Name: Estudio de los efectos de radiación de tejido normal con hidrogeles de matriz extracelular (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 1 s
Description: Aprende a estudiar los efectos de la radiación en tejido normal mediante hidrogeles de matriz extracelular derivados de tejido adiposo murino. Este método permite evaluar cambios en la matriz extracelular irradiada y su impacto en el comportamiento de células tumorales.

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Los autores agradecen a la Dra. Laura L. Bronsart por proporcionar las células GFP- y luciferase-4T1, el Dr. Edward L. LaGory por consejos sobre 1-([4-(Xylylazo)xylyl]azo)-2-naphthol manchación, Dr. Craig L. Duvall para IVIS y uso de liofilizador, y Dr. Scott A. Guelcher para el rheómetro Uso. Esta investigación fue apoyada financieramente por la subvención de los NIH #R00CA201304.

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<li>Mierke, C. T., Frey, B., Fellner, M., Herrmann, M., Fabry, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin+5+1+facilitates+cancer+cell+invasion+through+enhanced+contractile+forces%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Integrin 5 1 facilitates cancer cell invasion through enhanced contractile forces.</a> Journal of Cell Science. 124 (3), 369-383 (2011).</li>
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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Este método de formación de hidrogel depende en gran medida de la cantidad de tejido inicial. Las mFP de murine son pequeñas, y el proceso de descelularización da lugar a una reducción significativa del material (Tabla 1). El proceso se puede repetir con más equipos multifunción para aumentar el rendimiento final. El fresado es otro paso importante que puede conducir a la pérdida de material. Otros han demostrado éxito con un molino criogénico, pero este protocolo se basa enel fre...

El cáncer se caracteriza por la proliferación excesiva de células que pueden evadir la apoptosis y también hacer metástasis en sitios distantes1. El cáncer de mama es una de las formas más comunes entre las mujeres en los Estados Unidos, con un estimadode 266.000 nuevos casos y 40.000 muertes en 2018 2. Un subtipo particularmente agresivo y difícil de tratar es el cáncer de mama triple negativo (TNBC), que carece del receptor de estrógeno (ER), el receptor de progesterona (PR) y el factor de crecimiento epidérmico humano (HER2). La radioterapia se utiliza comúnmente en el cáncer de mama para eliminar las células tumorales residuales después de la tumorectomía, pero más del 13% de los pacientes con TNBC todavía experimentan recurrencia en el sitio primario del tumor3.
Se sabe que la radioterapia es eficaz para mitigar la metástasis y la recurrencia porque lacombinación de lumpectomía y radiación da como resultado la misma supervivencia a largo plazo que la mastectomía 4. Sin embargo, recientemente se ha demostrado que el tratamiento de radiaciónestá asociado con la recurrencia local al sitio del tumor primario en entornos inmunocomprometidos 5,6. Además, es bien sabido que la radiación cambia la matriz extracelular (ECM) del tejido normal induciendo la fibrosis7. Por lo tanto, es importante entender el papel de los cambios de ECM inducidos por la radiación en la dictación del comportamiento de las células tumorales.
Los tejidos descelularizados se hanutilizado como modelos in vitro para estudiar la enfermedad 8,9. Estos tejidos descelularizados preservan la composición de la ECM y recapitulan el complejo in vivo ECM. Este eCM de tejido descelularizado se puede procesar y digerir para formar hidrogeles ECM reconstituidos que se pueden utilizar para estudiar el crecimiento celular y la función10,11. Por ejemplo, los hidrogeles inyectables derivados del lipoaspirato humano descelularizado y del tejido miocárdico sirvieron como métodos no invasivos de ingeniería tisular, y un hidrogel derivado del tejido pulmonar porcino se utilizó como método in vitro de prueba accesorio de células madre mesenquimales y viabilidad12,13,14. Sin embargo, no se ha investigado el efecto del daño normal por radiación tisular en las propiedades de ECM.
Los hidrogeles derivados de ECM tienen el mayor potencial para el estudio in vitro de fenómenos in vivo. Se han estudiado otros materiales, incluyendo colágeno, fibrina y matrigel, pero es difícil recapitular sintéticamente la composición del ECM13. Una ventaja del uso de hidrogeles derivados de ECM es que el ECM contiene las proteínas y factores de crecimiento necesarios para un tejido en particular14,15. La irradiación de tejido normal durante la tumorectomía causa cambios significativos en el ECM, y los hidrogeles derivados de ECM se pueden utilizar para estudiar este efecto in vitro. Este método podría conducir a modelos in vitro más complejos y más precisos de la enfermedad.
En este estudio, sometimos almohadillas de grasa mamaria murinos (MFP) a radiación ex vivo. Los equipos multifunción se descelularizaron y se convirtieron en una solución pregel. Los hidrogeles se formaron con células 4T1 incrustadas, una línea celular de TNBC murina. Se examinaron las propiedades reológicas del material hidrogel y se evaluó la dinámica de las células tumorales dentro de los hidrogeles. Los hidrogeles fabricados a partir de equipos multifunción irradiados mejoraron la proliferación de células tumorales. Estudios futuros incorporarán otros tipos de células para estudiar las interacciones células celulares en el contexto de la recurrencia del cáncer después de la terapia.

<table><tbody><tr><td>10% Formol tamponado neutro, cubo con espiga</td><td>VWR</td><td>16004-128-2-metilbutano</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Alfa Aesar</td><td>19387-AR</td><td></td></tr> <tr><td>2000ex Reómetro</td><td>TA Instruments</td><td>10D4335</td><td>reómetro</td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A1933-25G-calceína</td><td></td></tr> <tr><td>acetoximetilo (calceína AM)</td><td>Molecular Probes, Inc.</td><td>C1430-D-Luciferina</td><td></td></tr> <tr><td>Luciferina Luciérnaga, sal de potasio</td><td>Biosynth Chemistry & Biología</td><td>L-8820</td><td>(S)-4,5-Dihidro-2-(6-hidroxi-2-benzotiazolil)-4-tiazolecarboxílico ácido sal potásica</td></tr><tr><td>DPX Mountant para histología</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>06522-500ML-Dulbecco</td><td></td></tr> <tr><td>solución salina tamponada con fosfato</td><td>Gibco</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>14040133-eosina-Y con floxina Homodímero</td><td></td><td></td><td></td> de etidio Richard-Allan Scientific 71304 eosina</tr><tr><td></td><td>Sondas Moleculares, Inc.</td><td>E1169</td><td>homodímero de etidio-1 (EthD-1)</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0926-500ML-Fisher</td><td></td></tr> <tr><td>Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound</td><td>Fisher Scientific</td><td>23-730-571</td><td>medio de inclusión de criostato</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-01</td><td>medio de montaje de base acuosa</td></tr><tr><td>FreeZone 4.5</td><td>Labconco</td><td>7751020</td><td>liofilizador</td></tr><tr><td>Hoechst 33342 Solución (20 mM)</td><td>Thermo Scientific</td><td>62249</td><td>colorante fluorescente azul</td></tr><tr><td>Ácido clorhídrico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>258148-500ML-IVIS</td><td></td></tr> <tr><td>Lumina III</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136334</td><td>sistema de imagen de bioluminiscencia</td></tr><tr><td>Kimtech Science Kimwipes</td><td>Kimberly Clark</td><td></td><td>toallitas para tareas delicadas</td></tr><tr><td>N-Propanol (sin peróxido/secuenciación), Fisher BioReagents</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1130-500-Oil</td><td></td></tr> <tr><td>Red O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O0625-25G</td><td>1-([4-(xililazo)xilil]azo)-2-naftol</td></tr><tr><td>OPS Diagnostics CryoGrinder</td><td>OPS Diagnostics, LLC</td><td>CG-08-02-PBS</td><td></td></tr> <tr><td>(10X), pH 7.4</td><td>Quality Biological, Inc.</td><td>119-069-151</td><td>Solución salina tamponada con fosfato</td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina</td><td>Gibco</td><td>15140-122-Pepsina</td><td></td></tr> <tr><td>de la mucosa gástrica porcina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6887-5G</td><td>pepsina</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td> Ácido peracético Sigma-Aldrich 77240-100ML-Phalloidin-iFluor</tr> <tr><td>594 Reactivo (ab176757)</td><td>abcam</td><td>ab176757</td><td>conjugado de faloidina</td></tr><tr><td>Propilenglicol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W294004-1KG-K-Richard-Allan</td><td></td></tr> <tr><td>Scientific Signature Series Reactivo azulado</td><td>Richard-Allan Scientific</td><td>7301L</td> agente <td>azulado</td></tr><tr><td>Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxilina 7211</td><td>Richard-Allan Scientific</td><td>7211-RPMI</td><td></td></tr> <tr><td>Medio 1640</td><td>Gibco</td><td>11875-093-Desoxicolato de</td><td></td></tr> <tr><td>sodio, 98%</td><td>Frontier Scientific</td><td>JK559522</td><td>ácido desoxicólico</td></tr><tr><td>sacarosa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5016-Triton</td><td></td></tr> <tr><td>x-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-100ML</td><<td>em>t-octilfenoxipolietoxietanol</td></tr><tr><td>tripsina-EDTA (0,25%), rojo fenol</td><td>Gibco</td><td>25200-056-Whatman</td><td></td></tr> <tr><td>papel de filtro cualitativo, Grado 4</td><td>Whatman</td><td>1004-110</td><td>papel de filtro cualitativo de grado 4</td></tr><tr><td>xilenos (certificado ACS), Fisher Chemical</td><td>Fisher Scientific</td><td>X5-4</td><td>-</td></tr></tbody></table>

estudio de los efectos de radiación de tejido normal con hidrogeles de matriz extracelular

Studying Normal Tissue Radiation Effects using Extracellular Matrix Hydrogels

La radiación es una terapia para pacientes con cáncer de mama triple negativo. Se desconoce el efecto de la radiación en la matriz extracelular (ECM) del tejido mamario sano y su papel en la recurrencia local en el sitio del tumor primario. Aquí presentamos un método para la descelularización, liofilización y fabricación de hidrogeles ECM derivados de almohadillas de grasa mamaria murina. Se presentan resultados sobre la eficacia del proceso de descelularización, y se evaluaron los parámetros reológicos. Las células de cáncer de mama etiquetadas por GFP y luciferasse encapsuladas en los hidrogeles demostraron un aumento de la proliferación en hidrogeles irradiados. Finalmente, se empleó la tinción conjugada con phalloidin para visualizar la organización del citoesqueleto de las células tumorales encapsuladas. Nuestro objetivo es presentar un método para la fabricación de hidrogeles para el estudio in vitro que imitan el entorno del tejido mamario in vivo y su respuesta a la radiación con el fin de estudiar el comportamiento de las células tumorales.

Las mFP se descelularizaron tras la irradiación mediante el procedimiento que se muestra en la Figura 1A. Se muestran las mFP de predescelularización (figura1B)y postdescelularización (figura 1C). La descelularización se confirmó utilizando la tinción de hematoxilina y eosina (H &amp; E), y se utilizó la tinción 1-([4-(Xylylazo)xylyl]azo)-2-naphthol para evaluar el contenido de lípidos (Figura 2). También se evaluaron las...

Este protocolo presenta un método para la descelularización y posterior formación de hidrogel de almohadillas de grasa mamaria murina después de la irradiación ex vivo.

Estudio de los efectos de radiación de tejido normal con hidrogeles de matriz extracelular

Radiation is a therapy for patients with triple negative breast cancer. The effect of radiation on the extracellular matrix (ECM) of healthy breast tissue ...

Este protocolo muestra que la radiación influye en las propiedades de la matriz extracelular del tejido adiposo en la almohadilla de grasa mamaria murina. La adición de radiación en un modelo de decelularización no se ha hecho antes. Esta técnica utiliza varios pasos de lavado que cada uno sirve un propósito químico único en el proceso de descelularización.La especificidad de esta técnica permite lavados químicos más suaves, para preservar mejor las propiedades del tejido. La recaída del cáncer de mama ocurre después de la terapia, especialmente en casos triples negativos. Evaluar cómo la matriz extracelular irradiada altera el comportamiento de las células tumorales conducirá a descubrimientos importantes sobre los mecanismos de recurrencia.Después de irradiar muestras, utilizando una fuente de cesio, transfiera los MFP irradiados y los medios RPMI completos a un gabinete de bioseguridad. Llene los platos de seis centímetros o 10 centímetros con medios suficientes para sumergir los equipos multifunción. Incubar a 37 grados centígrados, con un 5% de dióxido de carbono, durante dos días.En primer lugar, coloque los MFP en platos de seis centímetros con cinco mililitros de solución Trypsin-EDTA. Rocíe y limpie los platos con 70% de etanol e incubar a 37 grados centígrados durante una hora. Utilice coladores de 0,7 mililitros para lavar los equipos multifunción con agua desionizada, vertiendo agua sobre el tejido tres veces.Utilice fórceps para masajear manualmente el tejido entre lavados. A continuación, seque brevemente el tejido en una delicada limpieza de tareas y sopesarlo. Coloque los tejidos secos en un vaso de precipitados preautoclavedo, que contenga una barra de agitación de tamaño adecuado y cubra los tejidos con 60 mililitros de 3%t-octylphenoxypolyethoxyethanol por gramo de tejido.Revuelva durante una hora a temperatura ambiente. Luego arroja el contenido del vaso de precipitados en un colador. Enjuague el vaso de precipitados con agua desionizada y vierta esto en los tejidos.Repita este proceso de enjuague dos veces más, asegurándose de usar fórceps para masajear manualmente el tejido entre enjuagues. Después de esto, seque brevemente el tejido en una delicada limpieza de la tarea y pesar. Coloque los tejidos y las barras de agitación de nuevo en los mismos vasos y cúbralos con 60 mililitros de 4% de ácido desoxicólico por gramo de tejido.Revuelva a temperatura ambiente durante una hora. A continuación, vierta el contenido del vaso de precipitados en un colador de malla, enjuague el vaso de precipitados con agua desionizada y vierta esto en los tejidos. Repita este proceso de enjuague dos veces más, asegurándose de usar fórceps para masajear manualmente el tejido entre enjuagues.Seque brevemente el tejido enjuagado en una delicada toallita de tarea y sopesarlo. Colocar los tejidos secos en el mismo vaso de precipitados, junto con agua fresca desionizada, complementada con 1%penicilina-estreptomicina. Cubrir el vaso de precipitados firmemente con película de parafina y salir a 4 grados Celsius durante la noche.Al día siguiente drenar el contenido del vaso de precipitados en un colador, secar brevemente el tejido en una delicada limpieza de la tarea y pesarlo. A continuación, coloque los equipos multifunción en el mismo vaso de precipitados con una barra de agitación de tamaño adecuado. Cubrir el tejido con 60 mililitros de una solución que contenga 4%etanol y 0,1%ácido peracético por gramo de tejido.Revuelva a temperatura ambiente durante dos horas. Volca el contenido del vaso de precipitados en un colador de 0,7 milímetros. Use fórceps para masajear manualmente el tejido y volver a colocar el contenido en el vaso de precipitados.Lavar el tejido cubriéndolo con 60 mililitros de 1X PBS por gramo de tejido. Revuelva a temperatura ambiente durante 15 minutos. Repita todo este proceso de lavado una vez más.A continuación, volque el contenido del vaso de precipitados en un colador de 0,7 milímetros. Usando fórceps, masajee manualmente el tejido y vuelva a colocar el contenido en el vaso de precipitados. Lavar el tejido cubriéndolo con 60 mililitros de agua desionizada por gramo de tejido.Revuelva a temperatura ambiente durante 15 minutos. Repita todo este proceso de lavado una vez más. Seque brevemente el tejido lavado en una delicada toallita de tarea y sopesarlo.Vierta el tejido y el contenido en un colador y use fórceps para masajear manualmente el tejido. Coloque el contenido de nuevo en el vaso de precipitados y cubra los tejidos con 60 mililitros de 100%n-propanol por gramo de tejido. Revuelva a temperatura ambiente durante una hora.Luego, seque brevemente el tejido en una delicada toallita de tarea y sopesarlo. Vierta el tejido y el contenido en un colador de 0,7 milímetros y use fórceps para masajear manualmente el tejido. Coloque el contenido de nuevo en el vaso de precipitados y lave el tejido cubriéndolo con 60 mililitros de agua desionizada por gramo de tejido.Revuelva a temperatura ambiente durante 15 minutos. Repita este proceso de lavado tres veces. Después de esto, seque brevemente el tejido en una delicada limpieza de la tarea y sopesarlo.Transfiera el tejido a un tubo etiquetado de 15 mililitros y congele a 80 grados Celsius negativos durante la noche. Primero, llene un recipiente poco profundo con nitrógeno líquido. Retire las muestras del congelador y pese cada impresora multifunción liofilizada.Coloque una muestra en el mortero, use un guante criogénico para sostener el mortero en el nitrógeno líquido. A continuación, utilice un pestillo, unido a un taladro de mano, para fresar la muestra. Fresar en intervalos de un minuto para comprobar el progreso y retirar la mano enguanada del nitrógeno líquido.Repita este proceso de molienda para todas las muestras, asegurándose de rociar y limpiar el mortero y el pestillo con etanol entre cada muestra. Almacene las muestras en polvo en tubos de 15 mililitros a 80 grados Celsius negativos hasta que estén listas para usar. Para comenzar, retire las muestras del congelador y descongele a temperatura ambiente.Mientras las muestras se descongelan, mezcle la pepsina en ácido clorhídrico para formar una solución de Pepsin-HCL. A continuación, agregue el polvo de muestra y la solución Pepsin-HCL a un tubo de 15 mililitros, agregue una pequeña barra de agitación y revuelva durante 48 horas. Después de esto, coloque los tubos en hielo durante cinco minutos.Agregue 10X PBS a cada muestra, de manera que la solución final tenga una concentración de 1X PBS. A continuación, añada un 10% de volumen/volumen, 0,1 molar de hidróxido sódico a cada solución, para alcanzar el pH 7.4, utilizando papel de pH para probar cada solución individualmente. Usando una solución de gel de pH 7.4, resuspender la GFP peletada y la luciferasa etiquetadas 4T1 a una concentración de 500, 000 o 1.000, 000 células por mililitro de solución de gel.Agregue 16 microlitros de solución de células de gel a cada pozo de un portaobjetos de cámara de 16 pozos e incubar a 37 grados centígrados durante 30 minutos. Después de esto, agregue 100 microlitros de medios RPMI completos a cada pozo. Continúe incubando a 37 grados centígrados durante 48 horas.Luego, utilice un microscopio de fluorescencia para observar las células a una longitud de onda de excitación de 519 nanómetros y una longitud de onda de emisión de 618 nanómetros. En este estudio, se estudian los efectos normales de la radiación tisular, utilizando hidrogeles de matriz extracelular. La tinción de hematoxilina y eosina se utiliza para confirmar la descelularización, a través de la pérdida de núcleos y otros rastros de ADN.Mientras que la tinción de aceite rojo O se utiliza para evaluar el contenido de lípidos y confirmar la retención de una morfología dipasím. Las propiedades reológicas de los hidrogeles ECM se evalúan a 37 grados centígrados. El módulo de almacenamiento es mayor que el módulo de pérdida para todas las condiciones, demostrando la formación estable de hidrogeles.Las células de carcinoma mamario 4T1 etiquetadas con GFP y luciferasa se encapsulan en los hidrogeles. La proliferación celular se examina mediante microscopía de fluorescencia, mediante mediciones de iluminación y tinción de viabilidad, 48 horas después de la encapsulación. Los hidrogeles irradiados muestran una tendencia creciente en la proliferación de células tumorales.El conjugado de faloide se utiliza para visualizar F-Actin en las células encapsuladas. Recuerde enfriar el mortero antes de colocar el tejido dentro del molino, un mortero caliente puede conducir a un fresado incompleto. Tenga cuidado al manipular n-propanal y pepsina, solo abra n-propanal y otros agentes decellularizatorios bajo una capucha química.Si es posible, sopese la pepsina bajo una capucha química, ya que hay peligro de inhalación. Los cambios en la composición del ECM después de la irradiación y la decelularización se pueden evaluar mediante espectrometría de masas y espectroscopia de Raman. Además, la estructura de fibra de los hidrogeles ECM se puede analizar mediante microscopía electrónica de barrido.Este método tiene el potencial de ampliarse para examinar los efectos de la radiación en, no sólo las células tumorales, sino también las células inmunes, así como los tejidos que experimentan daño por radiación, como resultado de la terapia. Esta técnica de descelularización permitirá a los investigadores evaluar las propiedades de la matriz extracelular del tejido después de la radiación, que es una opción de tratamiento importante en la mayoría de los cánceres.

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El estudio de los efectos de la matriz de rigidez en la función celular usando como base la acrilamida-hidrogeles

Este video describe una técnica de derivación de hidrogeles de matriz extracelular mediante la descelularización de almohadillas de grasa mamaria murina después de la irradiación ex vivo para estudios in vitro. Este hidrogel ayuda a imitar el entorno del tejido mamario in vivo después del tratamiento con radiación para estudiar el comportamiento de las células tumorales.

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Este video muestra un ensayo para estudiar el efecto de la rigidez de la matriz extracelular (MEC) en la infección bacteriana de las células adherentes. Los hidrogeles de poliacrilamida de diferente rigidez, recubiertos con colágeno, se superponen en una placa de pocillos múltiples para imitar la rigidez de la MEC fisiológica. Al superponer células endoteliales humanas en los hidrogeles e infectar las células con la bacteria Listeria monocytogenes modificada para expresar una proteína...

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Microrheology de partículas de seguimiento se puede utilizar para cuantificar de forma no destructiva y espacialmente mapa cambios en las propiedades mecánicas de la matriz extracelular en modelos de tumores en 3D.

Medida longitudinal de la matriz extracelular Rigidez en modelos de tumores en 3D utilizando partículas de seguimiento Microrheology

El colágeno es un componente central de la ECM, y proporciona indicaciones esenciales para varios procesos celulares que van desde la migración a la diferenciación y la proliferación. Aquí se incluye es un protocolo para la incorporación de las células dentro de los hidrogeles de colágeno en 3D, y una técnica más avanzada para la generación de matrices de colágeno aleatorios o alineados utilizando PDMS microcanales.

Preparación de geles de colágeno en 3D y microcanales para el estudio de las interacciones 3D<em&gt; En Vivo</em

Este es un método para crear un andamio de cultivo celular de 3 dimensiones de la matriz extracelular pulmonar. pulmonar intacta se procesa en hidrogeles que pueden apoyar el crecimiento de células en tres dimensiones.

Los hidrogeles sintonizable de la matriz extracelular pulmonar por la 3D de Cultivos Celulares

Este protocolo describe la fabricación de microcryogels elástico macroporoso 3D integrando microfabricación con tecnología cryogelation. A cargar con las células, se generan microtissues 3D, que puede ser fácilmente inyectados en vivo para facilitar la terapia regenerativa o montado en arreglos de discos para en vitro screening de drogas de alto rendimiento.

Microtissues 3D para la terapia regenerativa inyectable y drogas de alto rendimiento

Hemos desarrollado un ensayo de base poliacrilamida formato multi-bien para sondear el efecto de la rigidez de la matriz extracelular en la infección bacteriana de las células adherentes. Este análisis es compatible con citometría de flujo, inmunotinción y microscopía de fuerza de tracción, lo que permite mediciones cuantitativas de las interacciones biomecánicas entre las células y su matriz extracelular, las bacterias patógenas.

Un ensayo de base poliacrilamida formato multi-bien para estudiar el efecto de la rigidez de la matriz extracelular en la infección bacteriana de las células adherentes

El presente protocolo describe una plataforma experimental para evaluar los efectos de las señales mecánicas y bioquímicas en las respuestas quimioterapéuticas de las células de glioblastoma derivadas de pacientes en cultivos miméticos de matriz 3D utilizando un dispositivo de iluminación UV hecho a medida que facilita la fotoreticulación de alto rendimiento de hidrogeles con características mecánicas sintonizables.

Las matrices de hidrogel permiten un mayor rendimiento para los efectos de detección de los componentes de la matriz y la terapéutica en modelos tumorales 3D

Aquí, presentamos un protocolo que permite la fabricación rápida, robusta y barata de esferoides tumorales seguida de encapsulación de hidrogel. Es ampliamente aplicable ya que no requiere equipo especializado. Sería particularmente útil para explorar las interacciones esferoides-matrices y construir modelos de fisiología tisular o patología in vitro .

Fabricación y encapsulación de esferoides tumorales en hidrogeles de polietilenglicol para el estudio de las interacciones esferoide-matriz

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Desarrollo y caracterización de hidrogeles de matriz extracelular pulmonar descelularizada

Aprende a estudiar los efectos de la radiación en tejido normal mediante hidrogeles de matriz extracelular derivados de tejido adiposo murino. Este método permite evaluar cambios en la matriz extracelular irradiada y su impacto en el comportamiento de células tumorales.

Estudio de los efectos de radiación de tejido normal con hidrogeles de matriz extracelular

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