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JoVE Journal Developmental Biology
Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Aislamiento y tinción de queratinocitos de piel de ratón para el análisis específico del ciclo celular de la expresión de proteínacelular espora

Full Text
8,137 Views
12:34 min
May 9, 2019

DOI: 10.3791/59353-v

Josiah Fernandez1, Enrique C Torchia1

1Department of Dermatology and Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado Anschutz Medical Campus

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo describe cómo aislar los queratinocitos de la piel de los modelos de ratón, para manchar con anticuerpos etiquetados con metal, y analizar las células manchadas por citometría de masa para perfilar el patrón de expresión de proteínas de interés en las diferentes fases del ciclo celular.

Este protocolo es significativo por dos razones principales. Número uno, permite al usuario ser capaz de determinar los estados del ciclo celular de las células de la piel que se han aislado de un modelo animal. También nos permite poder analizar la expresión proteica en las fases discretas del ciclo celular.

En comparación con los métodos anteriores para determinar la proliferación celular, nuestro método permite una determinación más precisa de las diferentes fases en el ciclo celular, y también podemos analizar más de 40 marcadores diferentes en las diversas etapas de la división celular. Esto mejora en gran medida la aplicación y versatilidad del método. Este protocolo se puede utilizar en la investigación del cáncer y en cualquier otro tipo de enfermedad donde hay una necesidad de determinar los patrones específicos de expresión de proteínas del ciclo celular.

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