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DOI: 10.3791/59868-v
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Presentamos un método para aislar y cultivar células epiteliales derivadas de glándulas salivales humanas primarias. Estas células exhiben patrones de expresión génica consistentes con que son de origen epitelial salival y pueden ser cultivadas como salisferas en matrices de membranas de sótano derivadas de células tumorales Engelbreth-Holm-Swarm o como monocapas en platos de cultivo tratados.
Generar modelos celulares primarios o estructuras organoides es clave para responder a muchas preguntas contemporáneas en biología. Por ejemplo, hemos estado interesados durante bastante tiempo en los mecanismos utilizados por los virus humanos para facilitar la replicación en la glándula salival, ya que es un sitio importante para la transmisión horizontal. El desarrollo del sistema basado en salisfera descrito en este protocolo es un avance crucial en nuestra búsqueda de responder a este tipo de preguntas.
Esta técnica nos permite generar células primarias a partir de una variedad de muestras de pacientes diferentes. Los modelos celulares recuerdan más a la situación del tipo in vivo, ya que las células no se modelan ni transforman como muchos tipos de células comúnmente utilizados para experimentos in vitro. Hemos utilizado este protocolo para generar células similares a partir de la glándula submandibular primaria del ratón y el protocolo probablemente sería útil para otros órganos con estructuras celulares similares.
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