Cristalografía de rayos X para estudiar la transición del estado oligomérico de la Thermotoga maritima M42 Aminopeptidasse TmPep1050

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13 de mayo de 2020

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Este protocolo ha sido desarrollado para estudiar la transición dimer-dodecamer de TmPep1050, un M42 aminopeptidasa, a nivel estructural. Es una tubería sencilla que va desde la purificación de proteínas hasta el procesamiento de datos de rayos X. La cristalgénesis, la indexación de conjuntos de datos y el reemplazo molecular se han enfatizado a través de un caso de estudio, la variante TmPep1050H60A H307A.

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Purificación de dodécameros

Chapters in this video

0:04

Introduction

1:03

Activity Assay

2:19

Apoenzyme Preparation

3:32

Dimer Preparation

4:03

Microseeding

5:01

X-Ray Diffraction

5:48

Indexation

6:50

Molecular Replacement

8:04

Model Building

9:07

Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition

10:50

Conclusion

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