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DOI: 10.3791/60233-v
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La integridad de la barrera hematoencefálica es fundamental para la función del sistema nervioso. En Drosophila melanogaster, la barrera hematoencefálica se forma por células gliales durante la embriogénesis tardía. Este protocolo describe los métodos para el ensayo para la formación y el mantenimiento de barreras hematoencefálicas en embriones D. melanogaster y larvas de tercera estrella.
Este método puede ayudar a responder preguntas clave con respecto a la regulación genética de la formación y el mantenimiento de la barrera blood - brain durante múltiples etapas de desarrollo de la drosophila. Este método también se puede adaptar para examinar la permeabilidad de otras barreras, como el epitelio intestinal en una variedad de organismos. La principal ventaja de esta técnica es que permite evaluar la función de barrera hematoencefálica en los tejidos vivos.
La demostración visual de este método es crítica, ya que las manipulaciones de ejemplo pueden ser difíciles y muchos pasos requieren mucha atención a los detalles. Para la recogida de embriones colocar un mínimo de 50 hembras vírgenes con 20 a 25 machos por botella con alimentos de agar harina de maíz e incubar estas moscas durante uno o dos días antes de comenzar las colecciones. El día antes de la recolección, platos calientes de agar con jugo de manzana a 25 grados centígrados durante la noche.
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