Un Protocolo de Estrés de Inmovilización Crónica para Inducir el Comportamiento Similar a la Depresión en Ratones

Este artículo proporciona un protocolo simplificado y estandarizado para la inducción de un comportamiento depresivo en ratones inmovilizados crónicamente mediante el uso de un restrainer. Además, se explican las técnicas fisiológicas y de comportamiento para verificar la inducción de la depresión.

Comience por encender la habitación a 200 lux con un medidor de lux digital. Coloque el ratón en una jaula separada al menos una semana antes de la prueba y coloque el ratón en la sala de pruebas durante al menos 30 minutos antes del experimento. Sostenga suavemente la cola del ratón para evitar tensar el ratón, y luego colóquelo cuidadosamente sobre una superficie rugosa.

Cubra el sujetador con una pequeña toalla blanca y luego coloque suavemente el ratón en la abertura del sujetador, de modo que el ratón entre en el sujetador voluntariamente. A continuación, coloque el cierre para sujetar el ratón lo más apretado posible, teniendo cuidado de evitar daños en el cuerpo, como cola, pies y testículos. Por último, durante la exposición al limitador, mida el peso corporal y la ingesta de alimentos cada 48 horas.

Antes de la prueba, habituar a los ratones a la presencia de dos botellas de bebida, una que contiene 0,1 sacarosa molar y la otra que contiene agua corriente durante 48 horas. Cambie las posiciones de las dos botellas después de 24 horas para reducir cualquier confusión producida por un sesgo lateral. Al tercer día priva a los ratones de agua durante 24 horas.

Luego, el día del experimento, expone a los ratones a dos botellas de bebida durante seis horas. Después de tres horas, cambie la posición de las botellas de agua. Registre el volumen en mililitros de solución de sacarosa y agua consumida, y luego calcule la afinidad del animal con la sacarosa.

Por último, calcule la preferencia de sacarosa como un porcentaje del volumen de consumo de sacarosa sobre el consumo total de líquido durante la prueba. Comience por llevar los ratones inducidos por estrés de restricción crónica a la sala de pruebas al menos 30 minutos antes de comenzar la prueba de suspensión de la cola. Ajuste la luz de la habitación a condiciones tenues a 50 lux.

A continuación, coloque la cámara a unos 40 centímetros del ratón. Suspenda el ratón firmemente de la barra horizontal con cinta adhesiva. Después de que el ratón se coloca en el centro de la caja de suspensión iniciar la grabación, y observar las alteraciones del comportamiento continuamente durante seis minutos.

Si el ratón intenta subir su cola utilice un palo o subir tapón para evitar que lo haga. Al final del experimento, mueva el ratón a su jaula de inicio y retire cuidadosamente la cinta de su cola. Por último, utilice el software de seguimiento de vídeo para analizar el tiempo acumulado de los períodos inmóviles.

Los resultados indican disminución del peso corporal para el grupo de la CEI y significativamente menor ingesta de alimentos en el cuarto día. En comparación con los controles, se mostró una disminución de la preferencia de sacarosa en el grupo de la CEI, mientras que hubo un aumento significativo en el tiempo de inmovilidad y corticosterona. Más, una dieta suplementada con glutamina mejora los comportamientos depresivos como, como se muestra para el peso corporal, ingesta de alimentos, preferencia de sacarosa, inmovilidad, y corticosterona.