Name: Modelo de aneurisma de bifurcación microquirúrgica de bolsa arterial en el conejo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: Aprenda a crear un modelo microquirúrgico de aneurisma de bolsa arterial en conejo para evaluación preclínica de dispositivos endovasculares. Esta técnica estandarizada permite estudiar el crecimiento aneurismático con alta reproducibilidad.

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Los autores agradecen a Olgica Beslac y Kay Nettelbeck por su excelente apoyo y asistencia técnica durante la fase perioperatoria y a Alessandra Bergadano, DVM, PhD, por la supervisión dedicada de la salud animal a largo plazo.

Toda la atención veterinaria se realizó de acuerdo con las directrices institucionales (todos los experimentos fueron aprobados por el Comité Local para el Cuidado de los Animales del Cantón de Berna, Suiza (BE 108/16)) y se llevó a cabo bajo la supervisión de un anestesiólogo veterinario certificado por la junta. Las directrices de ARRIVE y los principios de las 3R se siguieron estrictamente17,18.
NOTA: Aloje a todos los animales a una temperatura ambiente de 22 \ u201224 Celsius (° C) y mantenga un ciclo de luz / oscuridad de 12 horas (h). Proporcione acceso gratuito a la dieta de agua, pellets y heno ad libitum en todo momento. Los análisis estadísticos se realizaron mediante la prueba no paramétrica de Wilcoxon-Mann-Whitney-U. Se consideró significativo un valor de probabilidad (p) de ≤ 0,05.
1. Fase prequirúrgica
<ol><li>Realice un examen clínico preoperatorio detallado de todos los conejos planificados para la cirugía inmediatamente al lado de una sala de operaciones silenciosa y aséptica que mantenga una temperatura de 23 ± 3 ° C.<ol>
<li>Registre el peso de cada animal, evalúe macroscópicamente las membranas mucosas, el tiempo de recarga capilar y la calidad del pulso.</li>
		<li>Más adelante realizar auscultación cardíaca con estetoscopio y palpación abdominal.</li>
		<li>Sobre la base de los hallazgos clínicos, atribuir una clasificación de la Sociedad Americana de Anestesiólogos (ASA) a cada conejo19. Incluya solo animales con una puntuación ASA I en el estudio.</li>
		<li>Afeitar ambas orejas externas con una afeitadora eléctrica y aplicar crema de prilocaína-lidocaína en ambas arterias y venas auriculares.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sedar al conejo con una combinación de 20 miligramos (mg)/killograma (kg) de ketamina, 100 mg/kg de dexmedetomidina y 0,3 mg/kg de metadona inyectada por vía subcutánea (SC) a través de una jeringa.</li>
	<li>Deje a cada animal sin molestar durante al menos 15 minutos.</li>
	<li>A partir de entonces, bajo oxigenación suplementaria con 3 litros (l)/minuto (min) a través de una mascarilla suelta y monitorización constante a través de un pulsioxímetro, colocar una cánula de 22 G en la arteria central auricular izquierda y otra cánula de 22 G en la vena auricular del oído contralateral.</li>
	<li>Afeitarse el campo quirúrgico (cuello) e inyectar 0,75% de ropivacaína periincisional por vía intradérmica. A continuación, afeitarse la frente y prepararse para colocar sensores electroencefalográficos (EEG) pediátricos.</li>
	<li>Inducir anestesia general con propofol 1-2 mg/kg por vía intravenosa (IV) para que surta efecto. Luego intuba inmediatamente la tráquea de todos los conejos con un tubo de silicona (3 milímetros (mm) de diámetro interno) bajo control capnográfico. Después, transporta a todos los conejos a la sala de operaciones, colócalos en recostada dorsal y conecta el tubo a un sistema de círculo pediátrico.</li>
	<li>Lograr la profundización y el mantenimiento de la anestesia a través del isoflurano en oxígeno, apuntando a una concentración máxima de isoflurano de marea final del 1,3%.</li>
	<li>Asegurar la monitorización clínica e instrumental (oximetría de pulso, doppler y presión arterial invasiva, electrocardiograma de 3 derivaciones, EEG, monitorización de la temperatura rectal y gases inhalados y exhalados) hasta la extubación traqueal.</li>
	<li>Para mantener la hidratación, proporcione lactato de Ringer a una infusión de velocidad continua (CRI) de 5 ml/kg/h a través del acceso venoso. Siempre confirme la anestesia adecuada usando pellizcos en los dedos de los pies en un intervalo de 10 min.</li>
	<li>Desinfectar el campo quirúrgico con povidona yodada del manubrium sterni a ambos ángulos de la mandíbula. Ahora, realice un drapeado estéril del campo quirúrgico.</li>
	<li>Durante la cirugía, proporcione analgesia con lidocaína a un CRI de 50 microgramos (μg)/kg/min y fentanilo a 3\u201210 μg/kg/h. Aplicar ventilación espontánea o asistida así como hipercapnia permisiva. Realice un análisis de gases en sangre arterial al menos una vez durante la cirugía.</li>
	<li>Tratar la hipotensión relevante (presión arterial media < 60 mmHg) con noradrenalina. Prevenga la hipotermia (temperatura rectal ≤ 38 °C) utilizando una almohadilla térmica o un sistema de calentamiento de aire forzado de calefacción.</li>
</ol>2. Fase quirúrgica – Paso I
<ol><li>Comience la cirugía con una incisión mediana en la piel desde el manubrium sterni hasta el nivel de los ángulos de la mandíbula / laringe. Diseccionar bruscamente la piel y los tejidos blandos con un bisturí, tijeras quirúrgicas y fórceps. Separe el subcutis y la almohadilla de grasa medialmente mediante disección roma.</li>
	<li>Ingrese a la cresta superior anterior del músculo esternocleidomastoideo medialmente en el lado izquierdo mediante disección roma, utilizando micro pinzas y tijeras quirúrgicas.</li>
	<li>Macroscópicamente, realice una preparación contundente y separe cuidadosamente el CCA izquierdo del nervio vago distalmente para evitar la paresia laríngea mediante el uso de micro pinzas y tijeras quirúrgicas (Figura 2). Nótese que la bifurcación del CCA izquierdo sirve como punto de referencia intraoperatorio (Figura 3 y Figura 4A). Para todos los pasos siguientes, use un esparcidor de tejidos blandos para mejorar la visualización quirúrgica.</li>
	<li>Después de la preparación exitosa y la liberación del CCA distal izquierdo del nervio vago, administre papaverina (40 mg / ml, 1: 1 diluido en solución de cloruro de sodio isotónico al 0,9%) localmente. Proteja continuamente todos los segmentos de los vasos con micro hisopos seguidos de una administración adicional de papaverina externamente. Coloque el CCA izquierdo empapado de papaverina debajo del tejido muscular autólogo para proteger el vaso del secado bajo la luz del microscopio de operación.</li>
	<li>Cambie de lado mientras maximiza la comodidad del cirujano durante el procedimiento quirúrgico. Repita el mismo procedimiento quirúrgico en el lado derecho. Diseccionar el CCA distal y proximalmente hasta los puntos de referencia predefinidos (bifurcación carótida a nivel de los ángulos de la mandíbula/laringe y vena yugular interna; Figura 4A,B). Vuelva a insertar un esparcidor y administre micro hisopos y papaverina como se describió anteriormente.</li>
	<li>Antes de la ligadura del CCA proximal derecho, inyecte heparina (500 unidades internacionales [UI]/kg) sistémicamente a través de un catéter venoso para el oído.</li>
	<li>Use un microscopio quirúrgico de ahora en adelante. Primero, ligar el CCA proximal derecho con una sutura no absorbible 4-0 directamente al final del punto de referencia proximal macroscópicamente visible para evitar cualquier tensión en el vaso arterial.<ol>
<li>En segundo lugar, aplicar una ligadura no absorbible 6-0 exactamente 4\u20125 mm distalmente mediante el uso de un clip de vaso para la medición, considerando que después de cortar distalmente de la primera ligadura 4-0, la bolsa arterial resultante será de longitud estandarizada de aproximadamente 3\u20124 mm en cada animal (Figura 5A,C).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Después de apretar la ligadura 6-0, pinza el CCA derecho lo más distalmente posible con un clip de vaso temporal (como se usa normalmente en la cirugía de aneurisma cerebral) para evitar cualquier daño endotelial y crear un segmento de vaso largo para la irrigación con el fin de prevenir la trombogénesis (Figura 5B).</li>
	<li>Ahora realice un corte distal a la ligadura no absorbible 4-0. Para cosechar la bolsa arterial (Figura 5C), realice un segundo corte distal a la ligadura no absorbible 6-0.</li>
	<li>Limpie la bolsa arterial meticulosamente de todo el tejido blando y mida su longitud, anchura y profundidad (Figura 5C) con un clip de vaso. Si no se necesita ninguna modificación adicional, mantenga el injerto arterial autólogo en una solución heparinizada (500 UI/100 ml en cloruro de sodio isotónico al 0,9%) a temperatura ambiente hasta su uso posterior.</li>
</ol>3. Degradación de la bolsa arterial
<ol><li>Si se necesita una degradación de la bolsa arterial, límpiela meticulosamente de tejido blando y preincubarla con 100 UI de elastasa porcina disuelta en 5 ml de Tris-buffer a temperatura ambiente el día del experimento durante 20 min. No utilice una técnica de cepillo. Incubar la bolsa arterial intra y extraluminalmente mediante el uso de un agitador.</li>
	<li>Antes de colocar la bolsa en una solución heparinizada de cloruro de sodio isotónico al 0,9%, deslícela suavemente tres veces durante 3 minutos con fórceps anatómicos en una solución de cloruro de sodio isotónico al 0,9% para eliminar la elastasa porcina restante.</li>
	<li>Si es necesario, mantenga la luz de la bolsa arterial abierta con un microtubo hecho de silicona; proteja meticulosamente el CCA izquierdo y derecho durante todo el procedimiento quirúrgico con micro acolchados húmedos.</li>
</ol>4. Fase quirúrgica – Paso II
<ol><li>Para una mayor preparación del CCA, coloque dos micro hisopos redondos directamente debajo de él para mover la arteria más superficialmente. Ahora, coloque un micro hisopo con un acolchado púrpura debajo del CCA izquierdo en el tercio distal para una mejor visualización de la arteria.</li>
	<li>Enjuague el CCA proximal derecho con una solución de cloruro de sodio isotónico al 0,9% combinado con 500 UI de heparina disuelta en 100 ml de cloruro de sodio isotónico al 0,9%. Para crear una anastomosis libre de tensión, coloque el CCA derecho debajo de la almohadilla de grasa / musculatura peritraqueal mediante el uso de tijeras quirúrgicas para tunelizarlo hacia el lado izquierdo. Extirpar el tejido blando de la arteria.<ol>
<li>Ahora realice una incisión de boca de pez de 2 mm en el lado proximal del CCA derecho utilizando una micro tijera y fórceps.</li>
	</ol></li>
	<li>Cambie el lado de la mesa de operaciones. Recorte el CCA distal izquierdo con otro clip de vaso temporal seguido del CCA izquierdo proximal con dos clips de vaso temporales. Proteja todos los segmentos de los vasos expuestos de la desecación bajo la luz quirúrgica con microhisopos húmedos.</li>
	<li>Liberar completamente el tercio distal de la CCA izquierda del tejido blando y realizar una arteriotomía. Use micro pinzas quirúrgicas y agarre suavemente un poco de tejido blando. Ahora eleve la arteria e incite lentamente el CCA distal izquierdo con una micro tijera quirúrgica. Enjuague los segmentos de los vasos con heparina (500 UI disueltas en 100 ml de solución isotónica de cloruro de sodio al 0,9%).</li>
	<li>Después de realizar la arteriotomía con micro pinzas curvas y micro tijeras, agrandar la arteriotomía situada en el tercio distal del CCA izquierdo distalmente, midiendo aproximadamente 2 veces el diámetro del romo derecho de la arteria carótida y el injerto autólogo. Esto permite un flujo sanguíneo suficiente en la bolsa arterial.</li>
	<li>Saque la bolsa arterial de la solución salina heparinizada. Coloque la bolsa en el campo quirúrgico, donde se planea la bifurcación. Comience a suturar la parte posterior de la carada derecha roma ubicada caudalmente con una sutura 9-0 no absorbible, seguida de una sutura en el lado posterior ubicado cranealmente al nivel de la incisión de la boca del pez. Termina de coser la parte trasera de distal a proximal mediante puntadas simples.</li>
	<li>Durante la sutura, mantenga húmedas todas las bolsas preincutadas de elastasa con riego continuo. Mientras sutura la pared del vaso de la bolsa, use micro fórceps quirúrgicos curvos para abrir suavemente el lumen con su punta. Siempre que sutura partes del CCA izquierdo o proximal derecho, use micro pinzas quirúrgicas rectas. Después, sutura la parte posterior horizontal.</li>
	<li>A continuación, sutura el lado frontal horizontal, comenzando en la cúpula del aneurisma que se mueve hacia su base. Después, comience con puntos de sutura individuales distalmente en la parte frontal moviéndose caudalmente.<ol>
<li>Para todos los pasos 4.5\u20124.8 mientras se sutura la anastomosis, preste atención solo para agarrar la parte del vaso cerca de la arteriotomía para evitar la estenosis iatrogénica. Además, humedezca continuamente todos los segmentos de los vasos durante todo el procedimiento quirúrgico extraluminalmente con una jeringa llena de solución de cloruro de sodio heparinizada (500 UI disueltas en 100 ml de cloruro de sodio isotónico al 0,9%) y protéjalos con micro hisopos húmedos.</li>
		<li>Antes de terminar la anastomosis, irrigar todo el complejo con solución heparinizada de cloruro de sodio isotónico al 0,9% intraluminal (500 UI disueltas en 100 ml de cloruro de sodio isotónico al 0,9%). Tenga en cuenta que las bolsas arteriales modificadas con elastasa deben coserse lo más rápido posible debido a su fuerte tendencia a secarse y trombosarse. Debido al comportamiento agresivo de la concentración de elastasa residual en la bolsa con respecto a la digestión de los vasos circunferenciales, proceda rápidamente con la cirugía para volver a perfundir el complejo del vaso rápidamente.</li>
	</ol></li>
	<li>Retire todas las pinzas vasculares temporales por pasos.<ol>
<li>Retire la abrazadera distal del CCA izquierdo. Acepte un sangrado menor y manténgalo imprimiendo suavemente micro hisopos en la anastomosis. Después, retire la abrazadera del CCA derecho, presione suavemente con micro hisopo y fórceps para evitar la formación de trombos.</li>
		<li>Si es necesario, reemplace los clips vasculares temporales para proporcionar suficiente coagulación. Después, alivie ambos clips de vasos del lado izquierdo proximalmente. Si es necesario en cualquier paso, reemplace los clips para permitir la coagulación o para realizar una nueva costura.</li>
	</ol></li>
	<li>En esta etapa realizar angiografía por fluorescencia del complejo vascular (Figura 6 y Figura 7). NOTA: La angiografía por fluorescencia se realiza administrando 1 ml de fluoresceína IV, utilizando 2 filtros de paso de banda, un teléfono inteligente con cámara de video y un foco de bicicleta. Este procedimiento ya ha sido descrito en otra parte 20,21,22.</li>
	<li>Por último, cierre el situ operativo. Readapta y sutura suavemente la almohadilla de grasa con una sutura reabsorbible 3-0 con ganglios individuales para proteger la anastomosis. Cierre subcutis y piel de la misma manera.</li>
</ol>5. Fase postquirúrgica
<ol><li>Suspender la administración de isoflurano y analgesia sistémica al final de la cirugía y proporcionar extubación traqueal tan pronto como el reflejo de deglución haya regresado.</li>
	<li>Administrar 0,5 mg/kg de meloxicam IV, 10 mg/kg de aspirina (ASS) IV, 100 μg de vitamina B12 SC y 20 mg/kg de clamoxilo IV.</li>
	<li>Proporcionar oxigenación suplementaria y calentamiento activo hasta que los conejos hayan recuperado espontáneamente la reclinación esternal.</li>
	<li>Realizar seguimiento postoperatorio y cuidado de animales cuatro veces al día durante los tres primeros días, de acuerdo con las pautas para la evaluación y manejo del dolor en roedores y conejos23,24.</li>
	<li>Administrar analgesia postoperatoria a través de un parche de fentanilo (12 μg/h) aplicado en el oído externo, meloxicam una vez al día SC durante tres días y metadona como terapia de rescate SC, de acuerdo con la hoja de puntuación para la evaluación del dolor. Administrar 250 UI/kg de heparina de bajo peso molecular (HBPM) por vía subcutánea durante tres días en todos los conejos.</li>
</ol>

Este trabajo fue apoyado por los fondos de investigación del Consejo de Investigación, Kantonsspital Aarau, Aarau, Suiza y la fundación científica nacional suiza SNF (310030_182450). Los autores son los únicos responsables del diseño y la realización del estudio presentado y no declaran intereses contrapuestos.

Nuestro estudio demuestra la viabilidad de crear un verdadero modelo de aneurisma de bifurcación con diferentes condiciones de pared en conejos. En general, se incluyeron en el estudio 14 conejos blancos hembra de Nueva Zelanda con un peso medio de 3,7 ± 0,09 kg y una edad media de 112 ± 3 días. El 85,72% de todos los aneurismas permanecieron patentes durante un seguimiento a los 28 días. Dos animales murieron prematuramente (12,5% de mortalidad).
Estudios previos sugirieron una variedad de mo...

La hemorragia subaracnoidea resultante de la ruptura del aneurisma intracraneal (IA) puede controlarse eficazmente mediante técnicas de oclusión endovascular o microquirúrgica 1,2,3,4. Diferentes terapias endovasculares, para superar la principal limitación de la recurrencia de la IA después del enrollamiento, ganaron importancia en las últimas décadas generando una mayor necesidad de probar dispositivos endovasculares. Para probar estos nuevos enfoques de tratamiento, los modelos animales apropiados que respetan las propiedades reológicas, la hemodinámica y las condiciones de la pared del aneurisma están altamente justificados 5,6,7. En este contexto, tanto los estudios clínicos como preclínicos ya han revelado el importante papel de las afecciones de la pared del aneurisma con respecto a la ruptura y recurrencia del aneurisma después de la oclusión, centrándose especialmente en la pérdida de células murales 7,8,9.
Hasta ahora, los aneurismas experimentales en conejos se han creado con mayor frecuencia ya sea por tocones de arteria carótida común (CCA) incubados con elastasa o bolsas venosas suturadas en una bifurcación artificial de CCA. 10,11,12,13,14,15,16 Así, nunca se ha descrito un verdadero modelo de bifurcación de bolsa arterial.
El objetivo de este estudio fue diseñar una técnica segura, rápida y estandarizada para la creación microquirúrgica de aneurismas de bifurcación con diferentes condiciones de pared en un modelo de conejo (Figura 1). Esto se logró suturando bolsas arteriales no modificadas y modificadas en una bifurcación artificial creada de ambas CCA.

<table><tbody><tr><td>Sutura reabsorbible 3-0</td><td>Ethicon Inc., EE. UU.</td><td>VCP428G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 sutura no absorbible</td><td>B. Braun, Alemania</td><td>G0762563</td><td></td></tr><tr><td>6-0 sutura no absorbible</td><td>B. Braun, Alemania</td><td>C0766070</td><td></td></tr><tr><td>9-0 sutura no absorbible</td><td>B. Braun, Alemania</td><td>G1111140</td><td></td></tr><tr><td>Adrenaline</td><td>Amino AG</td><td>1445419</td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Amiodarone</td><td>Helvepharm AG</td><td>5078567</td> cualquier <td></td></tr><tr><td>máquina de anestesia</td> genérica <td>Dr&auml; ger</td><td></td><td>cualquier otra</td></tr><tr><td>Aspirina</td><td>Sanofi-Aventis (Suisse) SA</td><td>622693</td><td>cualquier Atropina Genérica</td></tr><tr><td></td><td>Labatec Pharma SA</td><td>6577083</td><td>cualquier Filtro de</td></tr><tr><td>paso de banda genérico azul</td><td>Thorlabs</td><td>FD1B</td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Filtro de paso de banda verde</td><td>Thorlabs</td><td>FGV9</td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Pinza</td><td></td><td></td> bipolar <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Foco</td><td></td><td></td> de bicicleta <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>clip para vaso Biemer (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Suiza</td><td>FD560R</td><td>temporal</td></tr><tr><td>Índice biespectral (neonatal)</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Manguito de presión arterial (neonatal)</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Clamoxyl</td><td>GlaxoSmithKline AG</td><td>758808</td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Dexmedetomidina</td><td>Ever Pharma</td><td>136740-1</td><td>cualquier</td></tr><tr>electrodo <td></td><td></td> de<td>electrocardiograma</td> genérico <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Elastase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45125</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Efedrina</td><td>Amino AG</td> genérico <td>1435734</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Esmolol</td><td>OrPha Swiss GmbH</td> genérico <td>3284044</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Fentanilo genérico (uso intravenoso)</td><td>Janssen-Cilag AG</td><td>98683</td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Fentanilo (transdérmico)</td><td>Mepha Pharma AG</td><td>4008286</td><td>cualquier Fluoresceína</td></tr><tr><td></td><td>Curatis AG</td> genérico <td>5030376</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>genérico Fragmin Pfizer</td><td>PFE Switzerland GmbH</td><td>1906725</td><td>cualquier</td></tr> genérico <tr><td>Glyco</td><td></td><td></td><td>cualquier</td></tr> genérico <tr><td>Almohadilla</td><td></td><td></td> térmica <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Solución isotónica de cloruro de sodio (0.9%)</td><td>Fresenius KABI</td><td>336769</td><td>cualquier Ketamina genérica</td></tr><tr><td></td><td>Pfizer</td><td>342261</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Agitador de laboratorio</td><td>genérico Stuart</td><td>SRT6</td><td>cualquier otra</td></tr><tr><td>Lidocaína</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>747466</td><td>cualquier Longuettes</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> genérica <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Metacam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>P7626406</td> cualquier Metadona <td>Genérica</td></tr>, <tr><td></td><td>Streuli Pharma AG</td><td>1084546</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Microtubos genéricos</td>, <td>cualquier otro</td>Micro soporte de aguja, cualquier otro Midazolam Accord Healthcare AG 7752484 cualquier otro genérico Portaagujas<td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td>, <td>cualquier otro</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>O2-Mascarilla</td><td></td><td></td><td>facial cualquier otro</td></tr><tr><td>Operación microscopio</td><td>Wild Heerbrugg</td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Papaverine</td><td>Bichsel</td><td></td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Prilocaína-lidocaína crème</td><td>Emla</td><td></td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Propofol</td><td>B. Braun Medical AG, Suiza</td><td></td><td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Oxímetro</td><td></td><td></td> de pulso <td>cualquier genérico</td></tr><tr><td>Sonda de temperatura rectal (neonatal)</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Ropivacaína</td><td>Aspen Pharma Schweiz GmbH</td><td>1882249</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Scalpell</td><td>Swann-Morton</td><td>210</td><td>genérico cualquier otro</td></tr><tr><td>afeitador</td><td></td><td></td> para animales pequeños <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Smartphone</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Pinza</td><td></td><td></td> para tejidos blandos<td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Esparcidor de</td><td></td><td></td> tejidos blandos <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Cuencos de esponja de</td><td></td><td></td> acero inoxidable <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Microhisopos estériles</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Estetoscopio</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Micropinzas</td><td></td><td></td> rectas y curvas <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Microtijeras rectas</td><td></td><td></td> y curvas <td>cualquier otro</td></tr><tr>Pinzas <td></td><td></td><td>rectas y curvas</td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Paño</td><td></td><td></td> quirúrgico <td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Tijeras quirúrgicas</td><td></td><td></td><td>cualquier otra</td></tr><tr><td>Jeringas de 1 ml, 2 ml y 5 ml</td><td></td><td></td><td>cualquier otro</td></tr><tr><td>Tris-Buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>93302</td><td>cualquier</td></tr><tr><td>genérico Aplicador de clip vascular</td><td>B. Braun, Alemania</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Catéter para venas y arterias 22 G</td><td></td><td></td><td>cualquier</td></tr><tr><td>Vitarubin</td> genérico <td>Streuli Pharma AG</td><td>6847559</td><td>cualquier clip</td></tr><tr><td>estándar Yasargil titan genérico (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Suiza</td><td>FT242T</td><td>temporal</td></tr></tbody></table>

modelo de aneurisma de bifurcación microquirúrgica de bolsa arterial en el conejo

Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit

El tratamiento endovascular para los aneurismas intracraneales ganó importancia en las últimas décadas, por lo que existe una mayor necesidad de probar dispositivos endovasculares. Los modelos animales que respetan las condiciones reológicas, hemodinámicas y de la pared del aneurisma están altamente justificados. Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue diseñar una nueva técnica quirúrgica estandarizada y reproducible para crear aneurismas de bifurcación de bolsa arterial autóloga con condiciones de pared no modificadas y modificadas en conejos.
Los aneurismas de bifurcación se crearon por anastomosis de extremo a lado de la arteria carótida común derecha en la izquierda, ambas sirviendo como arterias madre para la bolsa arterial, que fue cosida microquirúrgicamente. Se tomaron injertos de la arteria carótida común proximal derecha, ya sea para el grupo control (n = 7, reimplantación autóloga inmediata) o modificado (n = 7, incubado con 100 unidades internacionales de elastasa durante 20 minutos antes de la reimplantación autóloga). La permeabilidad de la bolsa y la arteria madre se controlaron mediante angiografía de fluorescencia inmediatamente después de la creación. En el seguimiento (28 días), todos los conejos se sometieron a angiografía por resonancia magnética mejorada con contraste y angiografía por fluorescencia seguida de recolección de aneurismas, evaluación macroscópica e histológica.
Un total de 16 hembras de conejos blancos de Nueva Zelanda fueron operados. Dos animales murieron prematuramente. En el seguimiento, el 85,72% de todos los aneurismas seguían siendo patentados. Ambos grupos revelaron un aumento en el tamaño del aneurisma con el tiempo; esto fue más pronunciado en el grupo control (6,48 ± 1,81 mm3 en el momento de la creación frente a 19,85 ± 6,40 mm3 en el seguimiento, p = 0,037) que en el grupo modificado (8,03 ± 1,08 mm3 en el momento de la creación frente a 20,29 ± 6,16 mm3 en el seguimiento, p = 0,054).
Nuestros hallazgos demuestran la idoneidad de este nuevo modelo de conejo que permite la creación de aneurismas de bifurcación con diferentes condiciones de pared en un enfoque microquirúrgico. Dada la excelente permeabilidad a largo plazo y la propiedad del crecimiento del aneurisma a lo largo del tiempo, este modelo puede servir como una herramienta importante para la evaluación preclínica de nuevas terapias endovasculares.

Después de una serie piloto de siete animales, se incluyeron un total de 16 animales en el protocolo experimental. Dos animales murieron prematuramente y, por lo tanto, fueron excluidos del análisis final (12,5% de mortalidad). Calculado en 14 animales, la tasa de permeabilidad inmediata del aneurisma durante la angiografía por fluorescencia fue del 71,43% tanto en el grupo control como en el modificado. Cuatro aneurismas tuvieron que ser reabiertos con evacuación consecutiva de trombos y después de una angiografía de fl...

El desarrollo y la prueba de dispositivos endovasculares para el tratamiento del aneurisma intracraneal siguen siendo de gran importancia. La mayoría de los modelos de aneurisma utilizados hoy en día pasan por alto las características importantes de una pared arterial degenerada o la hemodinámica de una verdadera bifurcación. Por lo tanto, nuestro objetivo fue diseñar un nuevo modelo de bifurcación de bolsas arteriales en conejos.

Modelo de aneurisma de bifurcación microquirúrgica de bolsa arterial en el conejo

Endovascular treatment for intracranial aneurysms gained importance over the past decades, consequently there is an increased need of testing endovascular ...

Dado que el desarrollo y las pruebas de dispositivos endovasculares en el tratamiento de los aneurismas intracraneales siguen siendo muy necesarios. Hemos diseñado un novedoso modelo de bifurcación de la bolsa arterial en conejos. Este modelo utiliza una técnica microquirúrgica única, altamente estandarizada y fácilmente reproducible para crear aneurismas de bifurcación en bolsa de material autólogo con condiciones de pared modificadas y no modificadas en conejos.Después de confirmar una falta de respuesta al reflejo pedal en un conejo adulto anestesiado, haga una incisión en la piel mediana desde el manubrium sterni hasta el nivel de la laringe, y use un bisturí, tijeras quirúrgicas y fórceps para diseccionar bruscamente la piel y el tejido blando. Con micropinzas y tijeras quirúrgicas, introduzca la cresta superior anterior del músculo esternocleidomastoideo inmediatamente en el lado izquierdo mediante disección roma. Y macroscópicamente realizar una preparación roma para separar distalmente cuidadosamente la arteria carótida común izquierda del nervio vago para evitar la paresia laríngea.Administre 40 miligramos por mililitro de papaverina localmente en la arteria y coloque la arteria empapada de papaverina debajo del tejido muscular autólogo para proteger el vaso de la deshidratación bajo la luz del microscopio quirúrgico. Cambie de lado y realice la misma disección en el lado derecho del animal como se acaba de demostrar. Cuando se ha aislado la arteria carótida común derecha, inyectar 500 unidades internacionales por kilogramo de heparina sistémicamente a través de un catéter venoso en el oído.Después de apretar la ligadura de seis ceros, use un clip de vaso temporal para sujetar la arteria carótida común derecha lo más distalmente posible para evitar daño endotelial, para crear un segmento de vaso largo para la irrigación y evitar la trombogénesis. Para cosechar la bolsa, corte el vaso distal a la ligadura no absorbible de cuatro ceros. A continuación, corte el vaso distal a la ligadura 6-0 no absorbible.Limpie meticulosamente la bolsa arterial de todo el tejido blando y use un clip para vasos sanguíneos para medir la longitud, el ancho y la profundidad de la bolsa. Si es necesario degradar la bolsa, preincube la bolsa limpia con 100 unidades de elastasa porcina disueltas en cinco mililitros de tampón Tris a temperatura ambiente durante 20 minutos. Para una mayor preparación de la arteria carótida común, coloque dos microhisopos directamente debajo de la arteria carótida común para permitir que el vaso se mueva superficialmente y coloque un microhisopo adicional con un acolchado azul debajo de la arteria izquierda en el tercio distal para una mejor visualización de la arteria.Cambie de lado para acceder al lado izquierdo del animal y use microtijeras y pinzas para hacer una incisión de dos milímetros en la boca del pez en el lado proximal de la arteria carótida común derecha. Utilice la segunda pinza de vaso temporal para pinzar la arteria carótida común distal izquierda y pinzar la arteria carótida común izquierda proximal con dos pinzas de vaso temporal adicionales. Cuando se hayan colocado todas las pinzas, libere completamente el tercio distal de la arteria carótida común izquierda del tejido blando y realice una arteriotomía.Ahora enjuague el vaso receptor con solución salina heparinizada y libere el complejo de una adventicia, luego sutura la arteria carótida común derecha a la arteria carótida común izquierda. Transfiera la bolsa arterial de la solución salina heparinizada al campo quirúrgico donde se planea la bifurcación. Mientras mantiene hidratados todos los aspectos del complejo vascular con una irrigación salina continua, sutura la bolsa al vaso y luego retire todas las pinzas vasculares temporales de manera escalonada.Cuando se hayan retirado todas las pinzas, administre un mililitro de fluoresceína por vía intravenosa para realizar una angiografía con fluorescencia del complejo vascular. A continuación, cierre el lugar operatorio de acuerdo con los protocolos estándar. En este análisis experimental, los animales con aneurismas inducidos por los métodos de bolsa vital o de elastasa demostraron un aumento en el tamaño del aneurisma con el tiempo.La duración promedio del procedimiento quirúrgico para el grupo de control fue de 164 más o menos 10 minutos, en comparación con 201 más o menos 13 minutos para el grupo modificado. Se necesitó un promedio de 24 suturas interrumpidas más o menos una para crear aneurismas en el grupo controlado, mientras que en el grupo de elastasa se requirieron 25 puntos más o menos dos. A continuación, las mediciones se pueden realizar mediante el uso de reconstrucciones tridimensionales de las imágenes de resonancia magnética y análisis histológicos detallados.Una separación cuidadosa de la arteria carótida común del nervio vago es esencial para evitar complicaciones postoperatorias. Para evitar la trombogénesis, mantenga hidratado el vaso y el complejo de bolsa arterial. Dada la excelente permeabilidad lograda con el crecimiento del aneurisma a lo largo del tiempo, este modelo puede servir como una herramienta importante para la evaluación preclínica de nuevos dispositivos endovasculares.

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Investigación

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Neurociencia

Una técnica optimizada para la creación de microcirugía de los aneurismas de la bifurcación arterial imitando bifurcación aneurisma cerebral humana se describe. Una bolsa venosa se sutura en una bifurcación creado artificialmente el caso de las dos arterias carótidas comunes. Facilitó las técnicas microquirúrgicas y la anticoagulación agresiva postoperatorio y analgesia conducir a minimizar las tasas de morbilidad y altas tasas de permeabilidad de un aneurisma.

Microcirugía venosa bolsa arterial-Bifurcación Los aneurismas en el modelo de conejo: Aspectos Técnicos

Fuente: Wanderer, S., et al. Modelo de aneurisma de bifurcación microquirúrgica con bolsa arterial en conejo. J. Vis. Exp. (2020)Este video muestra la creación de un modelo experimental de aneurisma en un conejo utilizando una bolsa de recipiente tratada con elastasa. Después de extirpar un segmento del CCA derecho, la bolsa se trata con elastasa y luego se sutura al CCA izquierdo para restaurar el flujo sanguíneo. La tensión resultante en las paredes debilitadas de la bolsa induce la formación...

Desarrollo de un modelo experimental de aneurisma en un conejo utilizando una bolsa vascular tratada con elastaso

Modificaciones histológicas y bioquímicas después de aneurisma endoprótesis exclusión aún no están claros. Se describe un nuevo modelo de implantación de endoprótesis en un aneurisma murino. A través del análisis de trombos con y sin circulación de interfaz de flujo de sangre persistente, y la nueva evaluación de biomateriales endovascular, este modelo nos ayudará a entender mejor la exclusión endovascular del aneurisma patobiología.

Un modelo murino Nueva endovascular de aneurismas aórticos

Los aneurismas microquirúrgicos de la pared lateral en ratas se crean mediante la anastomosis de extremo a lado de un injerto aórtico a la aorta abdominal. Presentamos instrucciones paso a paso y discutimos detalles anatómicos y quirúrgicos para la creación exitosa de un aneurisma sacular experimental.

El Helsinki Rata microquirúrgica flanco Aneurisma Modelo

Este protocolo describe los pasos para la creación de un modelo de conejo con dos aneurismas digeridos por elastasa con diferente hemodinámica (muñón y constelación de bifurcación). Esto permite probar nuevos dispositivos endovasculares en aneurismas con diferentes condiciones angioarquitectónicas y hemodinámicas dentro de un solo animal.

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En este trabajo se describe la técnica para la creación microquirúrgica de aneurismas gigantes en bifurcación en conejos para la evaluación de dispositivos endovasculares.

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Se necesita un modelo animal apropiado para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) y para evaluar la eficacia de las intervenciones terapéuticas. El presente protocolo describe un nuevo procedimiento para desarrollar el modelo de conejo AVS a través de una lesión directa con balón in vivo.

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Una de las características patológicas de la EA es la formación de placas de proteína amiloide β neuríticas positivo. En este protocolo se describen dos métodos de detección de placas neuríticas en ratones transgénicos modelo de AD: la detección inmunohistoquímica utilizando el método ABC y DAB y detección fluorescente utilizando el método de tinción thioflavin S.

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Visualización de los propioceptores<em&gt; Drosophila</em&gt; Las larvas y pupas

Condicionamiento de clásico de rastro eyeblink (ECC) se utilizó para evaluar aprendizaje dependiente de hipocampo en ratas adultas que fueron administrados a una alta concentración (11,9% v/v) de alcohol durante el desarrollo temprano del cerebro neonatal. En general, los procedimientos ECC son sonidas herramientas de diagnóstico para detectar disfunción cerebral a través de muchos contextos psicológicos y biomédicos.

El uso de condicionamiento de clásico de Eyeblink rastro para evaluar disfunción hipocampal en un modelo de rata de trastornos del espectro alcohólico Fetal

Aprenda a crear un modelo microquirúrgico de aneurisma de bolsa arterial en conejo para evaluación preclínica de dispositivos endovasculares. Esta técnica estandarizada permite estudiar el crecimiento aneurismático con alta reproducibilidad.

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