Name: Efectos ecotoxicológicos de los microplásticos en el desarrollo de embriones de aves por eclosión sin cáscara de huevo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Aprende a evaluar los efectos ecotoxicológicos de microplásticos en embriones de aves mediante el método de eclosión sin cáscara de huevo. Esta técnica innovadora mejora la fiabilidad de los estudios toxicológicos ambientales.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este trabajo fue apoyado por proyectos clave de investigación y desarrollo en la Región Autónoma de Xinjiang Uygur (2017B03014, 2017B03014-1, 2017B03014-2, 2017B03014-3).

1. Preparación antes de la exposición
<ol><li>Seleccione los huevos de codorniz fertilizados nacidos el mismo día para la prueba de exposición.</li>
	<li>Seleccione huevos de codorniz con pesos similares. Cada huevo de codorniz fertilizado es de aproximadamente 10-12 g.</li>
	<li>Limpie completamente todos los huevos de codorniz fertilizados de las heces externas y otros desechos.</li>
	<li>Esterilizar cada huevo de codorniz fertilizado pre-eclosionado y los huevos a utilizar (Elegir huevos con forma de cáscara similar, especialmente la punta del huevo) con una solución antibiótica (penicilina y estreptomicina, 1:1000, temperatura ambiente). Esterilizar la incubadora con etanol al 75%.</li>
	<li>Abra los huevos con el extremo romo de un taladro dental, dejando la cáscara de huevo en la punta para su uso posterior. Antes de transferir los óvulos fertilizados, se vierte el contenido de los huevos. Esto es para mantener la humedad de la cáscara de huevo. El diámetro de apertura del huevo era de unos 3 cm. NOTA: Para reducir el daño al embrión de codorniz, utilice un taladro dental para abrir el extremo romo del huevo y hacer que la grieta sea lo más suave posible.</li>
	<li>Después de la esterilización, coloque los huevos de codorniz fertilizados en una incubadora de 38 °C con un 60% de humedad durante 24-48 h. Asegúrese de que el extremo romo del huevo de codorniz mira hacia arriba.</li>
	<li>Durante la incubación de huevos de codorniz fertilizados, esterilizar las herramientas necesarias en los experimentos posteriores en una olla de esterilización. Estas herramientas incluyen una envoltura de plástico, un castor, agua estéril, puntas de pipeta, tijeras rectas quirúrgicas, pinzas y una cuchara. NOTA: Utilice una película con una tolerancia a la temperatura lo suficientemente alta como para evitar problemas con la esterilización a alta temperatura.</li>
</ol>2. Eclosionar el huevo de codorniz sin cáscara
<ol><li>Transfiera los huevos de codorniz fertilizados pre-eclosionados de la incubadora a un banco limpio y tírrelos planos en el recipiente para estabilizarlos durante aproximadamente 1-2 min.</li>
	<li>Utilice tijeras (tijera recta quirúrgica de 12,5 cm) para hacer un pequeño agujero (diámetro 3 mm) en el eje central de los huevos de codorniz fertilizados pre-eclosionados y para cortar 1-2 cm de abertura pequeña. Transfiera cuidadosamente la clara de huevo y la yema de los huevos de codorniz fertilizados a la cáscara de huevo cortada. NOTA: Al cortar una pequeña abertura con tijeras, evite tocar la yema de los huevos de codorniz.</li>
	<li>Añadir la solución de control (sin MPs) y la solución expuesta de diferentes masas (0,1, 0,2 y 0,3 mg) de microplásticos con tres tamaños de partícula (100, 200 y 500 nm) al contenido de huevo por pipeta. Al mismo tiempo, agregue 1 gota de penicilina y 1 gota de estreptomicina con una jeringa de 1 ml.</li>
	<li>Cubra la abertura de la cáscara de huevo con la película esterilizada (paso 1.6).</li>
	<li>De acuerdo con el paso 2.1-2.4, tratar todos los huevos de codorniz fertilizados.</li>
	<li>Coloque los embriones de codorniz transferidos en la incubadora de 38 °C con un 60% de humedad durante el período necesario. En este experimento, utilice un ángulo de rotación de huevos de ±30°. Gire los huevos una vez por hora. NOTA: La transferencia debe ser lo más rápida posible, lo que requiere más práctica en la etapa temprana.</li>
</ol>3. Recogida de muestras
<ol><li>Después de siete días de cultivo, retire los embriones bien desarrollados observados a simple vista de la yema y lávese con solución tamponada de fosfato (PBS).</li>
	<li>Seque el excedente de la solución fuera del embrión limpiado con papel absorbente y pese en una placa de Petri limpia.</li>
	<li>Abra toda la cavidad torácica, separe el hígado y el corazón de las vísceras con alicates de aguja y coloque en tubos centrífugos de 1,5 mL inmediatamente después de la limpieza.</li>
	<li>Registre rápidamente el peso en una balanza electrónica y calcule el índice hepatosomático (HIS = peso hepático / peso corporal x 100). Mida la longitud del esternón y el cuerpo.</li>
	<li>Sobre la base de los indicadores anteriores, evaluar el impacto de los diputados en el desarrollo embrionario. NOTA: La calidad del embrión aquí se refiere a la calidad de la eliminación de la yema.</li>
</ol>4. Análisis de datos
<ol><li>Informe los datos experimentales en forma de error estándar de ± medio (SEM).</li>
	<li>Utilice el análisis de varianza monofactorial para comparar las medias de varios grupos de muestras. El valor de diferencia significativa fue α = 0,05.</li>
</ol>

<ol><li>Geyer, R., Jambeck, J. R., Law, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production%2C+use%2C+and+fate+of+all+plastics+ever+made%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Production, use, and fate of all plastics ever made.</a> Science Advances. 3 (7), 5(2017).</li>
<li>Thompson, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lost+at+sea%3A+Where+is+all+the+plastic%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Lost at sea: Where is all the plastic.</a> Science. 304 (5672), 838-838 (2004).</li>
<li>Barletta, M., Lima, A. R. A., Costa, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution%2C+sources+and+consequences+of+nutrients%2C+persistent+organic+pollutants%2C+metals+and+microplastics+in+South+American+estuaries%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Distribution, sources and consequences of nutrients, persistent organic pollutants, metals and microplastics in South American estuaries.</a> Science of the Total Environment. 651, 1199-1218 (2019).</li>
<li>Eriksson, C., Burton, H., Fitch, S., Schulz, M., vanden Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+accumulation+rates+of+marine+debris+on+sub-Antarctic+island+beaches%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Daily accumulation rates of marine debris on sub-Antarctic island beaches.</a> Marine Pollution Bulletin. 66 (1-2), 199-208 (2013).</li>
<li>Zhang, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastics+in+offshore+sediment+in+the+Yellow+Sea+and+East+China+Sea%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">Microplastics in offshore sediment in the Yellow Sea and East China Sea, China.</a> Environmental Pollution. 244, 827-833 (2019).</li>
<li>Obbard, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+warming+releases+microplastic+legacy+frozen+in+Arctic+Sea+ice%5BTitle%5D)+AND+%22Earths+Future%22%5BJournal%5D)">Global warming releases microplastic legacy frozen in Arctic Sea ice.</a> Earths Future. 2 (6), 315-320 (2014).</li>
<li>Van Cauwenberghe, L., Vanreusel, A., Mees, J., Janssen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastic+pollution+in+deep-sea+sediments%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">Microplastic pollution in deep-sea sediments.</a> Environmental Pollution. 182, 495-499 (2013).</li>
<li>Wilcox, C., Van Sebille, E., Hardesty, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threat+of+plastic+pollution+to+seabirds+is+global%2C+pervasive%2C+and+increasing%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Threat of plastic pollution to seabirds is global, pervasive, and increasing.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (38), 11899-11904 (2015).</li>
<li>Wright, S. L., Thompson, R. C., Galloway, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physical+impacts+of+microplastics+on+marine+organisms%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">The physical impacts of microplastics on marine organisms: A review.</a> Environmental Pollution. 178, 483-492 (2013).</li>
<li>Ferreira, G. V. B., Barletta, M., Lima, A. R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+estuarine+resources+by+top+predator+fishes.+How+do+ecological+patterns+affect+rates+of+contamination+by+microplastics%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Use of estuarine resources by top predator fishes. How do ecological patterns affect rates of contamination by microplastics.</a> Science of the Total Environment. 655, 292-304 (2019).</li>
<li>Provencher, J. F., Vermaire, J. C., Avery-Gomm, S., Braune, B. M., Mallory, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Garbage+in+guano%3F+Microplastic+debris+found+in+faecal+precursors+of+seabirds+known+to+ingest+plastics%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Garbage in guano? Microplastic debris found in faecal precursors of seabirds known to ingest plastics.</a> Science of the Total Environment. 644, 1477-1484 (2018).</li>
<li>Baulch, S., Perry, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+impacts+of+marine+debris+on+cetaceans%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Evaluating the impacts of marine debris on cetaceans.</a> Marine Pollution Bulletin. 80 (1-2), 210-221 (2014).</li>
<li>Rochman, C. M., Kurobe, T., Flores, I., Teh, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+warning+signs+of+endocrine+disruption+in+adult+fish+from+the+ingestion+of+polyethylene+with+and+without+sorbed+chemical+pollutants+from+the+marine+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Early warning signs of endocrine disruption in adult fish from the ingestion of polyethylene with and without sorbed chemical pollutants from the marine environment.</a> Science of the Total Environment. 493, 656-661 (2014).</li>
<li>Mattsson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+damage+and+behavioural+disorders+in+fish+induced+by+plastic+nanoparticles+delivered+through+the+food+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Brain damage and behavioural disorders in fish induced by plastic nanoparticles delivered through the food chain.</a> Scientific Reports. 7, 7(2017).</li>
<li>Brown, D. M., Wilson, M. R., MacNee, W., Stone, V., Donaldson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-dependent+proinflammatory+effects+of+ultrafine+polystyrene+particles%3A+A+role+for+surface+area+and+oxidative+stress+in+the+enhanced+activity+of+ultrafines%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Size-dependent proinflammatory effects of ultrafine polystyrene particles: A role for surface area and oxidative stress in the enhanced activity of ultrafines.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 175 (3), 191-199 (2001).</li>
<li>Salvati, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+theoretical+comparison+of+intracellular+import+of+polymeric+nanoparticles+and+small+molecules%3A+toward+models+of+uptake+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine-Nanotechnology+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Experimental and theoretical comparison of intracellular import of polymeric nanoparticles and small molecules: toward models of uptake kinetics.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 7 (6), 818-826 (2011).</li>
<li>Frohlich, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+polystyrene+nanoparticles+of+different+sizes+on+lysosomal+function+and+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Particle+and+Fibre+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Action of polystyrene nanoparticles of different sizes on lysosomal function and integrity.</a> Particle and Fibre Toxicology. 9, 13(2012).</li>
<li>Bexiga, M. G., Kelly, C., Dawson, K. A., Simpson, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNAi-mediated+inhibition+of+apoptosis+fails+to+prevent+cationic+nanoparticle-induced+cell+death+in+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">RNAi-mediated inhibition of apoptosis fails to prevent cationic nanoparticle-induced cell death in cultured cells.</a> Nanomedicine. 9 (11), 1651-1664 (2014).</li>
<li>Lehner, R., Weder, C., Petri-Fink, A., Rothen-Rutishauser, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergence+of+Nanoplastic+in+the+Environment+and+Possible+Impact+on+Human+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science%2C+Technology%22%5BJournal%5D)">Emergence of Nanoplastic in the Environment and Possible Impact on Human Health.</a> Environmental Science, Technology. 53 (4), 1748-1765 (2019).</li>
<li>Pinsino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino-modified+polystyrene+nanoparticles+affect+signalling+pathways+of+the+sea+urchin+%28Paracentrotus+lividus%29+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotoxicology%22%5BJournal%5D)">Amino-modified polystyrene nanoparticles affect signalling pathways of the sea urchin (Paracentrotus lividus) embryos.</a> Nanotoxicology. 11 (2), 201-209 (2017).</li>
<li>El-Ghali, N., Rabadi, M., Ezin, A. M., De Bellard, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+Methods+for+Chicken+Embryo+Manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy+Research+and+Technique%22%5BJournal%5D)">New Methods for Chicken Embryo Manipulations.</a> Microscopy Research and Technique. 73 (1), 58-66 (2010).</li>
<li>Rashidi, H., Sottile, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chick+embryo%3A+hatching+a+model+for+contemporary+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">The chick embryo: hatching a model for contemporary biomedical research.</a> Bioessays. 31 (4), 459-465 (2009).</li>
<li>Faez, T., Skachkov, I., Versluis, M., Kooiman, K., de Jong, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+characterization+of+ultrasound+contrast+agents%3A+microbubble+spectroscopy+in+a+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">In vivo characterization of ultrasound contrast agents: microbubble spectroscopy in a chicken embryo.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 38 (9), 1608-1617 (2012).</li>
<li>Yamamoto, F. Y., Neto, F. F., Freitas, P. F., Ribeiro, C. A. O., Ortolani-Machado, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cadmium+effects+on+early+development+of+chick+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Cadmium effects on early development of chick embryos.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 34 (2), 548-555 (2012).</li>
<li>Li, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caffeine+interferes+embryonic+development+through+over-stimulating+serotonergic+system+in+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Chemical+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Caffeine interferes embryonic development through over-stimulating serotonergic system in chicken embryo.</a> Food and Chemical Toxicology. 50 (6), 1848-1853 (2012).</li>
<li>Lokman, N. A., Elder, A. S. F., Ricciardelli, C., Oehler, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+Chorioallantoic+Membrane+%28CAM%29+Assay+as+an+In+Vivo+Model+to+Study+the+Effect+of+Newly+Identified+Molecules+on+Ovarian+Cancer+Invasion+and+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay as an In Vivo Model to Study the Effect of Newly Identified Molecules on Ovarian Cancer Invasion and Metastasis.</a> International Journal of Molecular Sciences. 13 (8), 9959-9970 (2012).</li>
<li>Burns, E. E., Boxall, A. B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastics+in+the+aquatic+environment%3A+Evidence+for+or+against+adverse+impacts+and+major+knowledge+gaps%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Microplastics in the aquatic environment: Evidence for or against adverse impacts and major knowledge gaps.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 37 (11), 2776-2796 (2018).</li>
<li>Alejo-Plata, M. D., Herrera-Galindo, E., Cruz-Gonzalez, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+of+buoyant+fibers+adhering+to+Argonauta+nouryi+%28Cephalopoda%3A+Argonautidae%29+collected+from+the+stomach+contents+of+three+top+predators+in+the+Mexican+South+Pacific%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Description of buoyant fibers adhering to Argonauta nouryi (Cephalopoda: Argonautidae) collected from the stomach contents of three top predators in the Mexican South Pacific.</a> Marine Pollution Bulletin. 142, 504-509 (2019).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar. Todos los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia conocidos o relaciones personales que pudieran haber parecido haber influenciado en el trabajo de este artículo.

Este trabajo proporciona un esquema experimental eficaz para evaluar el desarrollo de embriones de codorniz mediante la detección de los índices básicos de desarrollo. Sin embargo, todavía hay algunas limitaciones a este experimento. 
En primer lugar, la mortalidad de los embriones de codorniz en la última etapa de la eclosión es mayor debido a la eclosión sin cáscara. Hay factores artificialmente incontrolables como la destrucción de la proporción normal de proteínas en el proceso experimenta...

La producción de residuos plásticos fue de aproximadamente 6300 Mt en 2015, una décima parte de los cuales se recicló, y el resto se quemó o enterró bajo tierra. Se estima que alrededor de 12.000 Mt de residuos plásticos estarán enterrados bajo tierra para 20501. Con la atención de la comunidad internacional a los residuos plásticos, Thompson propuso por primera vez el concepto de microplásticos en 20042. Los microplásticos (MPs) se refieren a plásticos de partículas pequeñas con un diámetro de partícula inferior a 5 mm. En la actualidad, los investigadores han detectado la presencia ubicua de diputados en la costa de varios continentes, las islas atlánticas, los lagos interiores, el Ártico y los hábitats de aguas profundas3,4,5,6,7. Por lo tanto, más investigadores han comenzado a estudiar los peligros ambientales de los diputados.
Los organismos podrían ingerir diputados en el medio ambiente. Se encontraron MPs en el tracto digestivo de 233 organismos marinos en todo el mundo (incluyendo 100% especies de tortugas, 36% especies de focas, 59% especies de ballenas, 59% especies de aves marinas, 92 tipos de peces marinos y 6 tipos de invertebrados)8. Además, los diputados pueden bloquear el sistema digestivo de los organismos, acumularse y migrar en sus bobies9. Se ha encontrado que los MPs pueden ser transferidos a través de la cadena alimentaria, y su ingesta difiere con los cambios de hábitat, etapa de crecimiento, hábitos de alimentación y fuentes de alimento10. Algunos investigadores informaron de la existencia de diputados en los excrementos de las aves marinas11, lo que significa que las aves marinas actúan como portadoras de los diputados. Además, la ingestión de MPs puede afectar la salud de algunos organismos. Por ejemplo, los diputados pueden enredarse en el tracto gastrointestinal, aumentando así la mortalidad de los cetáceos12.
Los diputados por sí solos tienen efectos tóxicos sobre los organismos, así como efectos tóxicos conjuntos sobre los organismos con otros contaminantes. La ingestión de concentraciones de desechos plásticos relacionadas con el medio ambiente puede perturbar la función del sistema endocrino de los peces adultos13. El tamaño de los microplásticos es uno de los factores importantes que afectan su absorción y acumulación por parte de los organismos14,15. Los plásticos de pequeño tamaño, especialmente los plásticos de tamaño nanosize, son propensos a la interacción con células y organismos con alta toxicidad16,17,18,19. Aunque los efectos nocivos de los microplásticos de tamaño de nanopartícula en los organismos superan el nivel de investigación actual, la detección y cuantificación de microplásticos con tamaños inferiores a varios micrómetros, especialmente los submicrón/nanoplásticos en el medio ambiente, sigue siendo un gran desafío. Además, los nanoplásticos también tienen algunos efectos sobre los embriones. El poliestireno puede dañar el desarrollo de embriones de erizo de mar mediante la regulación de perfiles proteicos ygénicos 20.
Para explorar el impacto potencial de los MPs en los organismos, realizamos este estudio. Debido a la similitud entre los embriones de aves y los embriones humanos, generalmente se utilizan en la investigación de biología del desarrollo21, incluyendo angiogénesis y antiangiogénesis, ingeniería de tejidos, implantes de biomateriales y tumores cerebrales22,23,24. Los embriones de aves tienen las ventajas de bajo costo, un ciclo de cultivo corto y fácil operación25,26. Por lo tanto, elegimos embriones de codorniz con un ciclo de crecimiento corto como el animal de experimentación en este estudio. Simultáneamente, podemos observar directamente los cambios morfológicos de los embriones de codorniz expuestos a los MPs durante la etapa de desarrollo embrionario utilizando una tecnología de eclosión sin cáscara de huevo. Los materiales experimentales utilizados fueron el polipropileno (PP) y el poliestireno (PS). Debido a que el PP y la PS27 representan la mayor proporción de tipos de polímeros obtenidos en sedimentos y cuerpos de agua en todo el mundo, los tipos de polímeros más comunes extraídos de organismos marinos capturados son el etileno y el propileno28. Este protocolo experimental describe todo el proceso de evaluación visual de los efectos toxicológicos de las MPs sobre los embriones de codorniz expuestos a MPs. Podemos ampliar fácilmente este método para examinar la toxicidad de otros contaminantes para el desarrollo embrionario de otros animales ovíparos.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; Molinillo de tejido de muestras múltiples</td><td>Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd.</td><td>Tissuelyser-24</td><td>Muela plásticos de gran tamaño en otros de tamaño pequeño a baja temperatura</td></tr><tr><td>Balanza electrónica</td><td>OHAUS corporation</td><td>PR Series Precision</td><td>Utilizado para pesar</td></tr><tr><td>huevos de codorniz fertilizados</td><td>Guangzhou Cangmu Agricultural Development Co., Ltd.</td><td></td><td>Huevos de codorniz para incubar sin cáscara</td></tr><tr><td>Partículas de polipropileno fluorescente</td><td>Foshan Juliang Optical Material Co., Ltd.</td><td></td><td>Tipos de plásticos seleccionados para el experimento</td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>Shandong, Bangda Incubation Equipment Co., Ltd.</td><td>264 piezas</td><td>Proporcionar un lugar para el crecimiento y desarrollo embrionario</td></tr><tr><td>Microesferas de poliestireno a escala nanométrica</td><td>Xi' y Ruixi Tecnología Biológica Co., Ltd.</td><td>100 nm, 200 nm, 500 nm</td><td>Tipos de plásticos seleccionados para el experimento</td></tr><tr><td>Regla de acero</td><td>Deli Group</td><td>20 cm</td><td>Se utiliza para medir la longitud</td></tr><tr><td>Esterilizador de vapor de presión de calentamiento vertical</td><td>Shanghai Shenan Fábrica de instrumentos médicos</td><td>LDZM-80KCS-II</td><td>Esterilizar los artículos experimentales</td></tr></tbody></table>

efectos ecotoxicológicos de los microplásticos en el desarrollo de embriones de aves por eclosión sin cáscara de huevo

Ecotoxicological Effects of Microplastics on Bird Embryo Development by Hatching without Eggshell

Los microplásticos son un tipo de contaminante global emergente que representa una gran amenaza para la salud de los animales debido a su absorción y translocación en los tejidos y órganos de los animales. Se conocen los efectos ecotoxicológicos de los microplásticos en el desarrollo de embriones de aves. El huevo de ave es un sistema completo de desarrollo y nutrición, y todo el desarrollo del embrión se produce en la cáscara de huevo. Por lo tanto, un registro directo del desarrollo de embriones de aves bajo el estrés de contaminantes como los microplásticos está altamente limitado por la cáscara de huevo opaca en la eclosión tradicional. En este estudio, los efectos de los microplásticos sobre el desarrollo de embriones de codorniz fueron monitoreados visualmente por eclosión sin cáscara de huevo. Los pasos principales incluyen la limpieza y desinfección de los huevos fertilizados, la incubación antes de la exposición, la incubación a corto plazo después de la exposición y la extracción de la muestra. Los resultados muestran que en comparación con el grupo de control, el peso húmedo y la longitud corporal del grupo expuesto a los microplásticos mostraron una diferencia estadística y la proporción hepática de todo el grupo expuesto aumentó significativamente. Además, se evaluaron los factores externos que afectan la incubación: temperatura, humedad, ángulo de rotación de huevos y otras condiciones. Este método experimental proporciona información valiosa sobre la ecotoxicología de los microplásticos y una nueva forma de estudiar los efectos adversos de los contaminantes en el desarrollo de embriones.

Para el análisis de los datos experimentales, se comparó el peso húmedo, la longitud corporal, la longitud del esternón y el cambio del índice hepatosomático entre el grupo control y los 6 grupos experimentales, midiendo y reflejando el crecimiento y desarrollo de los embriones de codorniz desde una perspectiva macro. Detectamos seis embriones normales de la codorniz en cada grupo. Cada embrión alcanzó la etapa requerida de Hamburger y Hamilton (HH).
En la Figura 1,</stron...

Este trabajo introduce un método de eclosión sin utilizar una cáscara de huevo para estudios toxicológicos de contaminantes de partículas como los microplásticos.

Efectos ecotoxicológicos de los microplásticos en el desarrollo de embriones de aves por eclosión sin cáscara de huevo

Microplastics are an emerging global pollutant type that poses a great health threat to animals due to their uptake and translocation in animal tissues ...

Este experimento encerrará cuatro partes. Preparación antes de la exposición, incubación de huevo de codorniz sin cáscara, proceso de incubación y una recogida de muestras, y resultados representativos. Por favor, vea el siguiente video para el proceso experimental específico. En la prueba de exposición, se seleccionó el mismo lote de huevos fertilizados con codorniz para el experimento. Los huevos con tamaño similar fueron seleccionados para reducir el error experimental. Al mismo tiempo, todas las codornices fertilizan los huevos y los huevos deben limpiarse por completo, porque habrá heces y otras sustancias en sus cáscaras. Después de eso, los huevos de codorniz pre-eclosionados, los fertilizados y los huevos a usar se desinfectaron con penicilina y una micina Al colocarlos, debe prestar atención a la parte superior hacia abajo y luego al extremo romo hacia arriba. El proceso de limpieza del huevo no se muestra en el video. El siguiente paso es el proceso de puesta a tierra de la cáscara de huevo. Es el paso más importante en la preparación. La cáscara de huevo cantada es un corte en el tamaño del huevo central con un taladro dental, pero no se puede romper. Tratando de hacer que la superficie de fractura de la incisión sea lo suficientemente suave, entonces la incubadora fue desinfectada con una solución de 75% Acinol. Huevo fertilizado de codorniz colocado en la incubadora con una humedad del 60% y 38

ecotoxicological-effects-microplastics-on-bird-embryo-development

Research

Investigación

JoVE Journal

Environment

Entorno

La facilidad de acceso del embrión ha permitido experimentos para trazar los destinos de células usando varios métodos, incluyendo pollo codorniz quimeras y tinte de etiquetado focal. En este artículo se demuestra un método de preparación de huevo que se ha optimizado el tiempo de supervivencia de largo.

Los huevos de ventanas de pollo para Estudios del Desarrollo

En este artículo se presenta una metodología sencilla para que a largo...

Un Ex-ovo</emPollo> Embrión de cultivo apropiado para aplicaciones de imagen y sistema de Microcirugía

El pinzón cebra (Taeniopygiaguttata) es un valioso organismo modelo; sin embargo, las primeras etapas del desarrollo del pinzón cebra no han sido ampliamente estudiadas. El protocolo describe cómo diseccionar embriones tempranos para aplicaciones moleculares y de desarrollo.

La disección y análisis de aguas abajo de Zebra Finch embriones en etapas tempranas del desarrollo

Exposición a toxinas ambientales agudo puede afectar a los embriones en desarrollo. Productos químicos disruptores endocrinos como bisfenoles se saben que negativamente afectan al sistema nervioso. Aquí describimos un protocolo usando un modelo de red neuronal en vitro vertebrado (embrión de pollo) para estudiar el impacto funcional de la exposición de la toxina en embriones tempranos.

Evaluación de los efectos del sistema endocrino interrumpir compuestos en el desarrollo de la función de red neuronal vertebrados utilizando electrodos múltiples

Agudo, exposición a tóxicos ambientales puede afectar desarrollo con efectos a largo plazo. Protocolos detallados se proporcionan para ilustrar una estrategia utilizando un modelo eficaz de laboratorio para estudiar el efecto de la exposición embrionaria temprana a bisfenol A. Ofrecemos Análisis de comportamiento para monitorear la efectividad de nuestros bio-ensayos de exposición de sustancias tóxicas y fecundidad.

Consecuencias conductuales y reproductivas a largo plazo de exposición embrionaria a dosis bajas sustancias tóxicas

Este protocolo describe tres métodos sobre cómo obtener y utilizar embriones de pollo de 5 a 8 días de edad y su membrana corioalantoidea (CAM) como modelo in vivo para estudiar imágenes de ultrasonido con contraste y administración de fármacos mediada por microburbujas.

La preparación de embriones de pollo ex ovo y vasos de membrana corioalantoicos como modelo in vivo para imágenes de ultrasonido con contraste y estudios de administración de fármacos mediados por microburbujas

Este es un método eficaz para detectar supresores o impulsores de metástasis del cáncer. Las células, transducidas con una biblioteca de expresión, se inyectan en la vasculatura de la membrana corioalantoica del pollo para formar colonias metastásicas. Las colonias que han disminuido o aumentado la invasividad se extirpan, se expanden, se reinyectan para confirmar su fenotipo y, finalmente, se analizan mediante secuenciación de alto rendimiento.

Descubrimiento de reguladores metastásicos utilizando un modelo de membrana corioalantoica intravital de pollitos rápido y cuantitativo

Los embriones/larvas de pez cebra se desarrollan externamente y son ópticamente transparentes. La bioacumulación de microplásticos en peces en etapas tempranas de la vida se evalúa fácilmente con microperlas etiquetadas fluorescentemente.

Acumulación Y Distribución De Microplásticos Fluorescentes En Las Primeras Etapas De La Vida Del Pez Cebra

Los embriones de pollo, como modelo de desarrollo clásico, se utilizan en nuestro laboratorio para evaluar las cardiotoxicidades del desarrollo después de la exposición a diversos contaminantes ambientales. Los métodos de exposición y los métodos de evaluación morfológica/funcional establecidos se describen en este manuscrito.

Uso del embrión de pollo como una herramienta poderosa en la evaluación de cardiotoxicidades del desarrollo

El ensayo de perla empapada implica la entrega dirigida de reactivo de prueba en cualquier punto de tiempo de desarrollo para estudiar la regulación de la diferenciación celular y la morfogénesis. Se presenta un protocolo detallado, aplicable a cualquier modelo animal experimental, para preparar tres tipos diferentes de perlas remojadas e implantarlas en el interdigito de un embrión de pollo.

Análisis de la diferenciación celular, la morfogénesis y el patrón durante la embriogénesis del pollo utilizando el ensayo de cuentas empapadas

Aprende a evaluar los efectos ecotoxicológicos de microplásticos en embriones de aves mediante el método de eclosión sin cáscara de huevo. Esta técnica innovadora mejora la fiabilidad de los estudios toxicológicos ambientales.

Efectos ecotoxicológicos de los microplásticos en el desarrollo de embriones de aves por eclosión sin cáscara de huevo

Explorar más videos