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DOI: 10.3791/60742-v
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La glándula mamaria es una estructura bicapa, que comprende células epiteliales mioepiteliales externas e internas. Presentado es un protocolo para preparar organoides utilizando la trippsinización diferencial. Este método eficiente permite a los investigadores manipular por separado estos dos tipos de células para explorar preguntas sobre sus funciones en la forma y función de la glándula mamaria.
Nuestro método es significativo porque permite a los investigadores aislar y manipular diferentes tipos de células para la investigación de sus contribuciones individuales de linaje a la forma y función del tejido. Esta técnica es un método suave y eficaz para separar los tipos de celda y, como resultado, la integridad de las celdas se conserva para el cultivo 3D. Esta técnica también se puede aplicar a otros sistemas para aislar células que no tienen biomarcadores bien caracterizados.
Para cosechar las glándulas mamarias número dos, tres, cuatro y cinco de un ratón hembra de 10 a 14 semanas de edad, primero haga una incisión de un centímetro en la línea media entre las dos extremidades posteriores. Extienda el corte hasta el cuello y haga pequeños cortes laterales desde la incisión de la línea media hacia las extremidades. Luego estira la piel enseñada antes de asegurarla con un alfiler a cada lado del animal.
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