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DOI: 10.3791/59614-v
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En este manuscrito, se describe la implementación de un microscopio de dispersión Raman (SRS) estimulado, obtenido mediante la integración de una configuración experimental SRS con un microscopio de escaneo láser. El microscopio SRS se basa en dos fuentes láser de femtosegundo (fs), un Ti-Sapphire (Ti:Sa) y un oscilador paramétrico óptico sincronizado (OPO).
Este protocolo puede ayudar a los científicos interesados en la microscopía no lineal a comprender los componentes clave, la configuración y el procedimiento de alineación de un microscopio basado en la dispersión estimulada de Raman. Las principales ventajas de la microscopía SRS son sus capacidades para realizar imágenes sin etiquetas basadas en contraste vibratorio y adquirir una imagen en pocos segundos. La microscopía SRS ha llevado las imágenes sin etiquetas a nuevas alturas, especialmente estudios de estructuras biológicas complejas como los lípidos, que son fundamentales para las células y la arquitectura celular.
La señal SRS se detecta como un pequeño cambio en la intensidad del haz de la sonda y puede ser corrompida por el ruido. Por lo tanto, un signo preciso es crucial. Para empezar, alinee el OPO y los rayos láser de zafiro de titanio para que ambos lleguen al microscopio.
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