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Generación de organoides mamarios de mosaico por trippsinización diferencial
Generación de organoides mamarios de mosaico por trippsinización diferencial
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JoVE Journal Developmental Biology
Generation of Mosaic Mammary Organoids by Differential Trypsinization

Generación de organoides mamarios de mosaico por trippsinización diferencial

Full Text
6,764 Views
09:40 min
March 11, 2020

DOI: 10.3791/60742-v

Stefany Rubio1, Oscar Cazares1, Hector Macias1, Lindsay Hinck1

1Department of Molecular, Cell and Developmental Biology,University of California, Santa Cruz

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

La glándula mamaria es una estructura bicapa, que comprende células epiteliales mioepiteliales externas e internas. Presentado es un protocolo para preparar organoides utilizando la trippsinización diferencial. Este método eficiente permite a los investigadores manipular por separado estos dos tipos de células para explorar preguntas sobre sus funciones en la forma y función de la glándula mamaria.

Nuestro método es significativo porque permite a los investigadores aislar y manipular diferentes tipos de células para la investigación de sus contribuciones individuales de linaje a la forma y función del tejido. Esta técnica es un método suave y eficaz para separar los tipos de celda y, como resultado, la integridad de las celdas se conserva para el cultivo 3D. Esta técnica también se puede aplicar a otros sistemas para aislar células que no tienen biomarcadores bien caracterizados.

Para cosechar las glándulas mamarias número dos, tres, cuatro y cinco de un ratón hembra de 10 a 14 semanas de edad, primero haga una incisión de un centímetro en la línea media entre las dos extremidades posteriores. Extienda el corte hasta el cuello y haga pequeños cortes laterales desde la incisión de la línea media hacia las extremidades. Luego estira la piel enseñada antes de asegurarla con un alfiler a cada lado del animal.

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