban Forestry and Urban Greening. 6, 213-225 (2007).</li>
<li>Krantz, D. S., McCeney, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+psychological+and+social+factors+on+organic+disease%3A+A+critical+assessment+of+research+on+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of psychological and social factors on organic disease: A critical assessment of research on coronary heart disease.</a> Annual Review of Psychology. 53, 341-369 (2002).</li>
<li>Ward Thompson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+green+space+is+linked+to+less+stress+in+deprived+communities%3A+Evidence+from+salivary+cortisol+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Landscape+and+Urban+Planning%22%5BJournal%5D)">More green space is linked to less stress in deprived communities: Evidence from salivary cortisol patterns.</a> Landscape and Urban Planning. 105, 221-229 (2012).</li>
<li>Haluza, D., Schonbauer, R., Cervinka, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+perspectives+for+public+health%3A+A+narrative+on+the+physiological+effects+of+experiencing+outdoor+nature%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Green perspectives for public health: A narrative on the physiological effects of experiencing outdoor nature.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 11, 5445-5461 (2014).</li>
<li>Korpela, K. M., Ylen, M., Tyrväinen, L., Silvennomen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+restorative+experiences+in+everyday+favorite+places%5BTitle%5D)+AND+%22Health+and+Place%22%5BJournal%5D)">Determinants of restorative experiences in everyday favorite places.</a> Health and Place. 14, 636-652 (2008).</li>
<li>Mantler, A., Logan, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+environments+and+mental+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Natural environments and mental health.</a> Advances in Integrative Medicine. 2, 5-12 (2015).</li>
<li>Mayer, F. S., McPherson-Frantz, C., Bruehlman-Senecal, E., Dolliver, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+is+nature+beneficial%3F+the+role+of+connectedness+to+nature%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Why is nature beneficial? the role of connectedness to nature.</a> Environment and Behavior. 41, 307-643 (2009).</li>
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<li>Ulrich, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+recovery+during+exposure+to+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Stress recovery during exposure to natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 11, 201-230 (1991).</li>
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<li>Gidlow, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Where+to+put+your+best+foot+forward%3A+Psycho-physiological+responses+to+walking+in+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Where to put your best foot forward: Psycho-physiological responses to walking in natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 45, 22-29 (2016).</li>
<li>Ewert, A., Chang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levels+of+nature+and+stress+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Levels of nature and stress response.</a> Behavioral Sciences. 8 (5), 49(2018).</li>
<li>Wyles, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+some+natural+environments+more+psychologically+beneficial+than+others%3F+The+importance+of+type+and+quality+on+connectedness+to+nature+and+psychological+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Are some natural environments more psychologically beneficial than others? The importance of type and quality on connectedness to nature and psychological restoration.</a> Environment and Behavior. 51 (2), 111-143 (2019).</li>
</ol>

Los autores no declaran conflictos de intereses.

El objetivo de este estudio es identificar posibles cambios en el estrés utilizando instrumentos biofísicos y psicológicos después de visitas recreativas a tres entornos diferentes con diferentes niveles de naturaleza. Tanto el cortisol como la amilasa han demostrado ser indicadores fiables de los niveles de estrés psicológico. El procedimiento de ensayo de amilasa descrito en este estudio se ha adaptado a un formato de 96 pozos. Cuando los niveles de amilasa en la saliva son altos, los cambios de absorbancia ocurren ráp...

Los niveles elevados de estrés se han relacionado durante mucho tiempo con muchas enfermedades graves como enfermedades del corazón, obesidad, y trastornos psicológicos1,2,3. Un creciente cuerpo de investigación sugiere que la proximidad o las visitas a entornos naturales como el parque y los paisajes no desarrollados pueden tener un efecto notable en el bienestar psicológico y la disminución de los niveles de estrés1,4, 5,6,7,8,9,10. Las explicaciones sobre los efectos de los entornos naturales y los niveles de estrés han incluido lo siguiente: (1) los entornos naturales proporcionan lugares para la actividad física8,11 y (2) los visitantes a entornos naturales tienen la capacidad de enfocarse en más procesos de pensamiento no tareas, lo que conduce a una reducción de la fatiga de atención12. Para determinar los efectos de la naturaleza en la reducción del estrés, este estudio utiliza un autoinforme de estrés psicológico (PSQ) y dos biomarcadores basados en saliva, cortisol y amilasa, después de visitar a tres sitios de recreación diferentes. Estos lugares varían entre sus niveles de "naturalidad" e incluyen un entorno de tipo desierto, parque municipal, y gimnasio local y instalaciones recreativas.
Este estudio tiene como objetivo abordar las siguientes preguntas de investigación: (RQ1) ¿Existen diferencias en los niveles de estrés biofísico medidos por cortisol salival y amilasa en comparación con los tres sitios (es decir, natural, semi-natural, construido)? (RQ2) ¿Hay diferencias en los niveles de estrés psicológico medidos por el PSQ (manifestado por cuatro construcciones: demandas, preocupaciones, tensión y alegría) en comparación con los tres sitios (es decir, natural, seminatural, construido)?

<table><tbody><tr><td>Kit de inmunoensayo enzimático de cortisol</td><td>DetectX</td><td>K003-H1</td><td>El kit de inmunoensayo enzimático de cortisol está diseñado para medir cuantitativamente el cortisol presente en extractos fecales secos, saliva, orina, suero, plasma y muestras de medios de cultivo.</td></tr><tr><td>Etiquetas criogénicas para almacenamiento criogénico</td><td>Fisherbrand</td><td>5-910-A</td><td>Adhesivo único que soporta temperaturas extremas</td></tr><tr><td>Amilasa líquida (CNPG3) Juego de reactivos</td><td>Pointe Scientific</td><td>A7564</td><td>Para la determinación cinética cuantitativa de la actividad de la &alfa;-amilasa en suero humano.</td></tr><tr><td>Tubos de polipropileno de fondo redondo de 2 ml con tapa de rosca externa</td><td>Greiner Bio-One</td><td>07-000-257</td><td>2.0 ml U-BTM Cryo.s polipropileno autónomo esterilizado</td></tr><tr><td>Synergy Multi-Mode Microplate Reader</td><td>BioTek</td><td></td><td>Es un lector de microplacas de absorbancia, fluorescencia y luminiscencia de un solo canal que utiliza un diseño de doble óptica para realizar mediciones de muestras en formato de microplaca.</td></tr></tbody></table>

medición de los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza

Measuring Biophysical and Psychological Stress Levels Following Visitation to Three Locations with Differing Levels of Nature

La visita a entornos naturales se ha relacionado con la reducción del estrés psicológico. Aunque la mayoría de las investigaciones relacionadas con el estrés se han basado en formatos de autoinforme, un número creciente de estudios ahora incorporan hormonas y catalizadores biológicos relacionados con el estrés, como el cortisol y la amilasa, para medir los niveles de estrés. Aquí se presenta un protocolo para examinar los efectos sobre los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares diferentes con diferentes niveles de naturaleza. Los niveles de estrés psicológico biofísico y autoinformado se miden inmediatamente al entrar en los lugares seleccionados y justo antes de que los visitantes abandonen el sitio. Utilizando un método "drool", la medida biofísica consiste en 1-2 ml de muestras de saliva proporcionadas por sujetos de estudio al entrar en uno de los tres lugares de estudio. Según lo prescrito por la literatura existente, la saliva se recoge dentro de un plazo de 45 minutos después del final de la participación del visitante en el lugar. Después de la recolección de saliva, las muestras se etiquetan y se transportan a un laboratorio biológico. El cortisol es la variable biofísica de interés en este estudio y se mide mediante un proceso ELISA con un lector de placas TECAN. Para medir el estrés autoinformado, el Cuestionario de Estrés Percibido (PSQ, por sus que se informa de los niveles de preocupación, tensión, alegría y demandas percibidas). Los datos se recopilan en los tres sitios a última hora de la tarde hasta primera hora de la noche. En comparación con los tres entornos, los niveles de tensión, medidos tanto por los marcadores biológicos como por los autoinformes, son significativamente más bajos después de la visita al entorno más natural.

Descripción de la muestra Utilizando una técnica de muestreo de cuotas, este estudio reclutó a 35 visitantes de cada uno de los tres sitios. En total, se reclutaron 105 sujetos en este estudio, incluidos 63 hombres y 42 mujeres. Las edades promedio de los visitantes reclutados en tres sitios diferentes fueron de 25,9 años (Sitio A), 37,2 años (Sitio B) y 28,8 años (Sitio C). También se registraron las frecuencias de las visitas de los sujetos a los tres sitios seleccionados. Para el Sitio A y el Sitio...

El propósito de este artículo es identificar los cambios en los niveles de estrés después de la visita a tres entornos diferentes y describir los métodos utilizados para identificar los niveles de estrés basados en medidas de cortisol salival, amilasa y un autoinforme psicológico Instrumento.

Medición de los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza

Visitation to natural environments has been linked to psychological stress reduction. Although most stress-related research has relied on self-report ...

Aquí presentamos un protocolo, utilizado para examinar los efectos sobre los niveles de estrés biofísico y psicológico tras una visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza. Estamos interesados en saber si un sitio con mayores niveles de naturalidad será más eficaz para ayudar a los participantes a reducir sus niveles de estrés. Además de utilizar el cuestionario de autoinforjo, la principal ventaja de usar esta técnica es que analizar los niveles de cortisol y amilasa recogidos de las muestras de saliva de los participantes puede darnos una lectura más precisa y una mejor comprensión de cómo nuestro cuerpo realmente responde después de la visita a los sitios de recreación.Demostrando el procedimiento estará el Dr. Hocevar, un profesor de la Universidad de Indiana. Comienza presentándote al tema. Proporcione un formulario de consentimiento para firmar explicando la naturaleza voluntaria, el propósito y los procedimientos del estudio.Entregue al sujeto un brazalete rojo para su futura identificación. Obtener medidas fisiológicas y psicológicas de los niveles de estrés a través de muestras de saliva, justo antes de la experiencia recreativa, e inmediatamente después de la conclusión de la experiencia. Recoger una muestra de saliva de uno a dos mililitros usando un método de baba pasiva.Instruya a los sujetos que permitan que la saliva se acose en la boca, luego babee por la paja de dos pulgadas y en el vial de crio hasta que se haya recogido un mililitro. Etiquete muestras con un número de ID de tres dígitos asignado y una letra para indicar el momento de la recopilación de datos. Entonces, congelar temporalmente la muestra en una caja de espuma de esteroides llena de hielo seco durante no más de dos horas.Transportar las muestras marcadas a un laboratorio y almacenar a menos 80 grados Celsius hasta que se analicen. Por último, utilice un reactivo de amilasa líquida establecido para cuantificar la alfa amilasa en muestras de saliva. A continuación, utilice un lector multimodo capaz de leer una densidad óptica a 405 nanómetros con la temperatura controlada a 37 grados centígrados durante el ensayo.En primer lugar, adquirir un kit de aminoácidos enzimáticos de cortisol para cuantificar el cortisol en muestras de saliva, un espectrofotómetro para leer una densidad óptica, u OD, a 450 nanómetros, así como software capaz de utilizar grabaciones OD del lector de placas para realizar un ajuste de curva logística de cuatro parámetros. Deje que todos los reactivos se equilibren a 20 a 25 grados centígrados durante un mínimo de 30 minutos. Diluir el tampón de ensayo de cortisol de uno a cinco usando agua desionizada, luego diluir el tampón de lavado del uno a 20 usando agua desionizada.A continuación, descongele las muestras en hielo antes del análisis. Luego, diluir las muestras de uno a 10 con tampón de ensayo de cortisol y utilizar dentro de las dos horas de la preparación. Para preparar las normas, etiqueta los tubos de ensayo de vidrio del uno al siete.Luego, pipetea 225 microlitros de tampón de ensayo en el tubo número uno, y 125 microlitros de tampón en tubos dos a siete. A continuación, agregue 25 microlitros de la solución de cortisol stock al tubo número uno y vórtice. Finalmente, retire 125 microlitros de tampón del tubo número uno y agréguelo al tubo número dos, luego vuelva a vórtice.Los resultados indicaron una disminución en los niveles significativos de cortisol salivario después de visitar el sitio A, el entorno natural. No se observaron cambios significativos en los niveles de cortisol en el sitio B y C.Further, los niveles de alfa amilasa aumentaron después de que los sujetos visitaron el sitio C.Después de visitar los tres lugares y utilizando los cuestionarios de autoinfor informe, se observaron disminuciones significativas en los factores de demandas y preocupación. No se observaron cambios significativos en la tensión del factor para ninguno de los tres lugares y se reportaron aumentos significativos en los sitios A y en el sitio B para la alegría del factor.Por lo general, gran parte de la investigación realizada sobre la reducción del estrés se ha basado en cuestionarios de autoinfor de informes. En este estudio, recogimos las muestras de saliva de los participantes para analizar cómo nuestro cuerpo realmente responde después de la visita a tres sitios con diferentes niveles de naturalidad. En esta visualización, presentamos tanto técnicas de laboratorio como un ejemplo de la recopilación de datos rellenado.Esta técnica permite al investigador capturar la reacción de nuestro cuerpo a diferentes entornos. En confirma nuestra hipótesis de que el medio ambiente natural puede tener efectos positivos en la salud humana. Se sugiere que la investigación futura aplique mediciones biofísicas del nivel de estrés en diferentes entornos naturales o diferentes actividades al aire libre con un verdadero diseño experimental.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

En este video se describe un método para evaluar la reacción psicofisiológica persona al estrés utilizando biofeedback. También presentará las directrices generales para la planificación del tratamiento.

Evaluación psicofisiológica de estrés uso de Biofeedback

En este artículo se describe un protocolo para la inducción de estrés psicológico en los participantes, lo que permite a los investigadores para medir las respuestas psicológicas, fisiológicas y neuroendocrina al estrés en los participantes o entre grupos.

El estrés social Trier Protocolo de prueba para la inducción de estrés psicológico

Se presenta un protocolo de estudio sobre cómo evaluar las asociaciones entre escuchar música y el estrés psicobiológico (medido por los niveles de estrés subjetivo, cortisol salival y alfa-amilasa salival) en la vida diaria. Se proporciona asesoramiento sobre el diseño del estudio, los materiales, los métodos, la selección de los participantes y el manejo estadístico. Se presentan y discuten resultados representativos.

Evaluación de los efectos de escucha de la música sobre el estrés en la vida diaria Psicobiológica

Aquí presentamos un protocolo que provocó la reactividad del cortisol en una muestra adolescente mexicana vulnerable utilizando una versión modificada del Test de Estrés Social de Trier (TSST). Se recogieron muestras de saliva al inicio del estudio, 15, 30 y 45 minutos después de la TSST. Las investigaciones futuras podrían utilizar este TSST modificado con jóvenes vulnerables.

Una Prueba de Estrés Social Modificada de Trier para Adolescentes Mexicanos Vulnerables

El estrés es un componente inevitable y persistente de la vida y se consideran enfoques holísticos para su gestión. Una metodología estandarizada fue creada para demostrar la factibilidad de un protocolo de gestión de estrés basada en la respiración que puede ser utilizado con tecnología portátil disponible en el mercado.

Un programa de manejo del estrés basado en la comunidad: Uso de dispositivos portátiles para evaluar todo cuerpo respuestas fisiológicas en el laboratorio no

Se propone un protocolo para evaluar soluciones basadas en accesorios personales de muñeca de fuera plataforma comercial (COTS) para estimar el estrés en los estudiantes. El protocolo se lleva a cabo en dos fases, una prueba de inducción de estrés de laboratorio inicial y una etapa de seguimiento tendrá lugar en el salón de clases mientras el estudiante está realizando actividades académicas.

Evaluación de Wearables comercial fuera de la plataforma-muñeca para estimar la tensión en los estudiantes

Experimentos de realidad virtual (VR) pueden ser difíciles de implementar y requieren una planificación meticulosa. Este protocolo describe un método para el diseño y puesta en práctica de la experimentos VR que recopila datos fisiológicos de los participantes humanos. Los experimentos en el marco de entornos virtuales (EVA) se emplea para acelerar este proceso.

Experimentos de realidad virtual con medidas fisiológicas

Aquí presentamos un original método mixto combinando cuantitativo y un enfoque cualitativo para examinar con precisión experiencias de los participantes durante la prueba de estrés Social de Trier y la prueba de estrés Social de Trier para grupos.

Enfoque fenomenológico enactivo a Trier Social Stress prueba: un punto de vista de métodos mixtos

El presente protocolo introduce una aplicación no comercial de desarrollo propio para recopilar datos in situ en tiempo real, incluidas escalas psicológicas, ubicación GPS, frecuencia cardíaca y nivel de saturación de oxígeno en sangre, así como los procedimientos operativos de la aplicación. Se utilizó un estudio empírico realizado en Taiwán en 2020 como ejemplo de aplicación.

Una aplicación para emparejarse con dispositivos portátiles para monitorear el estado de salud personal

Aquí presentamos un protocolo para investigar los efectos de exposiciones inmersivas de realidad virtual de 360 grados en el estado de ánimo y la corporalidad. Los participantes experimentan entornos forestales y marinos en posturas sentadas y de pie, con evaluaciones que utilizan escalas estandarizadas para evaluar los resultados terapéuticos de las intervenciones de salud mental.

Terapia de la Naturaleza en VR: Encarnación y Regulación Emocional a través de Entornos Virtuales Inmersivos

Aprende a medir el estrés biofísico y psicológico en entornos naturales mediante análisis de cortisol y α-amilasa en saliva. Este método permite evaluar objetivamente los efectos restauradores de la naturaleza.

Medición de los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza (Video) | JoVE Journal

Medición de los niveles de estrés biofísico y psicológico después de la visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza

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