Name: Evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 18 s
Description: Aprende a evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante ascensor vertical y rotación de noria. Estas técnicas permiten estudiar la integridad del sistema nervioso autónomo y detectar trastornos vestibulares.

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Este trabajo fue apoyado en parte por el Consejo de Subvenciones de Investigación de Hong Kong, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L. El dispositivo FWR tiene una patente en China: ZL201120231912.1.

El presente estudio y procedimientos fueron aprobados por el Comité de ética para la experimentación animal de la Segunda Universidad Médica Militar (Shanghai, China) de conformidad con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio (Consejo Nacional de Investigación de los Estados Unidos, 1996).
1. Animales
<ol><li>Utilice ratas Sprague-Dawley (SD) de dos meses (200–250 g). Para cada ensayo conductual, utilice un grupo separado de ratas. Utilice siempre grupos de control y experimentales separados. NOTA: Hubo dos pruebas autonómicas: EVM y FWR. El EVM tenía tres condiciones además de un grupo de control (4) con tres ensayos conductuales (viga de equilibrio, conteo de defecación y campo abierto n.o 3) con 8 ratas en cada una para un total de 96 ratas (4 x 3 x 8). La FWR tenía una condición además de un grupo de control (2) con tres ensayos conductuales (viga de equilibrio, conteo de defecación y campo abierto n.o 3) con 8 ratas en cada una para un total de 48 ratas (2 x 3 x 8). En total, reportamos 144 ratas.</li>
	<li>Roedores de jaula bajo una temperatura constante de 25oC y entre el 60% y el 70% de humedad.</li>
	<li>Casa de roedores en ciclos de luz/oscuridad de 12 h/12 h con acceso a alimentos y agua potable ad libitum. NOTA: Dado que los siguientes protocolos son experimentos conductuales, las ratas deben manipularse con cuidado. El manejo de los animales debe ser con ambas manos con el cuerpo y el soporte trasero, para no inducir ansiedad.</li>
	<li>Realizar experimentos (EVM y FWR) y ensayos de evaluación (haz de equilibrio y evaluación de campo abierto) en la oscuridad para minimizar las señales visuales.</li>
</ol>2. Dispositivo de movimiento vertical del elevador
<ol><li>Realice los procedimientos de movimiento vertical del ascensor en completa oscuridad para minimizar las señales visuales.</li>
	<li>Coloque los roedores en la caja de plexiglás (22,5 cm x 26 cm x 20 cm). Aquí la caja de plexiglás puede acomodar cuatro roedores (dispositivo hecho a medida).</li>
	<li>Asegúrese de que la caja esté cerrada y cerrada de forma segura para evitar que los roedores se caigan. Coloque la caja de plexiglás en la almohadilla del elevador del dispositivo de movimiento vertical del ascensor (dispositivo hecho a medida).</li>
	<li>Encienda el dispositivo de movimiento vertical del ascensor hasta el ajuste más bajo para la aclimatación.</li>
	<li>Ajuste la amplitud como 22 cm hacia arriba y 22 cm hacia abajo de neutral. Cambie progresivamente el movimiento vertical del elevador de la siguiente manera:<ol>
<li>Establezca los períodos iniciales en 2.500 ms para 5 min, 2.000 ms para 5 min y 1.500 ms para 5 min.</li>
		<li>Utilice un período de prueba de 1000 ms durante 2 h.</li>
		<li>Lento el dispositivo en reversa usando períodos de 1500 ms para 5 min, 2000 ms para 5 min, y 2500 ms para 5 min.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Dispositivo de rotación de la rueda de las norias
<ol><li>
Configuración del dispositivo de rotación de la rueda de las norias
	<ol>
<li>Coloque el recipiente de plexiglás (22,5 cm x 26 cm x 20 cm) sobre un banco de madera (dispositivo hecho a medida).</li>
		<li>Coloque los roedores en el recipiente de plexiglás con el eje largo del cuerpo perpendicular a la varilla de rotación horizontal de la noria (dispositivo hecho a medida). NOTA: La colocación con el cuerpo perpendicular a la varilla horizontal asegura la estimulación de los órganos de otolito (dirección anterior-posterior y vertical) durante la rotación.</li>
		<li>Cierre la caja de plexiglás de forma segura.</li>
		<li>Coloque el segundo conjunto de roedores en el recipiente de plexiglás con el eje largo del cuerpo perpendicular a la barra de rotación horizontal en el segundo brazo del dispositivo de rotación de la noria. Utilice un segundo conjunto de roedores con una masa similar para equilibrar la noria.</li>
		<li>Cierre de forma segura la caja de plexiglás y colóquela en el dispositivo de rotación de la rueda de la noria.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Procedimiento de rotación de la rueda de noria
	<ol>
<li>Realice los procedimientos de rotación de la noria-rueda en completa oscuridad para minimizar las señales visuales.</li>
		<li>Arranque la rueda de la noria girando en el sentido de las agujas del reloj a 16o/s2 para alcanzar una velocidad angular de 120o/s, y luego comienza a desacelerar a 48o/s2 para alcanzar 0o/s. Después de una pausa de 1 s, haga que el recipiente continúe girando en sentido contrario a las agujas del reloj de la misma manera que arriba (aceleración a 16o/s2 para alcanzar una velocidad angular de 120o/s y luego desaceleración a 48o/s2 para alcanzar 0o/s). El ciclo de pausa-contrahorario en el sentido de las agujas del reloj requiere aproximadamente 10 s para alcanzar su posición inicial.</li>
		<li>Continúe la rotación en el sentido de las agujas del reloj durante 2 horas por sesión para aproximadamente 720 rotaciones.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. Evaluación de EVM y FWR
NOTA: La evaluación del dispositivo de rotación de la noria y el movimiento vertical del elevador se realiza mediante tres procedimientos: pruebas de haz de equilibrio, recuento de defecación y examen de campo abierto. Los procedimientos idénticos se utilizan para evaluar el movimiento vertical del ascensor. Estos procedimientos de evaluación deben realizarse tan pronto como sea posible después de la rotación de la rueda de la noria o el movimiento vertical del elevador.
<ol><li>
Viga de equilibrio
	<ol>
<li>
Configuración del haz de equilibrio
		<ol>
<li>Colocar la viga de equilibrio10,11,12 colocando dos taburetes de madera (aproximadamente 0,75 m de altura) en el campo experimental, aproximadamente 110 cm de distancia.</li>
			<li>Coloque una caja de plástico negro (15 cm x 15 cm x 8 cm) en el taburete de acabado.</li>
			<li>Coloque una viga estrecha de madera (2,5 cm x 130 cm) entre los dos taburetes, dejando una distancia de 100 cm entre los bordes de las heces, desde el taburete inicial hasta el taburete de acabado. NOTA: La entrada a la caja de plástico negro debe estar en la línea de meta de los 100 cm.</li>
			<li>Coloque una lámpara en el taburete de arranque. Encienda la lámpara.</li>
			<li>Apague las luces de la habitación y asegúrese de que la habitación esté lo más oscura posible. Esto garantiza que el roedor siga la dirección del haz de equilibrio desde la región iluminada hasta la región oscurecida.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Procedimientos de haz de equilibrio NOTA: El ensayo de coordinación motora de la viga de equilibrio se evalúa midiendo el tiempo necesario para atravesar la viga de madera elevada.<ol>
<li>Entrenar a cada roedor diariamente durante 3 días consecutivos, antes del período de examen, con el fin de lograr un rendimiento estable en el haz de equilibrio10. Entrena introduciendo la rata en el haz en la esquina iluminada y provocéndodo que cruce el haz. Eventualmente la rata cruzará por su propia voluntad. Las ratas en el protocolo actual tardaron 3,6 a 0,9 segundos. NOTA: Algunos roedores no logran un rendimiento estable durante el entrenamiento y deben ser excluidos. Algunos roedores no realizan la tarea, mientras que otros carecen de motivación para cruzar la viga. El rendimiento estable fue de dos períodos de prueba consecutivos de tiempos de cruce inferiores a 4 segundos. Si una rata se cae durante el entrenamiento o la evaluación, debe clasificarse como una rata 'caída' y no evaluarse más.</li>
			<li>Para el procedimiento real, coloque el roedor entrenado en el taburete de arranque cerca de la luz y presione simultáneamente el botón de inicio en un cronómetro. El roedor debe cruzar el haz de equilibrio rápidamente e introducir la caja negra en el taburete de acabado.</li>
			<li>Presione start en el cronómetro una vez que el roedor esté en su lugar y presione stop cuando la nariz entre en la caja oscura del taburete de acabado. El tiempo para atravesar la viga es desde el taburete de inicio hasta el reposapiés final. NOTA: Una vez que el roedor está entrenado, puede realizar una intervención o manipulación, como inducir mareos por movimiento, antes de la evaluación. También puede obtener una medición de línea base, antes de la intervención, utilizando el tiempo para recorrer la última sesión de entrenamiento.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Conteo de defecación
	<ol>
<li>Coloque el recipiente de plexiglás que contiene los cuatro roedores en un banco después del período de prueba de la rueda de la fortuna.</li>
		<li>Retire los roedores y colóquelos en cajas individuales de campo abierto (abajo).</li>
		<li>Cuente el número de gránulos de heces en la caja de plexiglás atribuida a cada roedor. NOTA: Se puede obtener una medición de línea base, para la comparación con la evaluación después del movimiento del elevador, contando los gránulos de heces antes de someterse a movimiento vertical del elevador.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Examen de campo abierto
	<ol>
<li>Coloque los roedores en la caja de campo abierto (40 cm x 40 cm x 45 cm).</li>
		<li>Grabe el comportamiento de campo abierto utilizando una cámara de vídeo IR durante 3 min28,29,30.</li>
		<li>Determine la distancia total recorrida. NOTA: Es muy importante NO colocar el roedor en la caja de campo abierto antes del movimiento vertical del ascensor. El medio ambiente debe ser novedoso para el roedor. Por lo tanto, NO se deben tomar mediciones de línea de base para el examen de campo abierto.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Balaban, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vestibular+autonomic+regulation+%28including+motion+sickness+and+the+mechanism+of+vomiting%29%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Vestibular autonomic regulation (including motion sickness and the mechanism of vomiting).</a> Current Opinion in Neurology. 12, 29-33 (1999).</li>
<li>Reason, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+sickness+adaptation%3A+a+neural+mismatch+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Motion sickness adaptation: a neural mismatch model.</a> Journal of the Royal Society of Medicine. 71, 819-829 (1978).</li>
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<li>Stoffregen, T. A., Chen, F. C., Varlet, M., Alcantara, C., Bardy, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Getting+your+sea+legs%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Getting your sea legs.</a> PLoS One. 8, 66949(2013).</li>
<li>Smart, L. J. Jr, Pagulayan, R. J., Stoffregen, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-induced+motion+sickness+in+unperturbed+stance%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Self-induced motion sickness in unperturbed stance.</a> Brain Research Bulletin. 47, 449-457 (1998).</li>
<li>Wang, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+change+in+NMDA+receptor+signaling+and+GABAA+receptor+expression+in+rat+caudal+vestibular+nucleus+during+motion+sickness+habituation%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Temporal change in NMDA receptor signaling and GABAA receptor expression in rat caudal vestibular nucleus during motion sickness habituation.</a> Brain Research. 1461, 30-40 (2012).</li>
<li>Cai, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamatergic+vestibular+neurons+express+FOS+after+vestibular+stimulation+and+project+to+the+NTS+and+the+PBN+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Glutamatergic vestibular neurons express FOS after vestibular stimulation and project to the NTS and the PBN in rats.</a> Neuroscience Letters. 417, 132-137 (2007).</li>
<li>Cai, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+Fos+protein+expression+in+rat+caudal+vestibular+nucleus+is+associated+with+motion+sickness+habituation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Decreased Fos protein expression in rat caudal vestibular nucleus is associated with motion sickness habituation.</a> Neuroscience Letters. 480, 87-91 (2010).</li>
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<li>Zhou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+and+age+differences+in+motion+sickness+in+rats%3A+The+correlation+with+blood+hormone+responses+and+neuronal+activation+in+the+vestibular+and+autonomic+nuclei%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Aging+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Sex and age differences in motion sickness in rats: The correlation with blood hormone responses and neuronal activation in the vestibular and autonomic nuclei.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 9, 29(2017).</li>
<li>Wang, J., Liu, J., Pan, L., Qi, R., Liu, P., Zhou, W., Cai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Storage+of+passive+motion+pattern+in+hippocampal+CA1+region+depends+on+CaMKII%2FCREB+signaling+pathway+in+a+motion+sickness+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Storage of passive motion pattern in hippocampal CA1 region depends on CaMKII/CREB signaling pathway in a motion sickness rodent model.</a> Scientific Reports. 7, 43385(2017).</li>
<li>Qi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-cholinergics+mecamylamine+and+scopolamine+alleviate+motion+sickness-induced+gastrointestinal+symptoms+through+both+peripheral+and+central+actions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Anti-cholinergics mecamylamine and scopolamine alleviate motion sickness-induced gastrointestinal symptoms through both peripheral and central actions.</a> Neuropharmacology. 146, 252-263 (2019).</li>
<li>Luong, T. N., Carlisle, H. J., Southwell, A., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+motor+balance+and+coordination+in+mice+using+the+balance+beam%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of motor balance and coordination in mice using the balance beam.</a> Journal of Visualized Experiments. (49), e2376(2011).</li>
<li>Kalueff, A. V., Minasyan, A., Tuohimaa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+characterization+in+rats+using+the+elevated+alley+Suok+test%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Behavioural characterization in rats using the elevated alley Suok test.</a> Behavioural Brain Research. 30 (1), 52-57 (2005).</li>
<li>Piot-Grosjean, O., Wahl, F., Gobbo, O., Stutzmann, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+sensorimotor+and+cognitive+deficits+induced+by+a+moderate+traumatic+injury+in+the+right+parietal+cortex+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Assessment of sensorimotor and cognitive deficits induced by a moderate traumatic injury in the right parietal cortex of the rat.</a> Neurobiology of Disease. 8 (6), 1082-1093 (2001).</li>
<li>Goldstein, L. B., Davis, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beam-walking+in+rats%3A+Studies+towards+developing+an+animal+model+of+functional+recovery+after+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Beam-walking in rats: Studies towards developing an animal model of functional recovery after brain injury.</a> Journal of Neuroscience Methods. 31 (2), 101-107 (1990).</li>
<li>Sweis, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((modified+beam-walking+apparatus+for+assessment+of+anxiety+in+a+rodent+model+of+blast+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">modified beam-walking apparatus for assessment of anxiety in a rodent model of blast traumatic brain injury.</a> Behavioural Brain Research. 296, 149-156 (2016).</li>
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<li>Armstrong, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preserved+otolith+organ+function+in+caspase-3-deficient+mice+with+impaired+horizontal+semicircular+canal+function%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Preserved otolith organ function in caspase-3-deficient mice with impaired horizontal semicircular canal function.</a> Experimental Brain Research. 233 (6), 1825-1835 (2015).</li>
<li>Riccio, D. C., Thach, J. S. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+suppression+produced+by+vestibular+stimulation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Experimental+Analysis+of+Behavior%22%5BJournal%5D)">Response suppression produced by vestibular stimulation in the rat.</a> Journal of the Experimental Analysis of Behavior. 11 (4), 479-488 (1968).</li>
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</ol>

Los autores no declaran conflictos de intereses financieros o no financieros. El dispositivo FWR tiene una patente en China: ZL201120231912.1.

El presente estudio describe la evaluación de las respuestas autonómicas al movimiento pasivo en roedores mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la rueda de la noria. Estos equipos y procedimientos se pueden adoptar fácilmente a otros roedores y existen varias modificaciones de los ensayos para confirmar el funcionamiento vestibular en diferentes circunstancias, como durante el desafío farmacológico o las intervenciones quirúrgicas. La investigación en EM provocada por la estimulación vestibular ha...

La enfermedad del movimiento (EM) debido a una estimulación visuovestibular anormal conduce a una reacción autonómica, provocando síntomas tales como malestar epigástrico, náuseas y/o vómitos1. Según las teorías actuales, el mareo por movimiento puede deberse a un conflicto sensorial o deunfenncia neuronal de recibir información de movimiento integrada que difiere del modelo interno previsto del entorno2,3 o inestabilidad postural como ocurriría en un buque de andala4,5. A pesar de los avances significativos en el campo del mareo por movimiento y el funcionamiento autonómico vestibular6,7,8,9,10,11,12, investigación futura puede ser ayudado por protocolos de evaluación estandarizados. La evaluación de los efectos autonómicos de los movimientos pasivos estándar beneficiará en gran medida las investigaciones sobre las causas y la prevención del mareo por movimiento. El objetivo general de este estudio es evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en roedores. Los modelos animales, como los roedores, permiten una fácil manipulación experimental (por ejemplo, movimiento pasivo y farmacéutico) y evaluación del comportamiento, que se puede utilizar para estudiar la etiología del mareo por movimiento. Aquí, presentamos una batería detallada para probar los efectos del movimiento pasivo y la integridad del funcionamiento vestibular.
El presente estudio detalla dos ensayos, el movimiento vertical del ascensor (EVM) y la rotación de la noria (FWR), que inducen reacciones autonómicas al movimiento pasivo. Los ensayos se acoplan a tres medidas cuantitativas de comportamiento, el haz de equilibrio (en ratones13 y ratas14,15,16,17),el examen de campo abierto y el recuento de defecación. El EVM (similar al paso y el balanceo de un barco que se encuentra con una onda) evalúa el funcionamiento vestibular estimulando los órganos sensoriales otolitos que codifican aceleraciones lineales (es decir, el saccule que responde a los movimientos en el plano vertical)18. El dispositivo FWR (rotación centrífuga o movimiento sinusoidal) estimula los órganos otolitos mediante la aceleración lineal y los canales semicirculares mediante aceleración angular19,20. El dispositivo de rotación de la noria/centrífuga es único en su evaluación autonómica. Hasta la fecha, el único dispositivo similar en la literatura es el plato giratorio de rotación del eje off-vertical (OVAR), que se utiliza para examinar el reflejo vestibulo-ocular (VOR)18,21,22, la evitación condicionada23,24, y los efectos de la hipergravedad25,26,27. El ensayo EVM y el ensayo del dispositivo FWR inducen estimulación vestibular que conduce a reacciones autonómicas. Acoplamos el EVM y el FWR a mediciones cuantitativas como haz de equilibrio, recuento de defecación y análisis de campo abierto28,29,30,para garantizar resultados robustos y reproducibles. Similar a los descritos anteriormente en ratones13 y ratas14,15,16,17, el ensayo de haz de equilibrio es una viga de 1,0 m de largo suspendida a 0,75 m del suelo entre dos taburetes de madera utilizando una simple modificación de caja negra en el extremo de la meta (acabado). El haz de equilibrio se ha utilizado para evaluar la ansiedad (caja negra oscura)14,17, lesión traumática15,16,17, y aquí, reacciones autonómicas que afectan el equilibrio. Hemos realizado previamente el recuento de defecación para evaluar la respuesta autonómica en el modelo de mareo por movimiento, y es una medición cuantitativa fiable que se realiza fácilmente y se evalúa inequívocamente6,8,9,11. El análisis de campo abierto emplea una simple evaluación del comportamiento de campo abierto de la caja negra utilizando Ethovision28,Bonsai30o un simple análisis de vídeo en Matlab29 para cuantificar el comportamiento como el movimiento. En el protocolo actual, utilizamos la distancia total recorrida, pero observamos que existen varios paradigmas diferentes (por ejemplo, elongación, zona de movimiento, velocidad, etc.) 28,29,30. En conjunto, estos procedimientos forman una breve batería de evaluaciones para el examen y evaluación de reacciones autonómicas al movimiento pasivo, por ejemplo en el mareo por movimiento6,7,8,9,10,11. Los ensayos actuales se pueden adaptar a una variedad de modelos animales.

<table><tbody><tr><td>Dispositivo de movimiento vertical del ascensor</td><td>Dispositivo</td><td>de movimiento vertical del ascensor</td>hecho <td></td> a medida según las especificaciones deseadas</tr><tr>Tecnología de la información <td></td><td>Ethovision</td><td>Noldus</td><td>Software de seguimiento</td></tr><tr><td>de video Dispositivo de rotación de la rueda de la fortuna</td><td></td><td>Dispositivo de rotación de la rueda de la fortuna</td>personalizado <td></td> según las especificaciones deseadas</tr><tr><td>Guantes de látex, polivinilo o nitrilo</td><td>AMMEX</td><td></td><td>Use guantes sin polvo Caja de campo abierto de 8 milésimas de pulgada</td></tr><tr><td></td><td>Caja</td><td></td> de <td>plexiglás oscurecido personalizada con cámara de infrarrojos</td></tr><tr><td>Rata o ratón</td><td>JAX labs</td><td>Cualquier roedor pequeño</td>Jaula pequeña para roedores Tecniplast 1284L Viga y taburetes de madera personalizados Viga y taburetes de madera hechos a medida según las especificaciones indicadas <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria

Assessing the Autonomic and Behavioral Effects of Passive Motion in Rats using Elevator Vertical Motion and Ferris-Wheel Rotation

El objetivo general de este estudio es evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en roedores utilizando los dispositivos de movimiento vertical del elevador y de rotación de la rueda de la noria. Estos ensayos pueden ayudar a confirmar la integridad y el funcionamiento normal del sistema nervioso autónomo. Se acoplan a medidas cuantitativas basadas en el recuento de defecación, el examen de campo abierto y el cruce de haces de equilibrio. Las ventajas de estos ensayos son su simplicidad, reproducibilidad y medidas cuantitativas de comportamiento. Las limitaciones de estos ensayos son que las reacciones autonómicas podrían ser epifenómenos de trastornos no vestibulares y que se requiere un sistema vestibular en funcionamiento. El examen de trastornos como el mareo por movimiento se verá muy favorecido por los procedimientos detallados de estos ensayos.

La Figura 2 muestra los resultados representativos del haz de equilibrio del tiempo que se tarda en transversal. Las ratas fueron entrenadas durante 3 días consecutivos con el fin de lograr un rendimiento estable en el haz de equilibrio10. El día siguiente, las ratas fueron evaluadas para el rendimiento del haz de equilibrio. En el eje Y de la figura, tenemos el número de segundos que tardan los roedores en cruzar la viga de equilibrio para la noria, el movimiento ver...

Se presentan protocolos para evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en roedores utilizando el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria.

Evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria

The overall goal of this study is to assess the autonomic and behavioral effects of passive motion in rodents using the elevator vertical motion and ...

Estos protocolos son importantes para establecer la integridad y el funcionamiento normal del sistema autónomo para evaluar la funcionalidad autonómica del sistema nervioso y revelar trastornos vestibulares del sistema. Un funcionamiento vestibular o un déficit de coordinación motora pueden indicar daños al sistema autónomo. Estas técnicas pueden revelar la integridad del funcionamiento autónomo.Las técnicas conductuales pueden ser susceptibles a las variedades introducidas por el experimentador. Recomendamos que el mismo investigador lleve a cabo las técnicas a lo largo del experimento y trate a cada roedor de forma idéntica. Para el análisis de movimiento vertical del ascensor, coloque hasta cuatro ratas de dos meses de edad de 200 a 250 gramos en una caja de plexiglás de 22,5 por 26 por 20 centímetros y cree de forma segura la caja.Coloque la caja en la plataforma del elevador de un dispositivo de movimiento vertical del ascensor y encienda el dispositivo en el ajuste más bajo para la aclimatación. A continuación, establezca la amplitud en 22 centímetros hacia arriba y 22 centímetros hacia abajo de neutral e inicie el dispositivo con un período de ciclo inicial en 2.500 milisegundos durante cinco minutos, 2.000 milisegundos durante cinco minutos y 1.500 milisegundos durante cinco minutos. A continuación, establezca el dispositivo en 1.000 milisegundos durante dos horas antes de ralentizar el dispositivo en sentido inverso utilizando períodos de 1.500 milisegundos durante cinco minutos, 2.000 milisegundos durante cinco minutos y 2.500 milisegundos durante cinco minutos.Para un procedimiento de rotación de la noria, coloque el contenedor de plexiglás en un banco de madera y coloque las ratas en el contenedor con el eje largo de sus cuerpos perpendicular a la barra de rotación horizontal de la noria. Después de cerrar la caja de forma segura, coloque un segundo conjunto de ratas con una masa similar en un segundo recipiente de plexiglás con el eje largo del cuerpo perpendicular a la barra de rotación horizontal en el segundo brazo del dispositivo de rotación de la noria. Después de cerrar la caja de forma segura, inicie la rotación de la noria en el sentido de las agujas del reloj a 16 grados por segundo al cuadrado para alcanzar una velocidad angular de 120 grados por segundo.Cuando la noria haya alcanzado la velocidad máxima, comienza a desacelerar a 48 grados por segundo al cuadrado para alcanzar cero grados por segundo. Después de una pausa de un segundo, haga que el contenedor continúe girando en sentido contrario a las agujas del reloj a 16 grados por segundo al cuadrado para alcanzar una velocidad angular de 120 grados por segundo antes de desacelerarse a 48 grados segundo al cuadrado para alcanzar cero grados por segundo. A continuación, continúe con la rotación en sentido contrario a las agujas del reloj durante dos horas por sesión durante aproximadamente 720 rotaciones.Para el entrenamiento de vigas de equilibrio, primero coloque dos taburetes de madera de 0,75 metros de altura en el campo experimental de aproximadamente 110 centímetros de distancia. Coloque una caja negra de plástico de 15 por 15 por ocho centímetros en la herramienta de acabado y coloque una estrecha viga de madera de 2,5 por 130 centímetros entre los dos taburetes dejando una distancia de 100 centímetros entre los bordes del taburete desde el taburete inicial hasta el taburete final. Coloque una lámpara en el taburete de arranque y encienda la lámpara.A continuación, apague la luz de la habitación para que la habitación esté lo más oscura posible e introduzca la primera rata en el haz en la esquina iluminada. Si la rata no cruza su voluntad, pida suavemente al animal que cruce la viga. Después de tres días consecutivos de entrenamiento, coloque la rata entrenada en el taburete de inicio cerca de la luz e inicie inmediatamente un cronómetro.La rata debe cruzar el haz de equilibrio rápidamente y entrar en la caja negra en el taburete final. Detenga el cronómetro tan pronto como la nariz del animal entre en la caja oscura del taburete final. Para el recuento de defecación después del tratamiento de movimiento, transfiera las ratas del recipiente de plexiglás a cajas individuales de campo abierto de 40 por 40 por 45 centímetros y cuente el número de perdigones de heces en la caja de plexiglás atribuida a cada roedor.Para una prueba de comportamiento de campo abierto, utilice una cámara de video infrarroja para grabar a los animales durante tres minutos y utilice el material de archivo de vídeo resultante para determinar la distancia total recorrida para cada animal. Aquí, se muestran los resultados representativos del haz de equilibrio del tiempo necesario para atravesar el haz de equilibrio después de tres días consecutivos de entrenamiento. El movimiento vertical del elevador, los cambios en el movimiento vertical de Hertz y la rotación de la noria aumentaron significativamente la defecación.Además, el movimiento vertical del ascensor, los cambios en el movimiento vertical de Hertz y la rotación de la noria disminuyeron significativamente la distancia de campo abierto recorrida. El entrenamiento del haz de equilibrio es crítico ya que las ratas deben estar motivadas y seguras al cruzar la viga. De lo contrario, su saldo no se medirá durante el período de evaluación.Siguiendo los procedimientos conductuales, los efectos de diferentes fármacos de interés sobre el funcionamiento autónomo y la señalización celular se pueden evaluar utilizando estos ensayos de estimulación vestibular.

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Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

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Locomoción es a menudo examinado como un resultado del comportamiento de los distintos modelos de la enfermedad en campos como la neurociencia y la ortopedia. Este documento tiene la intención de vídeo para describir un método de recogida de las fuerzas de reacción del suelo y la cinemática de las ratas durante la locomoción sin restricciones.

La cinemática y la reacción del suelo Determinación de la Fuerza: Una demostración de habilidades Locomotor Cuantificación de adultos jóvenes, de mediana edad, y las ratas de Geriatría

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Control del motor y el rendimiento balanza se conocen a deteriorarse con la edad. Este artículo presenta una serie de pruebas de comportamiento no invasivas estándar con la adición de un estímulo rotatorio sencillo para desafiar al sistema y mostrar los cambios en el rendimiento vestibulares equilibrio en un modelo murino de envejecimiento.

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Se describe el establecimiento de un modelo murino de la enfermedad de Parkinson con MPTP y evaluaciones conductuales usando el cilindro y abre campo de pruebas para medir función motora. Entonces utilizamos l-dopa como un ejemplo para mostrar cómo aplicar este modelo en el estudio de medicamentos PD.

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Proporcionamos un protocolo para la evaluación del comportamiento motor a través de una batería de prueba de comportamiento en ratas después de una lesión por aplastamiento del nervio ciático.

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El presente protocolo describe un sistema de "movimiento pasivo de la cabeza" diseñado a medida, que reproduce aceleraciones mecánicas en las cabezas de los roedores generadas durante su carrera en cinta a velocidades moderadas. Permite diseccionar factores/elementos mecánicos de los efectos beneficiosos del ejercicio físico.

Aplicación del movimiento pasivo de la cabeza para generar aceleraciones definidas en las cabezas de roedores

El presente protocolo describe el seguimiento/evaluación tridimensional del movimiento para representar la alteración del movimiento de la marcha de las ratas después de la exposición a un entorno de desuso simulado.

Comprensión integral de la alteración de la marcha inducida por la inactividad en roedores

Aprende a evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante ascensor vertical y rotación de noria. Estas técnicas permiten estudiar la integridad del sistema nervioso autónomo y detectar trastornos vestibulares.

Evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria (Video) | JoVE Journal

Evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria

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