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DOI: 10.3791/59470-v
Julia Sbierski-Kind1,2,3,4, Katharina Schmidt-Bleek3,6, Mathias Streitz3,5, Jonas Kath3,5, Joachim Spranger*1,2,4, Hans-Dieter Volk*2,3,5
1Department of Endocrinology & Metabolism Charité - Universitätsmedizin Berlin, corporate member of Freie Universität Berlin,Humboldt-Universität zu Berlin, 2Berlin Institute of Health (BIH), 3Berlin-Brandenburg Center for Regenerative Therapies (BCRT), Charité - Universitätsmedizin Berlin, corporate member of Freie Universität Berlin,Humboldt-Universität zu Berlin, 4DZHK (German Centre for Cardiovascular Research), 5Institute of Medical Immunology, Charité - Universitätsmedizin Berlin, corporate member of Freie Universität Berlin,Humboldt-Universität zu Berlin, 6Julius Wolff Institute (JWI) and Center for Musculoskeletal Surgery, Charité - Universitätsmedizin Berlin, Berlin, Germany, corporate member of Freie Universität Berlin,Humboldt-Universität zu Berlin
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Se describe un modelo animal simple y confiable para la esteatohepatitis no alcohólica inducida por la dieta, que se logra a través de la carcasa no SPF de los animales y la administración de una dieta alta en grasas específica. Describimos la identificación de los subconjuntos de células inmunes hepáticas y adiposas para recapitular las condiciones inmunológicas humanas exponiendo ratones a gérmenes ambientales.
Este método puede ayudar a responder preguntas en el campo del inmunometabolismo sobre la contribución de las células inmunitarias a la inflamación inducida por la obesidad en adiposo y esteatohepatitis en el tejido hepático. Estas técnicas se han optimizado para el aislamiento de células inmunitarias adiposas y hepáticas en un modelo inducido por la dieta de esteatohepatitis no alcohólica lograda a través de una carcasa de roedores libre de patógenos no específica. Estos métodos pueden ayudar a profundizar nuestra comprensión de los mecanismos inmunológicos involucrados en el mantenimiento de la homeostasis metabólica.
Generalmente, los individuos nuevos en esta técnica tendrán problemas para maximizar el rendimiento de las células disociadas funcionalmente viables y establecer el gating adecuado en la citometría de flujo. Para generar una suspensión de una sola célula de tejido adiposo, rocíe el pecho de un ratón eutanizado con 70%etanol, y cuidadosamente haga una incisión central de cinco a seis centímetros a través del integumento y la pared abdominal a lo largo de toda la longitud de la caja torácica para exponer la cavidad pleural y el corazón. Con una aguja de calibre 26, inyecte al menos 10 mililitros de solución salina al 0,9% en el ápice del ventrículo izquierdo y utilice tijeras para abrir la cavidad peritoneal.
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