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Ensayos de inhibición del crecimiento de brotes y ráfagas oxidativas desencadenadas por patrones ...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Pattern-Triggered Oxidative Burst and Seedling Growth Inhibition Assays in Arabidopsis thaliana

Ensayos de inhibición del crecimiento de brotes y ráfagas oxidativas desencadenadas por patrones en Arabidopsis thaliana

Full Text
14,100 Views
04:11 min
May 21, 2019

DOI: 10.3791/59437-v

Melissa Bredow1, Irina Sementchoukova1, Kristen Siegel1, Jacqueline Monaghan1

1Department of Biology,Queen's University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este artículo describe dos métodos para cuantificar las respuestas de defensa en Arabidopsis thaliana después de la exposición a los impulsores inmunes: la ráfaga oxidativa transitoria y la inhibición del crecimiento de la plántula.

Estos ensayos se pueden utilizar para evaluar y comparar las salidas inmunitarias de diferentes genotipos vegetales. La principal ventaja de estas técnicas es que son rápidas, confiables y utilizan equipos de laboratorio comunes. Para el ensayo de inhibición del crecimiento, las plántulas del mismo tamaño y edad deben trasplantarse y secarse completamente antes de pesar para limitar la variación.

A las cuatro a cinco semanas después de la germinación, utilice un punzón de biopsia de cuatro milímetros para extraer un disco de hoja por planta de Arabidopsis, evitando la mitad de laveina y teniendo cuidado de limitar las heridas. Recoger los discos en pozos individuales de una placa de luminómetro de 96 pozos no utilizada que contiene 100 microlitros de agua de doble destilación por pozo, lado adaxial hacia arriba, para evitar la desicación. Si evalúa varios elicitores, retire un segundo disco de hoja de la misma hoja para cada tratamiento de elicitor y cubra la placa con la tapa para permitir que los discos de la hoja se recuperen durante la noche a temperatura ambiente.

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